PCR-SSCP法检测结核分枝杆菌耐药性

目的：探讨耐多药结核分枝杆菌耐药基因突变与耐药性的关系以及聚合酶链反应-单链构象多态性分析(poly merase chain reaction-single strand cinfomlation polymorphism，PCR-SSCP)方法的临床应用价值。方法：用PCR-SSCP方法检测58株结核分枝杆菌临床分离株katG，rpoB，rpsL基因突变并与常规药敏试验检测结果进行对比。结果：经常规药敏试验检测，58株结核分枝杆菌临床分离株中共有41株耐药，其中，耐异烟肼(INH)为35株，高耐药株27株；耐利福平(RFP)为31株，高耐药株24株；耐链霉素(SM)有31株，高耐药株26株。同时耐3种药物的有21株(51．2％)，耐2种药物的14株(34．1％)，单耐药株6株(14．6％)．PCR-SSCP方法对58株临床分离株katG，rpoB，rpsL基因突变的检测率为40％(23／58)，45％(26／58)，38％(22／58)，其中检出3个基因同时突变的有13株(32％)，2种基因突变的12株(29％)，1种基因突变的有10株(23．8％)．常规药敏试验与PCR-SSCP法检出结核分枝杆菌同时耐3种药物的符合率为61．9％(13／21)，检出耐2种药物的符合率为85．70k，(12／14)，检出耐1种药物的符合率为50％(3／6)．高耐药株中突变率为80．5％(62／77)，低耐药株中突变率为60％(12／20)．结论：PCR-SS-CP方法对耐2种以上药物的结核杆菌检出率较高，且耐药基因突变率随着耐药浓度增高而增高。将PCR-SSCP法与药敏试验联合应用可互相弥补，已成为临床指导用药的好方法。     

18例恶性苗勒混合瘤临床病理分析

目的：探讨女性生殖系统恶性苗勒混合瘤（MMMT）的临床与病理特征。方法：对18例女性生殖系统MMMT进行光镜观察及免疫组化染色，结合临床资料进行分析，对9例进行了术后随访。结果：各部位MMMT的形态特征相似，均含有上皮及间叶两种组织成分，相互间有穿插和移行变化，组织成分形态多样，免疫组化有助于判断。恶性度与异型性、核分裂数及出血坏死程度有关。预后与临床分期有关。化疗有效。结论：MMMT的诊断主要依据组织形态学，预后与临床分期有关。     

人精液中ACE,HYD,ACP和GGT检测的意义

目的探讨人精液中项体酶、透明质酸酶、酸性磷酸酶、γ-谷氨酰基移换酶与男性不育的关系.方法参照WHO标准方法,进行精液常规分析,按精子密度、活动率不同分为(正常、＜20、20～40、＞40)4个组.采用改良的Kennedy法检测精子顶体酶(ACE)活性.用Singer法测透明质酸酶(HYD)活性.采用磷酸苯二钠法检测酸性磷酸酶(ACP).用以Glucana为底物动力学方法测定精液γ-谷氨酰基移换酶(GGT)活性.结果98例不育各组的ACE、HYD、ACP和GGT活性明显低于正常生育组(P＜0.01),并且随精子密度和活动率减少而降低,随精子畸形率增高而下降.结论精液酶类的检测是评价精子成熟、活动率及穿卵受精能力的重要指标之一,是精液常规参数不可替代的,对男性不育的诊断治疗具有重要价值.     

Beckman EL-ISE电解质分析仪准确性及故障的分析判断

0 引言为了克服离子选择电极（ISE）法的微量电位信号极易受环境温度变化及电子噪声的干扰问题,该仪器采用了参考电极,把参考电极与其测定电极装在同一测量室内,保持其相同的物理环境,使干扰源对所有电极的影响相同. 以内参液作为参考电极的测量对象,测得一个参考电极电位值,再测样品的电极电位值,二者相抵就消除了所叠加的干扰信号.     

子宫内膜不典型增生及其处理

1　子宫内膜不典型增生子宫内膜不典型增生 (atypicalhyperplasia ,AH)是一个组织病理学名称 ,属子宫内膜增生的一种类型 ,其主要的病理学特征为腺上皮细胞出现异型性。根据Kuman为首的美国学者通过对 170例未治疗的子宫内膜增生患者进行 1 2 5年随诊的结果为基础 ,1987年国际妇科病理协会 (IS GP)提出将子宫内膜增生分为 :①单纯性增生 ;②复合性增生 ;③不典型增生 3大类 ,该分类法目前已被国内外普遍采用。其中子宫内膜不典型增生根据增生腺体是否出现背靠背群集 ,分为简单性不典型增生和复杂性不典型增生 ;根据组织学病变程度不同又…     

PD-1/PD-L1抑制剂对比常规疗法治疗癌症的有效性和安全性的Meta分析

目的:系统性评价程序性死亡因子1/程序性死亡因子1配体(PD-1/PD-L1)抑制剂对比常规疗法治疗癌症的有效性和安全性。方法:计算机全面检索PubMed、MEDLINE、EMBASE数据库,收集PD-1/PD-L1抑制剂治疗癌症的文献研究,检索时间为2000年1月1日至2019年6月30日。两位研究人员独立收集和整理资料,评价纳入文献研究的偏倚风险,应用Review Manager 5.3软件对纳入研究进行数据整理。结果:最终纳入11项随机对照试验,共6 295例研究对象,其中PD-1/PD-L1抑制剂试验组3 220例,常规疗法药物对照组3 075例。Meta分析结果显示,PD-1/PD-L1抑制剂试验组的客观反应率（ORR）［RR=1.87,95%CI（1.33,2.64）,P＜0.001］、完全缓解率（CR）［RR=2.45,95%CI（1.27,4.73）,P＜0.001］和部分缓解率（PR）［RR=1.81,95%CI（1.28,2.54）,P＜0.001］优于常规疗法对照组,结果均有统计学差异;在疾病控制率（DCR）［RR=1.03,95%CI（0.89,1.20）,P=0.65］和疾病进展率（PD）［RR=1.16,95%CI（0.95,1.40）,P=0.14］方面,两组比较无统计学差异;而在疾病稳定率（SD）［RR=0.72,95%CI（0.63,0.82）,P＜0.001］方面显示常规疗法对照组优于PD-1/PD-L1抑制剂试验组。药物安全性方面,不良反应发生率（AEs）［RR=0.96,95%CI（0.88,1.04）,P=0.28］两组无统计学差异,但在3-5级不良反应发生率［RR=0.44,95%CI（0.28,0.68）,P＜0.001］方面,PD-1/PD-L1抑制剂试验组明显低于常规疗法对照组。结论:PD-1/PD-L1抑制剂与常规疗法药物相比,可明显提高癌症患者临床治疗的ORR、CR和PR,且出现3-5级不良反应发生率更低,从而证实PD-1/PD-L1抑制剂的有效性和安全性优于常规疗法。     

人羧肽酶A1活性中心基因的克隆及原核表达

目的：克隆人羧肽酶A1(carboxyrpeptidase A1，CPA1)活性中心基因，构建重组表达载体并对其进行诱导表达。方法：通过RT-PCR方法扩增出正常胰腺组织中CPA1活性中心基因，克隆入载体pGEM-Teasyr，测序分析．将该目的基因亚克隆于表达载体pGEX-4T-1，测序证实序列正确后转化大肠杆菌DH5α，经IPTG诱导表达重组蛋白。结果：获得了人CPA1活性中心基因，构建了重组表达质粒，表达的蛋白以SDS-PAGE分析，在Mr约46000处出现一条新生蛋白带，经凝胶薄层扫描检测，表达量约占菌体总蛋白的22．1％。结论：成功克隆人CPA1活性中心基因并得到了其原核表达产物，为获得分子量小而具有相似活性的蛋白奠定了基础。     

局部晚期宫颈癌新辅助化疗临床应用的进展

局部晚期官颈癌（locally advanced cervical cancer）是指具有预后不良因素的高危宫颈癌，其广义的范围包括宫颈癌Ib2～Ⅳ。期，狭义则指局部肿瘤≥4cm的早期宫颈癌。放射治疗是其传统治疗方法，但5年生存率只有40％左右。因此国内外许多学者试图通过手术技巧、放射设备和技术的不断改进来改变这种状况，但并未奏效，故人们又把注意力转移到化疗。     

股骨头部分置换术精准微创治疗中老年ARCO Ⅲ期股骨头缺血坏死的有限元分析

目的通过有限元分析,初步评估股骨头部分置换术后股骨与内植物模型的应力分布和位移。 方法选择一名成年健康志愿者,获取股骨全长CT扫描数据,利用Mimics 20.0软件、Geomagic软件及UG NX 12.0软件建立股骨头缺血坏死模型,骨隧道切除股骨头坏死区域后装配设计开发的股骨头假体,模拟单腿站立环境进行有限元仿真模拟,获取股骨与内植物模型的应力分布和位移数据。 结果股骨应力分布主要集中在股骨颈下方和股骨干皮质骨两侧,最大应力为48.25 Mpa,最大位移为10.98 mm。内植物模型的应力主要分布在金属内植物主体结构下方,最大应力为147.2 Mpa,最大位移为9.58 mm。 结论股骨头部分置换后,假体头与股骨头曲率一致,应力传导模式与正常侧髋关节一致,但在假体头与茎部连接处发生应力集中,应重点考虑选择更大强度的材料。     

快速检测耐异烟肼结核分支杆菌方法的研究

目的 应用多重聚合酶链反应-单链构象多态性分析（multiple—Polymerase Chain Reaction—Single Strand Conformation Polymorphism,multi—PCR—SSCP）方法,快速、特异地同时检出耐异烟肼（isoniazid,INH）结核分支杆菌aphC启动子、inhA、katG基因的突变情况,并与直接测序（derictsequencing,DS）结果相比较,参照药敏试验,探讨该方法的可行性。 方法 根据结核分支杆菌的aphC启动子序列、inhA序列、katG序列,分别设计出3对特异性寡聚核苷酸引物,采用multi—PCR-SSCP技术,同时检测对结核分支杆菌耐INH起作用的这三个基因的突变情况;同时进行耐药株的测序分析。 结果 对H37Rv标准株、临床分离INH敏感株（23株）及INH耐药株（35株）进行multi—PCR—SSCP分析,突变检出率82．9％（29／35）;耐药株测序分析突变检出率为85．7（30／35）。两种方法的符合率为97．1％E（29＋5／）／35]。 结论 耐药基因检测指导治疗是一种新探索,multi—PCR—SSCP方法敏感、特异,能同时快速有效地检测结核分支杆菌aphC启动子、inhA、katG三个INH耐药基因的突变,提高检验效率,有望成为临床指导用药的好方法。