TEM β-内酰胺酶变构位点与相应先导药物的研究

目的 对前期研究发现的TEM β-内酰胺酶变构位点的功能性进行进一步的验证,并针对该位点开展潜在的先导药物分子的研究。方法 采用长时间全原子分子动力学模拟,分别对β-内酰胺酶的野生型结构与耐药性突变型进行模拟,通过分析活性位点和变构位点在野生型与突变型中功能性变化的情况,以研究变构活性位点是否可以克服抗生素的耐药性;并针对变构位点采用虚拟筛选的方法,通过筛选大型化合物数据库,筛选潜在的先导候选药物分子。结果与结论 长时间分子动力学模拟表明,不同于活性位点,β-内酰胺酶变构活性位点不会受到突变体的影响;虚拟筛选发现一些苯基呋喃类和吲哚类化合物可结合于变构位点,具有潜在的变构抑制调节功能。本文再次验证了前期发现的TEM β-内酰胺酶变构位点潜在的成药性,并针对该位点发现了两大类候选变构抑制剂。     

清胃散治疗牙周病的网络药理分子机制探讨

目的 利用网络药理学和分子对接技术解析清胃散治疗牙周病的作用机制。方法 借助中药计算系统生物学实验室数据库和中医药百科全书数据库检索清胃散的化学成分和潜在作用靶点,利用Gene数据库查询与牙周病相关的基因。在STRING 11.0平台进行蛋白互作分析,通过DAVID 6.8数据库进行基因本体功能富集分析和基于京都基因与基因组百科全书生物通路富集分析。采用CytoSape 3.6.1软件构建可视化网络。利用分子对接技术验证关键活性成分和关键靶点的结合活性。结果 清胃散方中关键药味是黄连、牡丹皮、升麻,关键活性成分是山柰酚、阿魏酸、维斯阿米醇、儿茶素、黄连碱、小檗碱、小檗红碱、藁本内酯,关键作用靶点是前列腺素G/H合成酶2、一氧化氮合酶3、一氧化氮合酶2、白细胞介素6和肿瘤坏死因子,主要调控肿瘤坏死因子信号通路和细胞因子-受体相互作用。结论 本研究初步明确了清胃散通过多成分、多靶点、多通络治疗牙周病的药效作用机制,为深入研究清胃散的药效物质基础和作用机制提供参考。     

三七药材中芽孢杆菌的热激活研究

目的 ：探讨三七药材在常规灭菌工艺中可能会出现芽孢杆菌的热激活现象,为下一步三七药材灭菌工艺的研究奠定理论基础。方法 ：参照2020年版《中国药典》四部通则1105的方法,结合传统生化法和基质辅助激光解析电离飞行时间质谱法（MALDI-TOF-MS）对三七药材中的污染菌进行分型和鉴定;参照2020年版《中国药典》四部通则9208的相关热激活参数对三七药材进行处理,并对需氧菌总数进行计数,考察是否存在热激活现象。结果 ：三七药材中污染菌多为芽孢杆菌属,如枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌等。与阴性对照组相比,三七药材经90℃、30min热激活处理后的需氧菌总数增幅达147倍之多。结论 ：芽孢杆菌在三七药材污染菌中占比较大,且存在芽孢热激活现象。制药企业在制定灭菌工艺时,应综合考虑,制定行之有效的灭菌方案。     

香薷空气清新剂的制备工艺及抑菌效果评价

目的:以“药食兼用”的香薷为主要原料,研究中药香薷挥发油空气清新剂的制备工艺,以期为后续香薷防瘟疫系列产品的注册和工业化生产提供实验室依据。方法:以金黄色葡萄球菌为试验菌,抑菌圈直径为评价指标,采用纸片抑菌试验方法结合析因设计筛选空气清新剂最佳制备工艺,通过试管二倍稀释法测定香薷空气清新剂的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度。结果:精油含量和含醇量对金黄色葡萄球菌的抑菌效果具有显著性影响(P<0.05),两因素间交互作用不明显,经析因设计确定香薷空气清新剂最佳制备工艺：香薷精油与雪松精油的配比为8∶2,精油与吐温-80的配比为1∶4,精油含量为6%、含醇量为40%。制得的香薷空气清新剂对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为7.81μL/mL,最低杀菌浓度为62.5μL/mL。结论:本实验制得了一种抑菌效果良好的中药空气清新剂。     

口炎清颗粒微生物限度检查方法的适用性试验

目的：建立口炎清颗粒的微生物限度检查方法,并对其检验方法进行验证。方法： 按照《中华人民共和国药典》2015年版四部通则1105非无菌产品微生物限度检查： 微生物计数法、通则1106非无菌产品微生物限度检查： 控制菌检查法和通则 1107 非无菌药品微生物限度标准进行方法适用性试验。结果：采用常规法对样品进行需氧菌总数、霉菌和酵母菌计数方法适用性试验中,试验组与菌液对照组的比值为0.5～2;采用常规法进行控制菌检查方法适用性试验中,试验组检出阳性试验菌。结论：此方法可作为口炎清颗粒微生物限度的检查方法。