具有不同转移潜力的卵巢癌细胞系基因表达谱的比较研究

目的:比较具有不同转移潜力的上皮性卵巢癌细胞系基因表达谱,探讨卵巢癌侵袭转移过程中的关键基因和基因群,为最终揭示卵巢癌侵袭转移过程的分子机制奠定基础。方法:采用人工基底膜侵袭实验比较SKOV3·ip1细胞与其母系SKOV3细胞的侵袭转移能力;用17000点人类基因组cDNA芯片杂交检测两细胞系基因表达谱的差异;用RT-PCR方法验证基因芯片结果。结果:与其母系SKOV3相比,SKOV3·ip1细胞侵袭转移能力更强;基因芯片检测到1557个2倍差异表达基因,其中包括nm23-H2,c-erbB-2等重要的侵袭转移基因及一些差异显著的未知基因和EST片段;nm23-H2基因RT-PCR结果验证了基因芯片实验结果。结论:上皮性卵巢癌细胞系SKOV3.ip1具有更强的侵袭转移能力;卵巢癌的侵袭转移是一个涉及nm23,c-erbB-2等重要基因和其他未知新基因等多个基因共同参与的复杂过程;基因芯片是高通量基因筛选的有利手段。     

腹腔镜评估晚期卵巢癌患者能否行满意的肿瘤细胞减灭术:初步研究

目的:评价腹腔镜是否可以作为合适和可靠的方法来预测晚期卵巢癌患者能否通过标准的开腹手术实行满意的肿瘤细胞减灭术(RT≤1cm)。方法:2003年3～11月对95例疑似晚期卵巢癌或腹膜癌患者进行了评价。31例由于麻醉学分级为ASAⅢ～Ⅳ(51.6%)和直达剑突下的巨大肿瘤(48.4%)而被排除,64例患者完成了研究。所有的患者均接受了术前临床影像学检查,进而依次进行腹腔镜手术和常规腹部纵切口开腹手术。为了获得对能否进行满意肿瘤细胞减灭术的最精确评估,在每一步骤都对一些特殊的术前定义好的参数进行了分析。结果:腹腔镜在评估是否可以进行满意的…     

卵巢癌抗独特型单链抗体 6B11ScFv 与鼠 HSP70 融合蛋白的构建、表达及鉴定

 目的 构建卵巢癌抗独特型单链抗体 6B11ScFv 与小鼠热休克蛋白 70（mHSP70）融合蛋白 6B11ScFv/mHSP70,并初步鉴定其免疫活性。 方法 根据 Genebank 上已发表的 mHSP70 基因序列（NM_010478）合成引物行 PCR 扩增,以扩增所得 mHSP70 基因插入 pET30a（+）-6B11ScFv 质粒后转化入 E.coli DH5α,获得 pET30a（+）-6B11ScFv/mHSP70 重组质粒。将鉴定正确的 pET30a（+）-6B11ScFv/mHSP70 重组质粒转化入 E.coli BL21（DE3）,获得 E.coli BL21（DE3）[pET30a（+）-6B11ScFv/mHSP70]重组菌株。以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达并行 SDS-PAGE 分析,对表达产物进行复性和 Ni2+-NTA 柱亲和层析纯化后,采用蛋白质印迹法和 ELISA 方法进行鉴定和免疫活性检测。 结果 6B11ScFv/mHSP70 融合基因测序结果基本与理论序列相符。SDS-PAGE 分析显示,重组菌株表达产物相对分子质量与预期相符。复性、亲和层析纯化后的蛋白复性率达 20.9%,蛋白纯度达 95% 以上。蛋白质印迹分析证实 6B11ScFv/mHSP70 融合蛋白相对分子质量为 104 000,ELISA 检测表明其具有 6B11ScFv 和 mHSP70 的免疫 活性。 结论 构建表达的 6B11ScFv/mHSP70 融合蛋白具有良好的免疫活性,为进一步研究其体内外抗卵巢癌活性奠定了基础。     

普通死亡受体4(DR4)的基因多态性不能诱发卵巢癌

目的:死亡受体4(DR4)的基因多态性可能会破坏凋亡信号的传导途径,导致细胞生存与死亡稳态的失调,从而促进肿瘤的发展及恶化。方法:本研究对97例卵巢癌患者、正常对照人群以及已建立的卵巢癌细胞系的胚系DNA进行已知的DR4(即G442A、C626G和A1322G)基因多态性进行分析。结果:G442A(P=0.736)和C626G(P=0.699)改变在患者及匹配的对照人群间没有显著差异。本研究首次建立了A1322G易位的人群数据,并且发现其中19%为杂合子,3%为纯合子。但仍未发现患者和对照人群间存在显著差异(P=0.326)。结论:总之,DR4基因的改变不能诱发临床相关的卵巢…     

妇科恶性肿瘤盆腔清扫术后行可控性尿流改道术的远期疗效随访

目的:本项回顾性研究旨在分析患者行盆腔清扫术(PE)中接受可控性尿流改道术(UD)的远期疗效。患者和方法:1993年2月至2001年1月间,60例妇科恶性肿瘤患者接受了PE并需行可控性UD。对患者的意愿、术前计划进行的UD方式、实际施行的UD方式以及晚期(手术90d后)尿道并发症进行了综合分析。结果:全组82%(49/60)的患者术前均符合可控性UD的实施标准,而41例(87%)最终接受了手术。接受控制性UD的患者术后死亡率为4.9%(2/41),并且与尿道并发症无关。进行了中位时间为20个月的随访后,18例接受可控性UD的患者(46%)出现了与UD直接相关的晚期并发症…     

医教协同政策实施后北京市住院医师规范化培训效果的调查研究

目的 从住院医师和临床医学硕士专业学位研究生两类培训对象角度,以岗位胜任力为导向,调查医教协同政策实施后北京市住院医师规范化培训的效果.方法 对已完成2016—2019年住院医师规范化培训并参与结业考试的培训对象的基本情况、培训完成情况和培训能力提高情况等进行问卷调查.结果 2019年参与北京市住院医师规范化培训效果调...     

宫颈癌免疫治疗及预防研究进展

目前 ,宫颈癌的发病率和病死率在女性生殖道恶性肿瘤中均居第 2位 ,全世界每年有 40余万新发病例 ,其中半数将因此而死亡[1] 。在宫颈病变筛查技术和诊断方法已取得长足进展的今天 ,大量的癌前病变和ＨＰＶ感染患者得以诊断 ,但如何更合理的处理仍是亟待解决的问题 ,且对宫颈癌的预防具有至关重要的作用。如何改善宫颈癌及癌前病变的诊治和预防的现状 ,在有效预防和治疗的同时提高患者的生存质量 ,甚至保留年轻患者的生育功能 ,均是目前研究的热点。其中免疫治疗和预防研究是较为活跃的领域。1　以ＨＰＶ为基础的疫苗人乳头瘤病毒 (ｈｕｍａ…     

20q13.2拷贝数改变与晚期卵巢癌的关系——组织微阵列分析

据报道,通过比较基因组杂交结果发现一定数量的卵巢癌中存在20q过表达。本研究应用组织微阵列原位杂交(FISH)技术研究卵巢癌中20q13.2拷贝数增加与肿瘤表型的关系。TM A技术能够分析大量不同恶性度、不同组织、不同分期和分级的肿瘤。总的来说,上皮性卵巢癌中20q13.2的变化频率为25.50%(10.74%增益,14.76%扩增)。在不同分级的肿瘤之间20q13.2拷贝数改变无统计学显著性差异。随着分期的增加,肿瘤基因增益与扩增的频率显著增加。研究结果显示,20q13.2拷贝增加与肿瘤分期增高之间强相关。本研究得出结论,20q13.2的基因改变可能对卵巢癌分期…     

基于抓力-运动诱发电位的大鼠脑干锥体束功能损伤程度研究

目的 探讨利用抓力( grasp strength, GS)-运动诱发电位(motor evoked potential,MEP)方法对大鼠脑干锥体束损伤后产生的运动功能障碍进行定量研究。 方法 雄性 SD 大鼠 30 只,分为 1. 25m 致伤组、2. 25 m 致伤组和正常组,采用经典 Marmarou 模型制作锥体束部位的创伤性轴索损伤模型,致伤组均于损伤后 1、3、5、7、14、28、42 d 对大鼠进行肢体 GS 信号和 MEP 波幅检测,3 组大鼠均于麻醉后相应时间进行对照检测。 结果 致伤组随损伤程度的增加,MEP 波幅和最大 GS 下降比例明显增大;两个高度下 GS 与 MEP 测量值具有明显正相关性。 损伤程度较小时,前期 MEP 比较敏感,后期 MEP 不敏感;损伤程度较大时,前期与后期 MEP 变化均较为敏感。 结论 采用 GS-MEP 联合评估可以为锥体束损伤后产生的运动功能障碍程度的定量评价提供数据支持。     

基于组织病理学的大鼠脑干原发性功能损伤程度研究

目的:利用自制改进的 Marmarou 模型建立不同损伤高度的弥漫性轴索损伤(Diffuse axonal injury,DAI)大鼠模型,探讨通过苏木精-伊红(Hematoxylin eosin staining,HE)染色和β-淀粉样前体蛋白(β-Amyloid precursor protein,β-APP)免疫组化互相验证结合的方式对大鼠脑干原发性功能损伤程度进行定量研究.方法:健康成年雄性(Sprague-dawley,SD)大鼠 24 只,随机分为 0 m正常组、1.25 m致伤组和 2.25 m致伤组,采用改进的经典Marmarou模型制作大鼠脑干部位的DAI模型,正常组不进行打击.在致伤后进行过量麻醉取材制作HE染色切片和β-APP免疫组化染色切片,其中对HE染色切片计算脑干感兴趣区域内出血占比、脑水肿个数和锥体束出血占比;对 β-APP 免疫组化切片测定脑干感兴趣区域内的阳性细胞面积和累计光密度值(Integral optical density,IOD).将不同损伤程度脑组织切片的HE染色分析与β-APP免疫组化染色结合做相关性分析.结果:不同致伤高度组的HE染色切片在光镜下可见神经束疏散、紊乱,血管淤滞,出现不同程度的散点状或长条状出血,细胞核显示不清,突触结构模糊不清等经典DAI病理特征;β-APP免疫组化出现轻度轴索损伤变化.测定脑干感兴趣区域内β-APP的阳性细胞面积和IOD值与HE染色的出血面积占比和锥体束出血面积占比呈正相关.结论:采用HE染色计算的大鼠脑干位置出血面积占比和锥体束区域出血面积占比和β-APP免疫组化计算的阳性细胞面积和IOD值可以定量区分大鼠脑干损伤程度,为判断大鼠脑干原发性功能损伤提供新角度,有助于为交通事故和法医检测等脑损伤机制的研究提供实验参考.