中医药治疗手足综合征随机对照试验的Meta分析

目的：评价中医药治疗手足综合征的疗效。方法：计算机检索2007年1月1日至2019年1月1日国内外发表的关于中医药治疗HFS的临床随机对照研究文献,根据Cochrane Handbook 5.0版有关随机对照试验的质量评价标准,对纳入的研究进行方法学质量评价,并采用Stata 12.0软件进行Meta分析。结果：共纳入12篇文献,总的比较研究间存在较大异质（I2=83.1%,P=0.00）,敏感性分析结果显示1篇文献的研究结果与其他文献存在较大异质性;将所剩余11篇文献按引起HFS的不同因素,分为卡培他滨、靶向治疗、化疗或靶向治疗3个亚组进行Meta分析,结果显示虽然合并Meta分析显示各研究间仍存在较大异质性（I2=73.4%,P=0.000）;但是卡培他滨亚组（I2=31.6%,P=0.232）、靶向治疗亚组（I2=40.5%,P=0.151）、化疗或靶向治疗亚组（I2=47.3%,P=0.150）各亚组间不存在大的异质性,且各亚组实验组与对照组间差异有统计学意义（P<0.01）。结论：中医药治疗HFS有效,且总有效率要优于单纯西药治疗;对于不同发生机制的HFS在临床治疗或研究中要区分治疗或研究。     

乳香没药精油自微乳的制备与抗炎镇痛作用评价

目的 制备乳香没药精油（FMO）自微乳化给药系统（FMO-SMEDDSs）,并评价其抗炎镇痛效果。方法 水蒸气蒸馏法提取FMO,考察FMO与不同种类油相、乳化剂和助乳化剂的配伍相容性并确定了FMO-SMEDDSs的处方组成,最终根据伪三元相图法得到其处方配比;以热力学稳定性、动态光散射、透射电镜等实验手段评价FMO-SMEDDSs的理化性质。将 SD 大鼠随机分为 5 组 ：对照组、模型组、布洛芬（阳性药 ,20 mg·kg^-1）组、FMO（生药剂量 90 mg·kg^-1）组、FMOSMEDDSs （90 mg·kg^-1）组,每天ig给药2次,连续给药7 d,对照组与模型组ig生理盐水;除对照组外,其余4组大鼠均在右后足跖sc 40.0%甲醛溶液0.1 mL,6 h后用千分尺测量大鼠右后足厚度,并计算肿胀度和肿胀抑制率;ELISA试剂盒法分别检测致炎足足底组织中前列腺素E₂（PGE₂）水平,血清白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。通过小鼠扭体法评价布洛芬（40 mg·kg^-1）组、FMO（180 mg·kg^-1）组、FMO-SMEDDSs（180 mg·kg^-1）的镇痛效果。结果 根据配伍相容性及伪三元相图结果,分别选择肉豆蔻酸异丙酯（IPM）、聚山梨酯 80 和异丙醇作为 FMO-SMEDDSs 的油相、乳化剂和助乳化剂,配比为 4∶4∶2;FMO-SMEDDSs形成的微乳平均粒径为（57.8±1.1）nm,PDI为（0.216±0.014）,Zeta电位为（-11.5±0.05）mV,在透射电镜下可观察到微乳呈球状,FMO-SMEDDSs热力学稳定性良好。与模型组比较,布洛芬、FMO、FMOSMEDDSs组大鼠的致炎足肿胀度及肿胀率均显著降低（P＜0.05）,PGE₂、TNF-α和IL-6水平显著降低（P＜0.05）;与FMO组比较,FMO-SMEDDSs组大鼠致炎足肿胀度及肿胀率进一步显著降低（P＜0.05）,PGE₂、TNF-α和IL-6水平进一步显著降低（P＜0.05）。与模型组比较,ig布洛芬、FMO以及FMO-SMEDDSs后均能显著延长小鼠扭体反应潜伏期,显著减少15 min内的扭体次数（P＜0.05）;相对于FMO组,FMO-SMEDDSs抑制小鼠扭体反应作用更明显。结论 成功制备FMO-SMEDDSs,其具有良好的抗炎镇痛的作用。     

高分辨率熔解曲线分析技术检测MASP-2基因点突变方法的建立及评价

建立高分辨率熔解曲线（HRM）分析技术检测人甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶-2（ MASP-2）基因g.21370（G>T）位点单核苷酸多态性（SNP）的方法并进行评价。方法通过测序获得 MASP-2基因g.21370（G>T）位点3 种不同基因型对照品，并用其建立HRM 技术检测 MASP-2 基因点突变方法。利用60 份待测DNA 样品对建立的HRM 方法的准确性、重复性及稳定性进行评价。结果建立的 MASP-2 基因HRM 分析方法扩增反应正常，G/G、G/T、T/T 3种基因型区分明显，扩增产物Melt 曲线良好，无非特异性产物出现；与基因序列测定结果对比显示准确性良好；对野生型和突变型标本3 次重复检测结果显示，Tm 值变异系数为0.017 和0.023；χ2 检验结果表明，本研究选取的随机体检人群 MASP-2 基因g.21370（G>T）位点基因型频率分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡。结论建立的 MASP-2 基因g.21370（G>T）位点HRM检测方法准确性高、重复性及稳定性良好，为下一步临床分析 MASP-2 基因SNP 提供一定的技术支持。     

肺炎衣原体Taqman探针实时荧光定量PCR检测法

目的针对Cpn0308基因建立检测肺炎衣原体的Taqman探针实时荧光定量PCR(FQ-PCR)方法。方法根据肺炎衣原体包涵体膜蛋白Cpn0308基因序列设计引物和Taqman探针,建立Taqman FQ-PCR检测体系,对反应体系进行优化,进行灵敏度、特异性、重复性评价;并与商品化肺炎衣原体核酸检测试剂盒检测临床标本进行对比分析。结果肺炎衣原体Taqman FQ-PCR方法的引物浓度300 nmol/L,探针浓度200 nmol/L,Mg~(2+)4.0 mmol/L为最优反应条件;灵敏度为8.36×102copies/μL;该法对常见几种呼吸道病原菌及沙眼衣原体无交叉反应;重复性试验中4个浓度变异系数均小于3%。自建方法与商品化试剂盒对呼吸道感染组、心血管疾病组及正常对照组标本检出率分别为10%vs 10%(χ~2=0.167,P0.05),44.44%vs 40.74%(χ~2=0,P0.05),6.67%vs 3.33%(χ~2=0,P0.05),各组阳性率间差异无统计学意义;2种方法的总阳性率(16.54%vs 14.96%)比较差异无统计学意义(χ~2=0.071,P0.05)。结论本研究建立的Taqman探针实时荧光定量PCR检测肺炎衣原体的方法灵敏度好,特异性高,重复性好,可应用于临床肺炎衣原体核酸检测。