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目的研究P27蛋白及DNA倍体水平的不同表达与结肠癌临床病理学特征之间的关系。方法应用免疫组化方法检测P27蛋白在130例结肠癌中的表达水平;应用流式细胞术测定130例结肠癌患者癌细胞DNA相对含量,并分析P27蛋白、DNA倍体与结肠癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期的关系。结果 P27蛋白在癌组织中低表达,DNA异倍体高表达,两者在结肠癌组织与癌旁组织中的表达均有显著性差异(P<0.0 5);P27蛋白与Dukes分期、肿瘤恶性程度有关(P<0.05)。结论 P27蛋白及DNA倍体水平不同的表达与结肠癌的发生、发展有明显的关系,可作为结肠癌临床分期和预后的监测指标之一。 相似文献
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背景:目前对人脐带间充质干细胞的研究主要集中于细胞生物学特性与组织分化等领域的研究,对细胞代谢途径调控的报道还很少。
目的:考察了不同起始浓度的葡萄糖对人脐带间充质干细胞生长和代谢特征的影响。
设计、时间及地点:对比观察实验,于2008-02/06在北京工业大学生命科学与生物工程学院病毒与药理研究室完成。
材料:采集产妇遗弃健康足月分娩胎儿脐带4份。
方法:①从人脐带组织Wharton’s Jelly中成功分离出人脐带间充质干细胞,采用流式细胞仪对分离培养的第3代人脐带间充质干细胞免疫分型进行分析。②将细胞以2.5×107 L-1接种于24孔板中,在含有不同起始葡萄糖浓度(0.31,2.78,6.12,21.58 mmol/L)、体积分数为0.10 FBS的DMEM培养基中培养,每隔24 h取样计数。③将细胞以2.5×108 L-1的密度接种于25 cm2方瓶中培养96 h后,收集不同葡萄糖浓度作用后的细胞,采用流式细胞仪进行细胞周期分析。④将细胞以2.5×108 L-1密度接种于含有不同起始葡萄糖浓度DMEM培养基75 cm2方瓶中,培养96 h后,离心收集上清和细胞,分别用于细胞代谢物检测与酶活性分析。
主要观察指标:①人脐带间充质干细胞细胞形态和表面抗原表达。②细胞生长情况。③细胞周期检测。④细胞胞内外营养物、代谢副产物及酶活性的测定分析。
结果:①采用流式细胞仪对人脐带间充质干细胞进检测,阳性表达的有CD13,CD29,CD44,CD105,CD147,CD90,CD71,表达率均高于90%,而造血干细胞特有标记CD34,CD45及白细胞抗原HLA-DR、CD38呈阴性表达。②葡萄糖能促进人脐带间充质干细胞的生长,但当培养基中缺失葡萄糖时,细胞也可维持生长,在120 h细胞达到最高密度11.6×107 L-1。 ③细胞群体在G0/G1期的分布比例显著高于S期和G2/M期,随着葡萄糖浓度的增加,细胞群体处于G0/G1期的比例逐渐降低,S期相应增加。④当葡萄糖浓度为21.58 mmol/L时,己糖激酶与丙酮酸激酶活性分别比缺失葡萄糖时增加了39.7%和64.3%,而谷氨酰胺、丝氨酸、亮氨酸等氨基酸的比消耗速率却随着葡萄糖浓度的增加而显著降低。
结论:当培养基中缺失葡萄糖时,细胞可利用氨基酸等营养物维持生长;随着葡萄糖浓度的增加,细胞周期分布和葡萄糖代谢途径关键酶活发生改变,从而影响了人脐带间充质干细胞的生长与代谢特征。 相似文献
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Epstein-Barr病毒BARF1基因协同TPA诱发猴肾上皮细胞恶性转化的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 探讨Epstein-Barr病毒(EBV)BARF1基因单独或协同佛波醇乙酯(TPA)诱导猴肾上皮细胞恶性转化的作用。方法 用猴肾永生化上皮细胞PT1和PT7单独或进一步加促癌物TPA注射裸鼠或Scid小鼠背部皮下,观察成瘤情况。结果 EB病毒BARF1永生化细胞PT1客PT7在裸鼠不能形成肿瘤,但在免疫力严重缺陷的Scid小鼠能形成肿瘤,成瘤率为66.7%-100%,成瘤时间较长为45-60d。加TPA后裸鼠及Scid小鼠均能形成肿瘤,裸鼠的成瘤时间为20-22d,Scid小鼠的成瘤时间为5-7d。用聚合酶链反应(PCR)可从肿瘤组织中扩增出BARF1基因。结论 EB病毒BARF1基因是致癌基因,甚至无需促癌物等辅助条件,也能诱发猴肾上皮细胞恶性转化。 相似文献
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在许多癌症中, miR?34家族成员充当着极具潜力的具有肿瘤抑制活性的作用。例如,在肺癌中,外源性高表达miR?34a能够抑制肺癌细胞的增殖并诱导其凋亡。预示着利用miR?34a的恢复疗法( replace?ment therapy)治疗肺癌具有良好的前景,其作用机制也正在逐渐阐明。许多研究发现, miR?34a家族成员与肺癌细胞的增殖、转移、凋亡、细胞周期的调控息息相关。因此, miR?34a家族成员在肺癌的早期诊断、治疗、预后及发病机制的研究中发挥着重要作用。文章综述了miR?34家族的研究现状,重点总结了 miR?34家族在肺癌中的作用机制。 相似文献
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目的基于BDNF/TrkB/PI3K/Akt信号通路观察滋肾醒脑汤对阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆能力的影响,探讨其可能的作用机制。方法采用侧脑室注射β-淀粉样蛋白制备AD大鼠模型,假手术组注射等体积生理盐水,将成模大鼠随机分为模型组、中药组及阳性对照组,每组6只,中药组及阳性对照组分别予滋肾醒脑汤(16.74 g/kg)和盐酸多奈哌齐混悬液(0.45 mg/kg)灌胃,假手术组和模型组灌胃等体积蒸馏水,每日1次,连续4周。采用Morris水迷宫实验进行大鼠行为学检测,TUNEL染色检测海马组织神经细胞凋亡情况,Western blot检测海马组织脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸激酶受体B(TrkB)蛋白表达,免疫组化检测海马组织PI3K、Akt蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期明显延长,跨越平台次数减少,目标象限停留时间缩短(P<0.05,P<0.01),海马组织神经细胞凋亡率明显升高,BDNF、TrkB、PI3K、Akt蛋白表达明显降低(P<0.05);与模型组比较,中药组及阳性对照组大鼠逃避潜伏期明显缩短,跨越平台次数增加,目标象限停留时间延长(P<0.01,P<0.05),海马组织神经细胞凋亡率明显降低,BDNF、TrkB、PI3K、Akt蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01),中药组与阳性对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论滋肾醒脑汤可改善AD大鼠学习记忆能力,其机制可能与上调BDNF/TrkB/PI3K/Akt信号通路蛋白表达,减少神经细胞凋亡有关。 相似文献
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教学内容是决定学生知识能力结构的关键要素,教学方法是决定教师传播知识和学生获取知识的质和量,岗此针对提高教学质量的这两大核心问题,进行了研究和探索。首先,在教学内容建设方面:通过基础知识与前沿知识、教学内容与科研成果、纵向知识和横向学科、健康生理与疾病病理的4个融合,形成具有专业特色的理论框架和体系;其次在教学方法上也进行了尝试:在案例教学法应用的同时,加强参与式互动教学法的实施,树立“优化课内、强化课外”意识以及联系生活事件,从而加深感性认识。激发学生的学习兴趣,开展研究性的学习。最终达到培养学生创新能力的目的,促进学习质量和教学水平的共同提高。 相似文献