两种反胶束体系的水蛭素萃取效果比较

 目的 比较溴化十六烷基三甲铵（CTAB）-正丁醇-正辛烷反胶束体系及丁二酸-2-乙基己基酯磺酸钠（AOT）-异辛烷反胶束体系的水蛭素萃取效果。方法 以抗凝血酶活性单位（ATU）的萃取率为指标,用凝血酶滴定改进法测定萃取物的活性,正交实验对盐浓度、pH、搅拌时间、表面活性剂浓度等因素进行考察,优化CTAB-正丁醇-正辛烷体系及AOT-异辛烷体系的水蛭素对照品溶液反胶束萃取工艺,并进行水蛭素粗提液的分离纯化实验。结果 水蛭素CTAB反胶束体系最佳萃取工艺为：萃取pH 10.0,反萃取pH 2.0,萃取液NaBr浓度30 mmol·L-1、CTAB浓度85 mmol·L-1,反萃取液NaBr浓度32 mmol·L-1,萃取及反萃取均为30 ℃,萃取及反萃取均搅拌5 min;AOT反胶束体系最佳萃取工艺为：萃取pH 2.0,反萃取pH 9.0,萃取液KCl浓度26.5 mmol·L-1、AOT浓度30 mmol·L-1,反萃取液KCl浓度27.5 mmol·L-1,萃取及反萃取均为30 ℃,萃取搅拌5 min,反萃取搅拌9 min。ATU回收率前者为82.95%,后者为85.53%;水蛭素粗提液分离纯化实验两者的ATU回收率分别为80.70%和82.15%、比活性分别为2 389.54及2 459.98 ATU·mg-1。结论 两种反胶束体系的水蛭素萃取效果都较好,而后者又稍优于前者。     

双水相萃取-凝胶色谱联用法提取菲牛蛭中的水蛭素

 目的 建立水蛭素的双水相萃取-凝胶色谱联用提取法。方法 以抗凝血酶活性单位（ATU）为指标,在优化双水相萃取工艺条件基础上,建立以广西菲牛蛭消化液为原料的聚乙二醇/硫酸铵双水相萃取-凝胶色谱联用提取水蛭素新工艺。结果 在所考察的实验范围内,水蛭素对照品双水相萃取最佳工艺条件是：PEG 2000、(NH₄)₂SO₄、NaCl质量分数依次为22%、20%、0.04%,萃取液温度35 ℃、pH 6.0;萃取物经凝胶色谱除杂以后,得到纯度较高的产品。实验建立的提取工艺处理水蛭素对照品ATU回收率达到81.92%,粗提液分离纯化及小规模工艺放大实验ATU回收率分别为80.34%、80.36%。所获产品比活性达到3 210.27 ATU·mg^-1、不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳及光谱扫描结果与水蛭素对照品相同。结论 双水相萃取-凝胶色谱联用提取水蛭素效果较好。