稳定表达的人GDNF基因对PC12细胞的分化作用研究

目的　利用自行构建的 BHK- h GDNF基因工程细胞 ,研究 GDNF是否具有促进大鼠嗜铬细胞瘤细胞系 PC12细胞分化的作用。　方法　从人胎儿脑组织中提取总 RNA,用 RT- PCR的方法克隆人 GDNF基因 ;利用L ipofecam ine将构建的真核表达载体 p TARGET/ h GDNF(± )转染 BHK- 2 1细胞 ,在含有 G418的选择培养基中筛选出稳定表达人 GDNF的 BHK- h GDNF基因工程细胞。用免疫组织化学的方法检测 BHK- h GDNF基因工程细胞中人 GDNF的表达。并且用 BHK- h GDNF基因工程细胞培养的上清液培养 PC12细胞 ,观察 GDNF是否具有促进大鼠嗜铬细胞瘤细胞系 PC12细胞分化作用。　结果　构建的正向和反向真核表达载体 p TARGET/ h GDNF(± )的酶解消化和测序结果正确 ;用正向真核表达载体 p TARGET/ h GDNF( )转染 BHK- 2 1细胞后免疫组织化学的结果证明 BHK- h GDNF细胞能够表达人 GDNF;BHK- h GDNF基因工程细胞培养上清液可以促进 PC12细胞分化。　结论　构建的 BHK- h GDNF基因工程细胞中表达的人 GDNF可以促进 PC12细胞分化     

陈明岭运用五神汤加味治验举隅

正五神汤出自清·陈士铎《辨证录·卷十三》,主治多骨痈,由金银花、紫花地丁、车前子、茯苓、牛膝组成,有较强的清热解毒、活血消肿及分利湿热之功。陈明岭教授,博士研究生导师,现任成都中医药大学附属医院皮肤科主任,从事皮肤性病医、教、研工作20余年,临床经验丰富,治学严谨。笔者跟师学习,见其将五神汤运用于皮肤科多种疾病中,每获良效,现摘录4则验案介绍如下。