中药鸡内金的现代研究进展

鸡内金来源于雉科动物家鸡Gallus gallus domesticus Brisson的干燥砂囊内壁,主要含有蛋白质、氨基酸、多糖等成分以及微量元素。作为药食同源中药,鸡内金不仅是一味消食化积的良药,在治疗口腔溃疡、石淋、腹泻、妇科疾病等方面也取得很好的疗效,具有广阔的药食开发前景。本文对鸡内金的来源、炮制加工、化学成分、质量评价、药理作用、临床应用以及综合利用等方面的研究进展进行了归纳总结,为其后续的深入研究及开发利用提供参考。     

基于PI3K/Akt信号通路探讨金骨莲提取物抑制脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症反应的作用及机制

目的 探讨金骨莲提取物（JGL）对炎症的抑制作用及其机制。方法 实验分为空白组（10%胎牛血清），脂多糖（LPS）模型组（0.5 mg·L^-1），JGL给药组（10，20，40，60，80，120，160，200，250，300 mg·L^-1），JGL给药组同时给予LPS刺激（0.5 mg·L^-1），培养24 h进行后续检测。采用细胞增殖与检测试剂盒（CCK-8）试剂检测JGL对RAW264.7细胞增殖活性的影响；采用Griess法检测一氧化氮（NO）的释放；采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测细胞因子白细胞介素-1β（IL-1β），IL-6，IL-10和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）释放；采用实时荧光定量聚合酶链式反应法（Real-time PCR）检测炎症相关因子诱导型一氧化氮合酶（iNOS），前列腺素内过氧化物合酶2（PTGS2）/环氧合酶-2（COX-2）的表达及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）途径关键蛋白的活化。结果 与空白组比较，LPS（0.5 mg·L^-1）刺激24 h后能显著促进RAW264.7细胞增殖（P<0.01），与模型组比较，JGL对细胞增殖无显著显著影响；与空白组比较，LPS（0.5 mg·L^-1）能显著增加NO，IL-1β，IL-6，IL-10和TNF-α的释放（P<0.01），与模型组比较，JGL（20~300 mg·L^-1）给药24 h后能剂量依赖性显著抑制NO的释放（P<0.01）；与模型组比较，JGL各剂量组IL-1β，IL-6，IL-10均明显降低（P<0.05，P<0.01），但对TNF-α的释放未见明显的抑制作用；与空白组比较，LPS（0.5 mg·L^-1）能显著诱导iNOS，PTGS2/COX-2基因表达（P<0.05，P<0.01），与模型组比较，JGL各剂量组能下调iNOS，PTGS2/COX-2 mRNA的表达（P<0.05，P<0.01）；与空白组比较，LPS（0.5 mg·L^-1）组PI3K/Akt通路显著活化（P<0.01），JGL（10，20，40，80 mg·L^-1）显著降低PI3K p110和p-PI3K p85蛋白及Akt磷酸化水平（P<0.01），抑制PI3K/Akt通路活化。结论 金骨莲提取物能明显抑制LPS诱导的RAW264.7细胞炎症反应，减少炎症因子的释放，其抗炎作用与抑制PI3K/Akt途径有关。     

高分辨非靶代谢组学方法研究臻通集胶囊对高脂血症模型大鼠的影响

目的：通过高分辨非靶代谢组学方法探讨臻通集胶囊对高脂血症模型大鼠的作用特点和机制。方法：无特定病原体级SD大鼠40只,随机取6只作为对照组,给予正常饲料,其余所有大鼠给予高脂饲料喂养,连续4周造模成功后,分为模型组和给药组。高、中、低剂量给药组大鼠分别灌胃给予臻通集胶囊0.432、0.216、0.108 g·kg^–1,每日1次,连续给药8周。末次给药后将动物麻醉,腹主动脉采血,离心分离血清,全自动生化仪检测血清中血脂水平。取部分肝组织用于高分辨非靶代谢组学的研究。结果：臻通集胶囊给药后,高、中剂量组大鼠的三酰甘油、胆固醇、低密度脂蛋白,高剂量大鼠的高密度脂蛋白较模型组明显降低,且差异具有统计学意义。与对照组比较,模型组大鼠共检测出138个差异代谢物;与模型组比较,给药组大鼠共检测出123个差异代谢物,正离子模式的72个差异代谢物有24个在给药后得到了纠正,负离子模式的51个差异代谢物有9个在给药后得到了纠正。代谢过程涉及多个信号通路,主要包括哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、环磷酸鸟苷酸依赖性蛋白激酶(cGMP-PKG)、叉头框蛋白O (FoxO)、蛋白质消化和...     

基于网络药理学和实验验证探讨小金丹治疗乳腺癌作用机制

目的 采用网络药理学方法结合实验验证探究小金丹治疗乳腺癌的作用及分子机制。方法 通过TCMSP、TCM-ID、ETCM及SwissTargetPrediction数据库筛选小金丹的化学成分及作用靶点,通过GeneCards、OMIM、KEGG数据库收集乳腺癌相关靶点,将药物与疾病共同靶点导入STRING数据库分析蛋白相互作用（PPI）,通过Cytoscape3.8.0根据节点拓扑参数值筛选PPI网络的关键靶点,采用DAVID数据库进行KEGG通路和GO富集分析,构建药物-化学成分-关键靶点-信号通路网络。采用人乳腺癌细胞株MDA-MB-231和SK-BR-3研究小金丹提取物对细胞凋亡、迁移和侵袭能力的影响,并对富集得到的关键通路进行验证。结果 筛选得到小金丹中槲皮素、杨梅素、乔松素、β-谷甾醇等181个化学成分,小金丹治疗乳腺癌作用的潜在靶点615个。通过PPI网络节点拓扑参数值筛选得到170个关键靶点,涉及SRC、ERK1/2、AKT1、EGFR等核心靶点。KEGG通路富集分析显示,癌症中的通路、MAPK信号通路、内分泌抵抗信号通路、PI3K-AKT信号通路、EGFR酪氨酸激酶抑制剂...     

基于PI3K/Akt信号通路探讨小金丹对巨噬细胞极化的调控作用及机制

目的 探讨小金丹提取物（XJD）对巨噬细胞极化的调控作用及作用机制。方法 以脂多糖（LPS）、白细胞介素-4（IL-4）刺激RAW264.7细胞诱导M1型和M2型极化。采用细胞增殖活性检测（CCK-8）法检测10~80 mg·L^-1对RAW264.7细胞增殖活性的影响;采用Griess法检测一氧化氮（NO）的释放;采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测细胞因子白细胞介素-6（IL-6）释放;采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测M1型和M2型巨噬细胞标志物的mRNA表达;采用流式细胞分析法检测CD206表达;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路关键蛋白的活化。结果 10~80 mg·L^-1 XJD对0.5 mg·L^-1 LPS和20 μg·L^-1 IL-4诱导的RAW264.7细胞增殖未见明显影响。与空白组比较,LPS诱导组M1型巨噬细胞标志物表达升高,主要包括显著增加NO、IL-6释放（P<0.01）,明显上调M1型基因白细胞介素-1β（IL-1β）、一氧化氮合酶（iNOS）、前列腺素氧化环化酶-2（COX-2）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）mRNA表达（P<0.01）。同LPS诱导组比较,20~80 mg·L^-1 XJD能浓度依赖性显著抑制NO、IL-6的释放（P<0.01）;10~80 mg·L^-1 XJD能浓度依赖性下调M1型基因IL-1β、iNOS、COX-2和TNF-α mRNA表达（P<0.01）。与空白组比较,IL-4诱导组M2型巨噬细胞标志物表达升高,主要包括CD206⁺巨噬细胞比例显著升高（P<0.01）,显著上调M2型基因精氨酸-1（Arg-1）、白细胞介素-10（IL-10）、白细胞介素-13（IL-13）和转化生长因子-β₁（TGF-β₁）mRNA表达（P<0.01）。同IL-4诱导组比较,10~80 mg·L^-1 XJD能浓度依赖性显著降低CD206⁺ M2型巨噬细胞比例（P<0.01）;显著下调Arg-1、IL-10、IL-13和TGF-β₁ mRNA表达（P<0.01）。Western blot结果显示,与空白组比较,LPS和IL-4诱导组磷脂酰肌醇3-激酶p110（PI3K-p110）和磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）表达均显著上调（P<0.01）;同LPS或IL-4诱导组比较,XJD能明显降低PI3K p110蛋白表达和p-Akt水平（P<0.05,P<0.01）。结论 小金丹提取物能抑制LPS和IL-4诱导RAW264.7细胞的M1型极化和M2型极化,机制与降低PI3K/Akt通路的活化水平有关。