Brevibacterium sp.DGCDC-82发酵罐中生产胆固醇氧化酶

用Brevibacterium sp.DGCDC-82在7L发酵罐中分批培养.分别对添加剂吐温-80、培养温度、培养基的pH、通风量和搅拌速度在胆固醇氧化酶的生产中的影响进行了研究.结果显示以上条件均对产酶有影响.在不同的发酵阶段改变发酵操作条件,发酵20 h最高酶活可达1203U/L,生产强度可达60 U/(L·h).既有效地提高了胆固醇氧化酶的产量,又防止了发酵过程中的泡沫外溢.     

超声波处理对红曲色素产量的影响

采用低强度的超声波 ,选取作用时间为变化参数 ,对红曲细胞进行处理 ,其频率为 2 0kHz ,功率为 2 0 0W .结果表明 ,每间隔 8h照射 2min效果最明显     

利用胆固醇氧化酶转化胆固醇制备胆甾-4-烯-3-酮

用酶法催化氧化胆固醇制备胆甾-4-烯-3-酮相对于化学法合成具有反应简单、成本较低等优点.作者探讨了在正辛烷作为有机相的两相反应体系中,以胆固醇氧化酶催化氧化胆固醇制备胆甾-4-烯-3-酮的方法.在胆固醇质量浓度为40g/L,反应时间40min、反应温度40℃、磷酸缓冲液-正辛烷体积比32、通氧40L/h及搅拌转速300r/min下,胆固醇转化率达到92%,经薄板层析及紫外扫描,发现转化产物为单一的胆甾-4-烯-3-酮.     

生物反应过程在线检测系统的研制

计算机控制的微型生物传感器分析系统可以实现生物反应过程中多参数的在线检测 .系统包含在线微量取样、级联稀释、微型生物传感器、生化工程数据处理和分析软件与计算机 .系统实现的指标为取样 10～ 10 0 0 μL/min ,稀释倍数 10 10 .5 4,相对误差小于 2 .5 % ;在线测量酵母发酵的葡萄糖质量浓度 ,最大误差率为 3.88% .     

从乳化体系中分离纯化短杆菌产胆固醇氧化酶

添加剂W对酶的分离纯化造成很大困难,用异丙醇沉淀发酵液的同时加入(NH4)2SO4能够有效地破除乳化体系,去除添加剂W,酶收率达到90%.在pH值为8.0的条件下用SepharoseDEAEFastFlow离子交换透析酶液,比酶活从3.21U/mg提高到29.21U/mg,酶收率达70.1%.     

臂丛阻滞不完善加静脉局部麻醉用于上肢手术

目的介绍臂丛阻滞不完善加静脉局部麻醉的麻醉效果及安全性。方法回顾性分析了2006年1月6日～2011年12月26日在我院住院时臂丛阻滞不完善加静脉局部麻醉的上肢手术患者60例的临床资料。结果麻醉效果Ⅰ级56例,麻醉效果Ⅱ级4例。结论臂丛阻滞不完善加静脉局部麻醉,可用于上肢大型手术,止血带反应明显减少。     

三相分离甾短杆菌胆固醇氧化酶及其性质

三相分离(TPP)是将硫酸铵与叔丁醇混合后形成有机相、中间沉淀相和水相。在20°C,调节发酵上清液的pH至6.0,加入硫酸铵使终浓度为400 g/L,溶解后加入与上清液等体积的叔丁醇,静置1 h分相,胆固醇氧化酶在有机相和水相之间形成蛋白沉淀,12 000 r/min离心10 min收集中间蛋白相,用pH 7.5,10 mmol/L的磷酸缓冲液溶解。结果表明:利用三相分离技术从乳化体系中分离纯化胆固醇氧化酶,比酶活提高了3.49倍,收率达93%。回收的酶液进一步经过DEAE-Sepharose Fast Flow纯化,比酶活从3.56 U/mg提高到30.15 U/mg。该酶最适反应温度为60°C,最适反应pH为7.5,酶的等电点为8.5,该酶在37°C,pH 6.0~8.0较为稳定。Hg2 和Ag 离子完全抑制胆固醇氧化酶的活性。     

丙泊酚与芬太尼复合麻醉在膀胱镜检查中的临床观察

经尿道膀胱镜检查多采用表面麻醉,患者常感到疼痛不适,尤其是部分男性患者难以忍受,造成检查中断,或因惧怕疼痛拒绝再次检查。近两年我院在男性患者膀胱镜检查时,采用丙泊酚与芬太尼复合麻醉,观察其镇静、镇痛效果及安全性,现报告如下。     

持续抗生素盐水冲洗治疗骨关节化脓性感染

目的:探讨骨关节化脓性感染的治疗方法.方法:治疗骨关节化脓性感染18例,均给予病灶清除持续庆大霉素8万U或敏感抗生素盐水置管冲洗治疗,手术后进行总结.结果:本组18例患者,病灶灌注冲洗10～14天后,gI流液3次细菌培养均阴性,2例原创口处部分愈合不良,经2个月换药闭合,1例表浅感染,经换药后3～5周愈合.1例术后6个月感染复发.余均1期愈合,经6月～1.5年随访,未见复发,随访病例患肢功能均恢复良好.结论:持续的抗生素盐水灌注冲洗是治疗骨关节化脓性感染一种行之有效的方法.     

高效价冷凝集素对交叉配血的影响及消除方法的探讨

目的探讨高效价冷凝集素对血常规血型鉴定和交叉配血的影响及消除方法。方法通过临床病例分析、红细胞ABO血型鉴定、血清抗体筛选、抗体鉴定、冷凝集素效价测定等血型血清学检测来查找配血困难原因。结果高效价冷凝集素常造成一些常规检验项目失真,最常见的影响就是对血常规,血型鉴定,尤其是对交叉配血的干扰。与自身红细胞发生明显凝集,使血型鉴定出现失误,并干扰交叉配血,因错误输血而导致自身免疫性红细胞破坏,引发严重的临床症状。结论高效价冷凝集素干扰交叉配血时,应选择有价值的鉴别试验,如复核血型、自身对照试验,抗人球蛋白试验、聚凝胺法交叉配血试验等进行多方面排除、鉴定,以确保临床用血的安全有效性。