苦豆子总碱及其两种单体生物碱对PC12细胞活性的抑制作用

目的：研究比较从苦豆子中提取分离的苦豆子总碱、苦参碱、槐定碱分别对肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（PC12细胞活性的影响。方法：采用噻唑蓝（MTT）比色法检测2、1、0.5、0.25、0.125、0.062 5 g·L-1苦豆子总碱、苦参碱、槐定碱分别对PC12细胞增殖的影响;酶标法检测细胞乳酸脱氢酶（LDH）渗漏率;流式细胞术检测细胞凋亡率、细胞周期、细胞内Ca2+水平;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白（Bax）mRNA转录水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞凋亡相关蛋白胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、胱天蛋白酶-8(Caspase-8)及Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果：与空白组比较,苦豆子总碱、苦参碱、槐定碱均能抑制PC12细胞增殖,使细胞LDH渗漏率显著增加,细胞内Ca2+荧光强度显著增强,诱导细胞的凋亡,并呈现一定的浓度依赖性（P<0.05,P<0.01）,其中苦豆子总碱对PC12细胞的增殖抑制作用和诱导细胞凋亡作用最强（P<0.01）;经苦豆子总碱、苦参碱、槐...     

大鼠经口给予骆驼蓬子提取物生殖毒性试验

目的 大鼠经口给予骆驼蓬子提取物,观察其毒性反应,判断其重复给药的毒性靶器官或靶组织,观察动物生育力与早期胚胎发育情况。为临床试验的起始剂量和重复用药安全剂量范围、监测指标提供参考。方法 随机将大鼠分为对照组、骆驼蓬子提取物低（0.027g/kg）、中（0.054g/kg）、高（0.108g/kg）剂量组,分别经口给予相应浓度的骆驼蓬子提取物,1.0ml/100g·bw,1次/d。交配前雌性大鼠先给药3周,交配后继续给药。动物观察到阴栓后第15d安乐死,进行解剖观察,检查胎仔的存活和畸形情况,对黄体数、着床数、活胎数、死胎数进行计数,检测血液学指标,计算脏器重量及系数,获取生殖器官进行组织病理学检查。试验期间每日对动物进行一般观察,定期测定动物体重和摄食量。结果 孕鼠妊娠期第4d、10d高剂量组体重显著降低（P<0.01、P<0.05）,妊娠期7d高剂量组摄食量显著降低（P<0.05）。解剖观察,各给药组孕鼠的腹主静脉、肾静脉均产生病理学改变,且有一定数量的孕鼠有胃肠胀气情况。与溶媒对照组比较,骆驼篷子提取物各给药组平均黄体数、平均着床数无显著变化,平均活胎数有所降低...     

免疫组织化学法在中药肝损伤检测中的应用概况

近年来中药的安全性越来越引起人们的重视,而药物是否会引起肝损伤是药物安全性研究的重点,对中药的开发及使用具有重要意义。免疫组织化学法可对抗原进行定位、定性及定量研究,在药物肝毒性的研究中起到不可忽视的作用。通过查阅历年来有关中药引起肝毒性的报道及其发生机制,总结归纳了免疫组织化学法在中药肝毒性研究中的应用,为免疫组织化学法在中药安全性评价中的应用提供参考。     

新疆阿魏乙酸乙酯提取物对人结肠腺癌Caco-2细胞迁移、侵袭的影响及相关机制

目的:研究新疆阿魏乙酸乙酯提取物对人结肠腺癌Caco-2细胞迁移、侵袭的影响,并探讨其相关机制。方法:以Caco-2细胞为研究对象,用6.25,12.5 mg·L-1新疆阿魏乙酸乙酯提取物和顺铂分别作用于处于对数生长期的人结肠腺癌Caco-2细胞,并设空白组,用划痕愈合法观察0~48 h各组Caco-2细胞迁移情况,用transwell小室法计数72 h各组Caco-2细胞穿过基质膜个数,并计算出每个时间段Caco-2细胞迁移率和侵袭抑制率。采用荧光实时定量PCR法和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组Caco-2细胞中磷酸酶(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN),丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine,Akt),哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalina target of rapamgcin,m TOR)基因和蛋白的表达水平。结果:与空白组比较,新疆阿魏乙酸乙酯提取物和顺铂组在24,48 h细胞愈合程度变慢(P0.05);72 h时穿过基质膜的细胞个数显著减少(P0.01),各用药组PTEN基因表达水平明显升高,Akt,m TOR基因表达水平明显较低(P0.05)。结论:新疆阿魏乙酸乙酯提取物可以显著抑制人结肠腺癌Caco-2细胞的迁移和侵袭,可能与提高PTEN基因表达水平有关。     

尼鲁帕感冒颗粒浸膏经口给予大鼠毒性试验

<正>尼鲁帕感冒颗粒浸膏由一枝蒿、干姜、金莲花、神香草、破布木果、大枣、甘草组成，具有祛寒止咳，化痰平喘的功能^[1]。多用于寒性感冒引起的咳嗽、发热、咽喉肿痛、鼻塞流涕等。本方中，一枝蒿具有调节免疫活性、抗氧化活性、抗菌抗炎和保肝的作用^[2]，且具有一定的安全性^[3]。     

蒺藜生药粉及其水提取物的肝毒性作用机制研究

目的：探讨蒺藜生药粉及其水提取物的肝毒性作用机制。方法：蒺藜生药粉、蒺藜水提取物经口给予SD大鼠1个月。选取健康大鼠140只，雌雄各半，随机分为正常对照组，蒺藜粉低、中、高剂量组，蒺藜水提物低、中、高剂量组。检测大鼠血清中谷草转氨酶（GOT）、谷丙转氨酶（GPT）、碱性磷酸酶（ALP）、总胆红素（TBIL）含量，酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测肝组织中谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）。实时PCR检测大鼠肝组织法尼醇X受体（FXR）、细胞色素7A1（CYP7A1）、过氧化物酶增殖物激活受体(PPAR α）表达，组织病理学观察大鼠肝脏病理学变化。结果：解剖观察肝重量、肝系数均无明显变化。与正常对照组比较，蒺藜粉高剂量组GOT显著升高（P<0.01），蒺藜水提物高剂量组GOT、GPT显著升高（P<0.05或P<0.01）；蒺藜水提取物高剂量组GSH、MDA表达显著升高（P<0.05或P<0.01），中剂量组MDA表达显著升高（P<0.01），低剂量组SOD显著降低（P<0.05）；蒺藜生药粉中、高剂量组CYP7A1表达显著升高（P<0.05或P<0.01）；蒺藜水提物中剂量组CYP7A1表达显著升高（P<0.01），高剂量组PPAR α显著降低（P<0.01）；组织病理学检查蒺藜粉中、高剂量组及蒺藜水提物各剂量组均可见肝细胞水肿、肝细胞脂肪变性，灶状炎细胞浸润，且蒺藜水提取物程度更深。结论：蒺藜水提物对肝脏的影响较为显著，且蒺藜肝毒性机制可能是抑制PPAR α的表达，使CYP7A1、MDA的表达过度所引起的。