白香丹含药血清对大鼠海马神经元中5-羟色胺2C受体的表达及其下游信号通路中IP_3的影响

目的观察白香丹胶囊含药血清对原代海马神经元中5-羟色胺2C受体(5-HTR2C)蛋白表达水平及下游信号通路中IP3含量的影响,探讨其可能的中枢作用机制。方法采用情志刺激为主多因素造模法制备经前期综合征(PMS)肝气逆证大鼠模型,给予白香丹干预,制备大鼠含药血清,结合中药血清药理学,对体外培养的新生大鼠原代海马神经元进行不同血清干预,运用Western blot方法检测海马神经元中5-HTR2C蛋白表达水平,运用ELISA法检测各组海马神经细胞内IP3的含量。结果与正常血清组相比,PMS肝气逆模型血清组海马神经元的5-HTR2C蛋白表达水平和下游信号通路中IP3含量均明显升高(P<0.01,P<0.01),白香丹含药血清能够明显降低5-HTR2C蛋白表达水平和IP3的含量(P<0.01,P<0.01)。结论 PMS肝气逆证模型大鼠血清使海马神经元中5-HTR2C蛋白表达异常升高,同时,可引起第二信使IP3含量升高;白香丹胶囊可能通过降低5-HTR2C蛋白表达水平,改变其下游信号通路中IP3的含量而发挥疗效。     

抑郁情绪模型大鼠旷场数据的聚合分析

背景:多次测量正常大鼠的旷场数据,以加和方式进行数据聚合,可显著提高旷场指标的稳定性与一致性,此方法对造模后大鼠的旷场行为是否适用?目的:分析抑郁情绪模型大鼠旷场实验中活动量总得分的最佳聚合方式。方法:采用慢性温和刺激法复制抑郁情绪大鼠模型。在4周的造模过程中,每隔1周采集1次旷场行为学指标。采用两两聚合的分析方法(连续聚合,间隔聚合,立意聚合)处理数据,比对不同聚合手段对模型制备信度及相关性的影响。结果与结论:①一致性系数Kappa结果:间隔聚合与立意聚合的聚合方式都能得到较好的可信度(Kappa=0.611,P<0.05),连续聚合方式可信度一般(Kappa=0.222)。②组内相关系数ICC结果:只有立意聚合的可信度极好(ICC=0.835,P<0.01),间隔聚合方式呈较好可信度(ICC=0.792,P<0.05),连续聚合方式可信度差(ICC=0.196)。说明恰当的立意聚合可以大幅提升抑郁情绪大鼠旷场数据的可信度与稳定性。     

焦虑大鼠模型高架十字迷宫实验的复测信度检验及参数相关性分析

目的：探讨高架十字迷宫（elevated plus-maze,EPM）作为焦虑大鼠模型评价方法的复测信度及其参数相关性。方法：将成年雌性Wistar大鼠放入高架十字迷宫中,摄像系统记录5 min的行为变化,实验间隔1周进行2次;实验参数如下：进入开放臂次数、进入封闭臂次数、向下探究次数、封闭臂后腿直立次数、进入开放臂时间、进入封闭臂时间。结果：①组内相关系数（ICC）结果表明,除封闭臂后腿直立次数和向下探究次数初测与复测相关性差外,其他参数均显示EPM的初测与复测具有较好的相关性。②一致性系数（Kappa）结果表明,所有参数均显示EPM复测可信度较好,Kappa值均〉0.5。结论：进入开放壁时间百分比、进入开放壁次数百分比和总进臂次数在EPM初测及复测实验中均呈较好复测信度。     

经前舒颗粒对经前期综合征肝气郁证大鼠海马和下丘脑5-HT1A受体表达的影响

目的:研究经前舒颗粒对经前期综合征(premenstrual syndrome,PMS)肝气郁证大鼠海马下丘脑5-羟色胺1A受体( serotonin receptor-1A,5-HT1AR)表达水平的影响.方法:束缚造模法复制PMS肝气郁证大鼠模型,旷场实验评价模型,RTPCR和Western blot方法分别检测大鼠海马和下丘脑5-HT1AR的mRNA及蛋白的表达.结果:经前舒颗粒给药后大鼠旷场实验得分显著升高,海马、下丘脑5-HT1AR mRNA和蛋白表达均显著升高.结论:经前舒颗粒可上调海马和下丘脑中5-HT1AR的表达,这可能是其治疗PMS肝气郁证的作用机制之一.     

白香丹对PMS肝气逆证模型大鼠GABA_BR亚基分布及表达的影响

目的观察白香丹对经前期综合征(PMS)肝气逆证模型大鼠额区和下丘脑中γ-氨基丁酸(GABA)B1受体(GBR1)、γ-氨基丁酸B2受体(GBR2)分布及表达的影响,探讨白香丹对PMS肝气逆证的干预机制。方法通过旷场实验和阴道涂片法筛选健康雌性Wistar大鼠进入实验,采用电刺激法复制PMS肝气逆证大鼠模型,用免疫荧光双标记技术检测GBR1和GBR2在额区和下丘脑中的表达。结果与正常对照组大鼠比较,模型组大鼠垂直得分、水平得分和总分均显著增加(P<0.01),GBR1和GBR2蛋白在额区和下丘脑中的表达水平降低(P<0.01);与模型组大鼠比较,白香丹组和巴氯芬组大鼠旷场得分显著降低(P<0.01,P<0.05),GBR1和GBR2蛋白在额区和下丘脑中的表达水平明显上升(P<0.01,P<0.05),但两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 GABABR亚基(GBR1和GBR2)表达的下调可能与PMS肝气逆证的发生密切相关;白香丹可对GBR1、GBR2的表达起到调节作用。