葫芦素B磷脂胆酸盐混合胶束口腔速溶膜的制备、表征和抗肿瘤活性研究

该研究制备了葫芦素B磷脂胆酸盐混合胶束的口腔溶吸膜,考察了葫芦素B磷脂胆酸盐混合胶束利用口腔速吸膜固化前后的包封率、粒径、Zeta电位、多分散性系数、膜剂的外观形态、崩解时限以及葫芦素B在小鼠的体内药效学性质。该研究中制备的速溶膜外观呈均匀的淡黄色,可以在30 s内完全崩解,固化后的葫芦素B磷脂胆酸盐混合胶束在室温下储存120 d后,包封率、粒径、Zeta电位和多分散性系数分别是（43.36±2.12）%,（108.82±5.28） nm,（-34.18±1.07） mV,0.088±0.012;未固化的葫芦素B磷脂胆酸盐混合胶束则分别是（41.26±2.22）%,（181.82±4.48） nm,（-30.67±0.81） mV,0.092±0.012。包封在磷脂胆酸盐混合胶束后,葫芦素B溶解度明显提升。相较于葫芦素B混悬液,包封在磷脂胆酸盐混合胶束中葫芦素B对肿瘤细胞的生长抑制率明显提升。利用口腔速溶膜固化前后葫芦素B磷脂胆酸盐混合胶束对小鼠肿瘤的抑制率没有明显改变,分别是（93.17±0.43）%,（93.24±0.21）%。实验结果说明说磷脂胆酸盐混合胶束可以有效提高葫芦素B在小鼠体内的抗肿瘤活性,利用口腔速吸膜固化后胶束稳定性明显提高且葫芦素B的药效学性质没有明显改变。     

正交设计多指标综合评分优化鳖甲微波灭菌工艺

目的:优选鳖甲的微波灭菌工艺。方法:以药材含湿率、灭菌时间、灭菌功率为考察因素,以灭菌率和鳖甲抗肝纤维化作用(人肝星状细胞LX-2生长抑制率)为评价指标,采用正交设计多指标综合评分法优化微波灭菌鳖甲的工艺参数。结果:最佳微波灭菌工艺参数:灭菌时间为6min,药材含湿率为20%,灭菌功率为4 000W。结论:正交设计多指标综合评分法可用于鳖甲微波灭菌工艺的参数优化,该方法简便可行,且灭菌效率高,对鳖甲抗肝纤维作用无影响。     

不同粒度赤芍药材抗肝纤维化作用的谱效关系研究

目的研究不同粉碎粒度赤芍药材的高效液相指纹图谱与其抗纤维化作用的谱效关系,揭示赤芍药材抗肝纤维化作用的"药效成分组"。方法对赤芍药材进行不同程度的粉碎,用高效液相色谱法测定各粉碎粒度赤芍提取液的指纹图谱,确定特征共有峰。以肝星状细胞LX-2为模型研究其对肝纤细胞的抑制效果,采用SPSS软件对数据进行相关分析研究谱效相关性。结果 300目与200目赤芍提取液对肝星状细胞LX-2的抑制效果无差异(P0.05),但与100目、150目赤芍提取液抑制效果比较具有显著性差异(P0.01)。各粉碎粒度赤芍药材高效液相指纹图谱中共有19个特征共有峰,其中峰16、峰9与肝星状细胞LX-2抑制效果(OD值)的相关性分别呈极弱相关、弱相关,峰7、峰17呈强相关,其余各峰均呈极强相关。结论 200目为赤芍药材较优粉碎粒度。     

葫芦素B磷脂复合物制备、表征及体外抗肿瘤活性研究

目的制备葫芦素B磷脂复合物(Cu B-PLC),对其进行理化性质评价和体外抗肿瘤活性测定。方法采用溶剂挥发法制备Cu B-PLC,用Box-Behnken设计-效应面法优化其制备工艺,考察其表观油水分配系数、粒径及形态;用X射线衍射光谱(XRD)、红外光谱(IR)综合分析Cu B-PLC的形成机制,利用MTT法测定其体外抗肿瘤活性。结果优化的Cu B-PLC制备工艺为以四氢呋喃作为反应溶剂,磷脂与葫芦素B的投药物质的量比为1∶1,反应质量浓度为1.5 mg/m L,反应温度和反应时间分别为60℃和3 h,复合率可达97.15%。XRD和IR分析表明葫芦素B与磷脂未形成新的化合物或混合物,而是磷脂复合物;Cu B-PLC在水中的溶解度提高到原料药的3.9倍;在水中复合物粒径为(521.30±10.50)nm,多分散指数(PDI)为0.133 2±0.024 0;MTT实验表明,葫芦素B与Cu B-PLC对Hep G2细胞增殖的半数抑制浓度(IC50)值分别为42.55、27.61μmol/L。结论成功制备了Cu B-PLC,工艺简单可行,复合率高,水溶性有所改善,且对Hep G2细胞增殖的抑制作用显著增强,为葫芦素B的制剂学研究提供了参考。     

鳖甲HPLC指纹图谱的分析模式探讨

目的:建立不同产地鳖甲药材的高效液相指纹图谱评价方法。方法:采用HPLC-DAD方法测定了12个产地鳖甲药材样品,通过"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"2004 A进行评价,建立了共有模式,以相关度评价图谱的相似性,对结果进行聚类分析和主成分分析。结果:12批不同产地的鳖甲药材有7个共有峰,其高效液相色谱指纹图谱相似度均在0.9以上,不同产地鳖甲药材可分为两类,质量相似性较好;主成分分析结果同聚类分析法分析结果一致,经主成分分析,12批鳖甲药材共提取出3个主成分,其累积贡献率达83.21%。结论:用SPSS软件对鳖甲药材的指纹图谱进行主成分分析及聚类分析,所建立的模式识别方法,操作简便,统计结果具有可靠性,对鳖甲药材化学计量学分类及其质量评价提供有效参考。     

小菜蛾抗菌肽聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒的制备及体外评价

目的制备小菜蛾抗菌肽(CA)聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米粒(CA-PLGA-NPs),并对其理化性质及体外释放度进行研究。方法采用S/W/O/W复乳法结合高压均质法制备CA-PLGA-NPs,对其纳米粒的形态、粒径、多分散指数(PDI)、载药量、包封率和体外释放度进行研究。结果 CA-PLGA-NPs呈球形或类球形,粒径、PDI、载药量、包封率分别为(358.76±22.51)nm、0.168 1±0.012 2、(10.50±0.28)%、(60.92±1.58)%,突释现象不明显,2~10 d内达到释药稳定期。结论 S/W/O/W复乳法结合高压均质法制备CA-PLGA-NPs工艺可行,为小菜蛾抗菌肽给药提供了制剂学基础。     

鳖甲药材指纹图谱与其抗肝纤维化作用的谱效关系研究

目的研究不同产地鳖甲药材的HPLC指纹图谱与其抗纤维化作用的谱效关系,揭示鳖甲药材抗肝纤维化作用的"药效成分组"。方法 HPLC-DAD法测定了12个产地鳖甲药材样品,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004 A进行评价,建立了共有模式,并进行主成分分析(PCA)。以LX-2肝星状细胞为模型研究其对肝细胞的抑制效果,采用SPSS软件对数据进行相关分析,研究谱效相关性。结果 12个产地鳖甲药材HPLC指纹图谱中共有7个特征共有峰,其中峰2、5与LX-2肝星状细胞抑制效果(A值)的相关性呈现中等程度相关,峰4的相关性最强。由PCA可知,峰4的量对鳖甲质量有着重要的影响。结论 12个产地鳖甲药材对LX-2肝星状细胞均有抑制作用,HPLC指纹图谱与其抗纤维化作用之间有一定的相关性,为进一步控制鳖甲药材内在质量提供参考。     

基于生物效价-多成分整合的中药固体制剂体外溶出度研究

目的 探讨符合中医药特点的中药固体制剂质量控制与评价的化学-生物联合评价模式。方法 以复方鳖甲软肝片为模型药,考察在pH 7.4磷酸盐缓冲液溶出介质中,不同溶出时间的复方鳖甲软肝片溶出液对LX-2肝星状细胞的抑制作用,提出基于细胞抑制率所得复方鳖甲软肝片的累积溶出度,与HPLC法所测的芍药苷、连翘苷、人参皂苷Rg₁各指标成分的溶出度及自定义权重系数的多成分整合的溶出度运用f₂相似因子法分别进行相关性评价。结果 芍药苷、连翘苷、人参皂苷Rg₁各指标成分的溶出度及其整合的溶出度f₂相似因子依次为43、58、61、59,说明多成分整合的溶出度能较为全面地反映全方的生物效价。结论 以生物活性为导向的多成分整合的溶出度评价方法有望成为评价中药固体制剂体外溶出度的有效手段之一。     

基于生物效价评价不同粉碎粒度对复方鳖甲软肝片体外溶出度的影响

目的 采用MTT比色法从细胞增殖的角度,结合HPLC法,探讨不同粉碎粒度对中药固体制剂体外溶出度的影响。方法 以复方鳖甲软肝片为模型药,对其原粉入药的药材进行不同程度的粉碎,考察在pH 7.4 PBS溶出介质中,不同粒度复方鳖甲软肝片溶出液对LX-2肝星状细胞的抑制作用,提出基于细胞抑制率所得复方鳖甲软肝片的累积溶出度,并与HPLC法测定芍药苷指标成分所得的溶出度运用f₂相似因子法进行相关性评价。结果 芍药苷溶出度随粉碎粒度改变而发生变化,其中200、300目体外累积溶出率较高,且f₂相似因子大于50,表明粒度为200、300目时,2种方法所测的溶出度具有较好的相关性。结论 基于生物效价检测方法可用于复方鳖甲软肝片的粒度筛选,同时,考虑到实际生产过程中成本因素,确定200目为复方鳖甲软肝片的最佳生产工艺。     

小菜蛾抗菌肽对HepG2细胞增殖抑制作用的初步探讨

目的探讨小菜蛾抗菌肽对人肝癌细胞株Hep G2增殖的抑制活性,合理制定小菜蛾的用量范围。方法建立小菜蛾抗菌肽系列样品溶液的HPLC指纹图谱,MTT比色法观察样品溶液对Hep G2细胞增殖的影响,绘制小菜蛾抗菌肽系列样品浓度C(mg·ml-1)与抑制率(%)之间的"量-效"曲线。结果 HPLC指纹图谱结果显示,不同浓度梯度的小菜蛾抗菌肽样品溶液的相似度良好;确定小菜蛾抗菌肽的最小有效用量30μg·ml-1,最大有效用量400μg·ml-1。结论小菜蛾抗菌肽对Hep G2细胞增殖抑制作用的合理用量范围为35.93μg~479.04μg。