一种新的乙型肝炎病毒X基因变异方式

目的:证实乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)X基因一种新的变异方式.方法:从HBV慢性感染患者血清中提取HBVDNA,扩增X基因序列,克隆入pMD19 T载体,选择阳性克隆进行DNA测序,与已知HBV基因相应序列比较该患者体内HBV基因变异位点以及变异形式.结果:从21例患者中共挑选74个克隆测序,测序结果提示54个克隆X基因下游大段缺失突变,长度达234 nt,位于1601-1834 nt处,另有1个克隆发生245 nt缺失突变.发生缺失变异的病毒株同时存在G/A1515C、G1518C和A1585T替换突变,这两种突变具有联动特征.缺失突变株HBx仅编码76 aa其第44和45位编码为LL,具有特异性.结论:观察到一种X蛋白变异方式,这种大段缺失突变导致X蛋白下游编码序列丢失,其为X因子还是X蛋白以及这种变异是否为常态形式尚需进一步研究.     

肝肾康口服液质量标准研究

目的：建立肝肾康口服液的质量标准。方法：采用TLC法对处方中的桑椹、枸杞子、何首乌、甘草进行鉴别;用滴定法测定多糖含量。结果：在TLC色谱中均能检出桑椹、枸杞子、何首乌和甘草;多糖含量均在每支（10ml)60mg以上,重现性好,平均回收率为96．6％,RSD为1．17％。结论：所建立的方法对处方中各组成药材可准确、快速地进行定性、定量检测。     

强身健脑片中芍药苷的含量测定

强身健脑片由人参、白芍、鹿茸、当归等十多味名贵中药材组成,具有镇静、安神之功效,用于神经衰弱、失眠健忘、头昏目眩、易感疲劳、营养不良、身体虚弱的治疗。本制剂收载于中药成方制剂第六册,质量控制仅有几个显色反应,无专属性。后来,为了加强产品的质量监控,保证用药安全,增加了显     

三叶因子2相互作用蛋白基因在胃癌细胞cDNA文库中的筛选

目的:筛选并克隆人胃癌细胞eDNA文库中与三叶因子2(trefoil factor family 2,TFF2)蛋白相互作用的蛋白基因.方法:RT-PCR方法验证胃癌细胞存在TFF2mRNA表达:PCR法扩增TFF2基因,Not I与Sal I双酶切后定向克隆到酵母表达载体pDEST32,构建TFF2的诱饵质粒;Western blot验证TFF2诱饵质粒在酵母细胞中相应融合蛋白的表达:将诱饵质粒和人胃癌-cDNA文库猎物质粒共同转化MaV203酵母感受态细胞,通过营养缺陷型培养基(ura、His)与x-gal进行3重筛选阳性克隆,提取阳性克隆质粒测序,应用蛋白质数据库及生物信息学技术,对测序结果进行分析.结果:RT-PCR法证实胃癌细胞中存在TFF2mRNA表达;构建pDEST32-TFF2诱饵表达质粒成功:Western blot法证实诱饵质粒转化酵母细胞后正确表达TFF2-GAL4DBD融合蛋白:通过酵母双杂交筛选胃癌细胞cDNA文库,共获得35个表达His、Ura及x-gal报告基因的阳性克隆,其中测序成功为16个克隆,包含12个已知蛋白基因与4个未知功能基因.结论:从胃癌细胞cDNA文库中筛选出多种TFF2相互作用蛋白基因,其可能与胃癌的发生发展密切相关.     

首杞补肾口服液对小鼠免疫功能的影响

目的：观察首杞补肾口服液对小鼠免疫功能的影响。方法：观察首杞补肾口服液对醋酸氢化考的松所致免疫抑制小鼠脾脏淋巴细胞转化、自然杀伤(NK)细胞活性、产生溶血素能力的影响以及对环磷酰胺所致免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响。结果：首杞补肾口服液对醋酸氢化考的松所致免疫抑制小鼠脾脏淋巴细胞转化有明显的纠正作用，使NK细胞活性恢复更为显著，产生溶血素的能力明显提高，以及可使低下的吞噬功能明显恢复。结论：首杞补肾口服液对免疫抑制模型(醋酸氢化考的松或环磷酰胺所诱导)小鼠的细胞免疫(淋巴细胞转化、NK细胞活性)、体液免疫(溶血素)和非特异性免疫(巨噬细胞吞噬实验)等功能有明显的治疗作用，说明首杞补肾口服液对免疫功能低下有显著的调节作用，能够增强机体的抵抗力。     

乙型肝炎病毒前-X融合蛋白结合蛋白的筛选

目的利用酵母双杂交技术自肝细胞cDNA文库中筛选HBV前-X(pre-X)融合蛋白结合蛋白,探讨pre-X融合蛋白的生物学功能。方法 PCR扩增HBV pre-X基因序列,根据酵母双杂合体系构建诱饵质粒pDEST32-pre-X,并测定DNA序列验证。将质粒pDEST32-pre-X转化为酵母细胞MaV203,应用Western blot验证pre-X融合蛋白在酵母细胞中正确表达,再与转化为人肝细胞cDNA文库质粒的酵母细胞pDEST22配合,在营养缺陷型培养基和X-gal上三重筛选阳性菌落,提取阳性酵母菌落的猎物质粒进行DNA测序。利用核苷酸数据库及生物信息学技术,对筛选结果进行分析。结果成功构建pDEST32-pre-X诱饵质粒,Western blot证实转化诱饵质粒的酵母细胞能正确表达pre-X融合蛋白,pDEST32-pre-X及正常成人肝细胞cDNA文库共转化酵母细胞后,选择性培养出45个菌落,经缺陷培养基分离及X-gal检测后筛选出3个阳性克隆,测序结果为一种蛋白,即TCP1蛋白。结论用酵母双杂交技术筛选出1个与pre-X融合蛋白相互作用的肝细胞结合蛋白,为进一步研究HBV pre-X融合蛋白的作用提供了新线索。     

超声骨刀在双侧颞下颌关节强直手术中应用的护理

总结了本院手术室使用超声骨刀在40例双侧颞下颌关节强直手术患者中应用的护理。主要包括针对此类手术的特点及患者心理需求手术室护理人员所采取的个性化术前访视,术中护理人员对患者的护理、麻醉期与麻醉医生、手术中与主刀医生使用超声骨刀的配合,术后患者的健康指导等。认为与常规的手术方式相比,超声骨刀在应用于双侧颞下颌关节手术中结合优质的手术配合及护理,40例手术患者能达到术中出血少、术后并发症发生率降低及缩短疼痛时间等预期效果。     

乙型肝炎病毒X蛋白在肝细胞癌发生中的作用机制

HBx蛋白（HBxAg）被认为是乙型肝炎病毒（HBV）致肝细胞癌（HCC）的病毒蛋白,能影响肝细胞的生长、转化、迁移和凋亡以及DNA的修复等过程,己成为近年来研究的热点之一。HBx是一种多功能的病毒蛋白,有转录调控作用,对肝细胞内许多癌基因和／或抑癌基因的表达有直接或间接的影响,在肝癌形成中起重要作用。通过对HBx在肝癌发生、发展中机制的深入研究,有望在HCC防治方面开辟新途径。