理气散结浸膏对小鼠和大鼠急性毒性研究

目的:研究理气散结浸膏对小鼠、大鼠的急性毒性实验,为长期毒性试验和主要药效学研究中的剂量设置提供依据。方法:KM种小鼠和SD大鼠各40只,全雌,分为空白对照组和理气散结浸膏组,在24 h内,每组小鼠均按40 m L﹒kg~(-1)一次性灌胃给予生理盐水和理气散结浸膏溶液的最大浓度(2.4365 g生药/m L),每组大鼠分别按20 m L﹒kg~(-1)的体积(10 m L/kg/次×2次,每次间隔4 h)灌胃给予生理盐水和理气散结浸膏溶液的最大浓度(2.4365 g生药/m L)。在给药后14 d内,每天观察动物的毒性反应症状。同时观察中毒反应的出现时间、维持时间、是否可逆及严重程度,分析可能的靶器官、组织或系统。结果:观察期内,未见动物死亡、中毒症状和肉眼可见的脏器异常。与空白对照组比较,小鼠和大鼠在灌胃后的0.5~1 h内,普遍出现精神萎靡、鼻尖微微发红的症状,并在接下来0.5 h内恢复正常,后续观察中未见异常。与空白对照组比较,理气散结浸膏组动物的体重及饲料消耗量均无显著性差异(P0.05)。理气散结浸膏经口灌胃给予小鼠和大鼠后14天,小鼠血红蛋白(HGB)、红细胞比积(HCT)、平均红细胞体积(MCV)、平均血小板体积(MPV)以及血清中胆固醇(TC)均存在显著性差异(P0.05),大鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和葡萄糖(GLU)差异显著(P0.05),但变化值均在正常范围内;其余各项指标无显著性差异。结论:小鼠和大鼠经口给予理气散结浸膏的最大给药量分别为97.46 g生药/(kg﹒d)和48.73 g生药/(kg﹒d),虽不导致动物死亡,亦未出现肉眼可见的毒性反应,但仍需注意监测血常规和血液生化学指标。     

大鼠乳腺增生模型造模要素及中医药防治数据挖掘研究

目的:定量研究乳腺增生动物模型的造模要素和防治药物,为提高造模效率和科学评价药物有效性提供参考。方法:收集1989-2016年研究乳腺增生动物模型文献202篇,录入造模工具药名称、给予天数、注射剂量及部位、评价指标、受试药物、阳性对照药、测试指标等信息,进行定量统计和分析。结果:选取200 g左右的SD雌性未孕大鼠,常用造模试剂及其剂量配比有苯甲酸雌二醇联合黄体酮(0.5 mg﹒kg~(-1)+4 mg﹒kg~(-1)、0.5 mg﹒kg~(-1)+5 mg﹒kg~(-1))、苯甲酸雌二醇(0.5 mg﹒kg~(-1))、己烯雌酚注射液联合黄体酮(0.5 mg﹒kg~(-1)+4 mg﹒kg~(-1))等,连续肌肉注射30 d;常见测试指标包括血清生化指标E2、P、T、PRL、FSH、LH等,乳腺组织病理学及其中机制指标ER、PR、VEGF、bFGF等;以治疗性给药为主,给药周期为29天左右,常用他莫昔芬和中药复方,涉及柴胡、当归、香附、丹参、白芍、鹿角、郁金、延胡索、夏枯草和浙贝母等170种药材。结论:推荐乳腺增生造模方案为肌肉注射苯甲酸雌二醇和黄体酮(0.5 mg﹒kg~(-1)+4 mg﹒kg~(-1)),造模天数30 d(苯甲酸雌二醇25 d,黄体酮5 d),造模次数1次/d,阳性对照药可选择他莫昔芬或乳癖消。     

理气散结颗粒理气调血、散结止痛的药效学作用

目的研究理气散结颗粒对气滞血瘀、疼痛等症状的改善作用。方法构建大鼠急性血瘀模型及小鼠肉芽组织增生模型,随机分为空白组、模型组、阳性药组(复方丹参片组0.45 g/kg、小金丸组0.20 g/kg)、理气散结丸组(1.9570 g生药/kg)、理气散结颗粒低、中、高剂量组(0.9785、1.9570、3.9140 g生药/kg),连续灌胃给药7 d。检测大鼠血液流变学,热板法检测小鼠痛阈值,醋酸扭体法检测小鼠扭体次数,末次给药取小鼠肉芽并称定质量。结果与模型组比较,理气散结颗粒低剂量组大鼠的血沉和红细胞压积无明显变化(P>0.05),血浆黏度明显升高(P<0.01),其余血液流变学指标均明显降低(P<0.05,P<0.01);中剂量组大鼠的全血相对指数(高切)、全血还原黏度(高切)、红细胞刚性指数、红细胞变形指数和卡松黏度均明显升高(P<0.05,P<0.01);理气散结颗粒低、中剂量组小鼠的肉芽肿重量明显减轻(P<0.05,P<0.01)。理气散结颗粒中剂量组小鼠的痛阈值在第90、120分钟时均明显升高(P<0.05),高剂量组小鼠的痛阈值在第45、90分钟时明显升高(P<0.05);中剂量组和高剂量组小鼠的扭体潜伏期明显延长(P<0.01),低、中、高3个剂量组的扭体次数明显减少(P<0.01)。结论理气散结颗粒具有活血化瘀、抗炎和镇痛的作用,有利于临床治疗乳腺增生。     

鲜干品组方六神曲发酵前后指标成分的LC-MS测定及指纹图谱分析

目的:建立六神曲的指纹图谱质控方法,比较鲜干品各组样品发酵前后槲皮苷、槲皮素、木犀草素等成分的变化状况。方法:经拆方研究,按前期优选的工艺制备六神曲基本组及鲜干品各组,分别为基本组、鲜品煎汁组、干品1/3量煎汁组及干品全量煎汁组,并于发酵前后取样检测。采用LC-MS检测,Ulitimate XB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-0.2%甲酸水溶液梯度洗脱,检测波长254 nm,电喷雾离子源(ESI),正离子模式检测。结果:确定鲜干品组方六神曲指纹图谱共有峰15个,其中10,13,15号峰分别为槲皮苷、木犀草素、槲皮素。基本组仅含木犀草素,发酵前后质量分数分别为18.5,21.3μg·g~(-1),明显低于其他3组。在发酵前,鲜品煎汁组样品的3种成分含量均显著高于其他3组,与发酵前相比,发酵后木犀草素、槲皮素质量分数分别增长54.84%,4.53%;槲皮苷质量分数降低了0.76%。干品全量煎汁组发酵后3种成分含量较发酵前显著增加,其中槲皮苷、木犀草素、槲皮素质量分数分别增加了59.9%,161.7%,75.5%。结论:该质控检测方法精密、准确、重复性好,适用于六神曲的量化质量评价。发酵法可促进六神曲部分药效成分的溶出度增加及其生物转化反应的发生,初步揭示了六神曲发酵前后药效物质变化状况及鲜品入药优于干品的药效物质基础。