基于谷胱甘肽/谷胱甘肽过氧化物酶4轴探讨雷公藤甲素引起肝细胞铁死亡的作用机制

目的 观察雷公藤甲素对铁代谢和脂质过氧化的影响,探讨雷公藤甲素引起肝细胞铁死亡的可能机制。方法 利用雷公藤甲素处理人正常肝细胞HL7702和C57BL/6J小鼠,或利用铁死亡抑制剂（ferrostatin-1,Fer-1）和雷公藤甲素共同处理HL7702细胞,CCK-8法检测细胞存活率;普鲁士蓝染色观察铁沉积;试剂盒检测铁离子、谷胱甘肽（glutathione,GSH）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量以及超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）活性;qRT-PCR或Western blotting检测转铁蛋白受体1（transferrin receptor 1,TFR1）、谷胱甘肽过氧化物酶4（glutathione peroxidase 4,GPX4）、前列腺素内过氧化物合成酶2（prostaglandin-endoperoxide synthase 2,PTGS2）、长链脂酰辅酶A合成酶4（acyl-CoA synthetase long-chain family member 4,ACSL4）的表达。结果 雷公藤甲素显著降低细胞存活率（P＜0.05）,引起铁沉积,升高血清中ALT、AST活性（P＜0.05）,增加HL7702细胞和小鼠肝组织中铁离子、MDA含量（P＜0.05）,降低GSH含量、SOD活性和GPX4表达（P＜0.05）,上调TFR1、PTGS2及ACSL4表达（P＜0.05）。Fer-1显著上调细胞存活率和GPX4表达量（P＜0.05）,显著下调铁离子含量、TFR1、PTGS2及ACSL4表达（P＜0.05）。结论 雷公藤甲素可能通过GSH/GPX4轴引起铁代谢异常和脂质过氧化,诱导肝细胞铁死亡。