人参囊泡调控肿瘤免疫微环境的活性成分研究

目的 探讨人参Panx ginseng来源的细胞外囊泡（ginseng-derived nanoparticles,GDNPs）在调控肿瘤相关巨噬细胞表型及抑制黑色素瘤生长方面的潜在物质基础。方法 采用纳米颗粒跟踪分析仪、透射电镜测试及紫外-可见分光光度法全面表征GDNPs及其主要成分（蛋白质、多糖和皂苷）的含量;通过qRT-PCR和流式细胞术检测GDNPs与其含有的多糖、皂苷成分对骨髓来源巨噬细胞（bone marrow-derived macrophage,BMDM）表型的调控影响。收集不同极化程度的BMDM条件培养基（conditional medium,CM）孵育小鼠皮肤黑色素瘤B16F10细胞,CCK-8法测定不同CM处理后B16F10细胞活力,验证活性成分对肿瘤免疫微环境的调控作用;通过PMP柱前衍生法定量分析GDNPs活性成分组成。结果 透射电镜下观察GDNPs形态结构良好,含量测定结果为2.46×10¹¹颗粒的GDNPs含有4.31 mg蛋白质、4.46 mg多糖、1.22 mg皂苷。qRT-PCR和流式细胞术实验结果显示GDNPs多糖可以逆转M2型巨噬细胞表型,向M1方向极化。GDNPs多糖诱导巨噬细胞极化后的CM显著抑制了B16F10细胞活力。PMP柱前衍生法分析GDNPs多糖成分由葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成,其物质的量比为4.72∶1.07∶2.15。结论 揭示了GDNPs中多糖成分在调控肿瘤免疫微环境的关键作用,为进一步的机制研究和临床应用提供了实验依据。     

基于HPLC-Q-TOF-MS、指纹图谱和含量测定的精气神口服液质量评价研究

目的 建立精气神口服液HPLC-ELSD指纹图谱及其活性成分的含量测定方法。方法 采用HPLC-Q-TOF-MS技术对精气神口服液化学成分进行分析,应用相似度评价对数据进行研究。采用Agilent TC-C₁₈(250 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱,以乙腈(A)-水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,建立精气神口服液HPLC-ELSD指纹图谱并进行含量测定。结果 HPLC-Q-TOF-MS共鉴定出75个化合物;通过10批样品HPLC-ELSD指纹图谱标定了14个共有峰,通过对照品比对,共指认了斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rd、人参皂苷Rf、人参皂苷Rg₃8个色谱峰。为进一步控制口服液的整体质量,选取其中斯皮诺素、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re和人参皂苷Rb₁4个活性成分,进行含量测定,各活性成分线性关系良好,建立的方法灵敏度高,稳定性和准确度良好。结论 建立的含量测定与指纹图谱同时测定的方法准确、稳定,可...