牛膝-杜仲药对治疗糖皮质激素性骨质疏松症的网络药理学分析

目的 运用网络药理学方法及体外实验探讨牛膝-杜仲药对治疗糖皮质激素性骨质疏松症（GIOP）的作用机制。方法 利用TCMSP数据库筛选牛膝-杜仲药对的活性成分并预测其作用靶点;利用DrugBank、GeneCards、OMIM、PharmGkb数据库筛选GIOP疾病相关靶点,并与牛膝-杜仲活性成分作用靶点映射取交集,交集基因即为牛膝-杜仲药对治疗GIOP的潜在作用靶点。采用STRING数据库构建潜在作用靶点的蛋白互作（PPI）网络;利用Cytoscape 3.8.2软件构建“活性成分-潜在作用靶点”网络;通过R 4.1.1软件对潜在作用靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析。以牛膝-杜仲（10μg·mL-1）对地塞米松（10-5mol·L-1）诱导损伤的MLO-Y4骨细胞进行干预,采用CCK-8法检测细胞增殖能力,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 从牛膝、杜仲中分别筛选出20、28个活性成分,预测得到976个作用靶点（牛膝、杜仲共同作用靶点205个）,筛选出2 006个GIOP疾病相关靶点,最终确定133个牛膝-杜仲药对治疗GIOP的潜在作用靶点。筛选出槲皮素、山柰酚、汉黄芩素、黄芩...     

牛膝-杜仲成分组合干预糖皮质激素性骨质疏松模型小鼠的研究

目的 探讨牛膝成分β-蜕皮甾酮（βEcdysterone，βEcd）联合杜仲成分松脂醇二葡萄糖苷（pinoresinol diglucoside，PDG）治疗糖皮质激素性骨质疏松症的可行性。方法 2月龄SPF级雄性C57BL/6小鼠分为正常对照组、模型组、阿仑膦酸钠（ALN）组、βEcd组、PDG组和βEcd+PDG组。对照组皮下注射100μL生理盐水；模型组与给药组皮下注射地塞米松（2 mg/kg）；给药组中，分别皮下注射ALN（0.5 mg/kg）、βEcd（0.5 mg/kg）、PDG（0.5 mg/kg）以及βEcd+PDG（剂量各为0.5 mg/kg）。每周测量体重，计算体质量指数；4周实验结束后以Micro CT、生物力学、ELISA、Western blot方法评估模型及治疗效果。结果 与对照组比较，模型组体质量指数、皮质骨骨矿物质密度（BMD）、股骨弹性模量、弯曲刚度、弯曲强度及最大负重载荷、骨形成标志物P1NP浓度降低（P＜0.05），骨吸收标志物β-CTx浓度升高（P＜0.05），骨组织细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax表达增高（P＜0.05）；与模型组比较，βEcd-PDG组合提高模型小鼠体质量指数、BMD、股骨弯曲强度和最大负重载荷、P1NP浓度（P＜0.05），降低β-CTx浓度（P＜0.05），上调抗凋亡因子Bcl-2表达、下调Caspase-3、Bax表达（P＜0.05）。结论 βEcd-PDG组合促进GIOP模型小鼠骨形成，增加骨密度、增强骨质量，并可改善骨组织细胞的凋亡水平。