基于UPLC-MS/MS对肺系调治方化学成分的研究

目的研究肺系调治方的化学成分并寻找活性成分目标物。方法通过超高效液相色谱飞行时间高分辨质谱联用法(UPLC-MS/MS)对肺系调治方水煎液中化学成分进行检测,并通过数据库中药活性成分目标物搜索中药活性成分。结果肺系调治方水煎液在正负离子模式下共检测到响应值大于300000的甘草酸、5-O-甲基维斯阿米醇苷、升麻素苷、四氢非洲防己碱、异紫堇定碱和升麻素等6种成分。结论首次对肺系调治方水煎液的化学成分进行检测,初步揭示了肺系调治方的化学成分,为进一步研究肺系调治方的物质基础和作用机制奠定了基础。     

玉屏风散加味方对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道部分细菌定植量的影响

目的:应用玉屏风散加味方干预慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠,观察其对COPD大鼠气道链球菌、奈瑟菌、葡萄球菌、黄杆菌属、柠檬酸细菌属、弯曲菌属定植量的影响,探讨该方可能的作用机制。方法:选用SPF级雄性Wistar大鼠50只,随机分为正常组、模型组、玉屏风散加味方低、中、高剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组用脂多糖(LPS)加烟熏的方法建立COPD大鼠模型。玉屏风散加味方低、中、高剂量的浓度分别为4.644 g(/kg·d)、9.288 g(/kg·d)、27.864 g(/kg·d)。采用高通量测序检测分析每组大鼠肺泡灌洗液链球菌、奈瑟菌、葡萄球菌、黄杆菌属、柠檬酸细菌属、弯曲菌属6类细菌的相对含量,苏木素-伊红(HE)染色观察右肺组织病理学变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠气道链球菌、奈瑟菌、葡萄球菌、黄杆菌属、柠檬酸细菌属、弯曲菌属相对含量均明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。与模型组比较,玉屏风散加味方低剂量组大鼠气道链球菌、奈瑟菌、弯曲菌属、黄杆菌属、葡萄球菌相对含量明显降低(P0.05);玉屏风散加味方中剂量组大鼠气道柠檬酸细菌属、黄杆菌属、葡萄球菌相对含量明显降低(P0.05);而玉屏风散加味方高剂量组大鼠气道6类细菌相对含量的差异无统计学意义(P0.05)。结论:玉屏风散加味方低、中剂量能降低COPD大鼠气道部分细菌的定植,但高剂量时则无明显降低作用。     

基于治未病思想探讨益气活血方干预慢性阻塞性肺疾病大鼠病程作用的实验研究

目的:探究名老中医防治慢性阻塞性肺疾病(COPD)经验方"益气活血方"作用机理,并探索"治未病"思想的运用。方法:复制COPD动物模型,在第0、4、12周不同时间段给予益气活血方药进行干预,采用ELISA法检测COPD大鼠肺组织SIg A、SC、TGF-β1和VEGF的表达水平,分析比较差异。结果:3个时间段模型组SIg A、SC、TGF-β1及VEGF表达均有明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。益气活血方药物干预后,第4周段中、低剂量组SIg A、SC及VEGF,低剂量组TGF-β1表达降低,差异有统计学意义(P0.05);第0周段除高剂量组VEGF表达也降低外,其余结果与第4周段一致;第12周段则是高、中、低剂量组SIg A、SC、TGF-β1及VEGF表达水平降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:益气活血方对COPD病程各阶段异常SIg A、SC、TGF-β1、VEGF均有不同程度的调节干预作用;"治未病"思想可作为COPD防治工作的重要策略。     

玉屏风散加味方干预慢性阻塞性肺疾病气道重塑的探讨

目的:探究玉屏风散加味方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道重塑病理形态的影响及其对相关细胞因子基质金属蛋白酶-9(MMP-9),金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响。方法:SD大鼠48只,除正常组8只外,其余各组大鼠采用烟熏加脂多糖滴入叠加法复制COPD动物模型,造模成功的大鼠随机分为模型组,玉屏风散加味方高、中、低剂量组(30,10,5 g·kg-1),阳性药物组(罗红霉素胶囊),ig给药30 d后,取大鼠肺组织做病理切片,苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理学变化,并用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠肺泡灌洗液(BALF)中的MMP-9,TIMP-1,TGF-β1的含量。结果:与正常组比较,模型组大鼠肺组织病理形态出现显著改变,支气管壁黏膜充血,水肿以肺泡巨噬细胞(AM),中性粒细胞(NEU),淋巴细胞(LYM),嗜酸性粒细胞(EOS)炎性细胞浸润较为明显,模型组MMP-9,TIMP-1,TGF-β1表达水平明显升高(P0.05);与模型组比较,玉屏风散加味方组大鼠肺组织纤毛倒伏、粘连、缺失;上皮细胞坏死、脱落;支气管壁黏膜充血、水肿以及AM,NEU炎性细胞浸润程度均有所改善,其中高剂量组较为明显(P0.05),玉屏风散加味方高、中剂量组下调细胞因子MMP-9,TIMP-1,TGF-β1表达水平明显(P0.05)。结论:玉屏风散加味方可影响COPD气道重塑的病理形态,下调MMP-9,TIMP-1和TGF-β1的过度表达,可能为该方药干预COPD气道重塑作用机制之一,且以高剂量效果最为明显。     

玉屏风散加味方中“涤痰”“逐瘀”作用药对对COPD大鼠肺组织TGF-β_1/Smad通路的影响

目的:探讨玉屏风散加味方中"涤痰"和"逐瘀"作用药对对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠TGF-β_1/Smad信号转导通路的影响。方法:将雄性SPF级Wistar大鼠90只随机分为正常组、模型组、罗红霉素组及"涤痰"作用药对高、中、低剂量组和"逐瘀"作用药对高、中、低剂量组。采用酶联免疫吸附试验(ELI SA)检测大鼠转化生长因子β_1(TGF-β_1),采用蛋白质印迹法(Western blot)检测大鼠肺组织Smad2/3、Smad7表达水平。结果:"涤痰"作用药对和"逐瘀"作用药对低、中剂量组及罗红霉素组TGF-β_1表达水平较模型组降低;"涤痰"作用药对低剂量组Smad2/3水平低于模型组;"涤痰"作用药对高剂量组和"逐瘀"作用药对各剂量组Smad7水平高于模型组。结论:玉屏风散加味方中"涤痰"和"逐瘀"作用药对对COPD大鼠TGF-β_1/Smad信号转导通路有调节作用。