HIV-1 Tat蛋白结合Tar的抗艾滋病药物筛选模型的建立研究

目的建立HIV-1Tat蛋白结合Tar的抗HIV-1药物筛选模型用于抗HIV药物筛选。方法构建表达HIV-1Tat蛋白的真核表达质粒（pCDNA3，1（＋）-Tat）和HIV-1 LTR-luc荧光素酶报告基因，采用脂质体转染法共转染HeLa细胞，荧光仪检测Tat蛋白促进荧光素酶在HeLa细胞内的表达情况，建立HIV-1Tat蛋白结合Tar的细胞模型，用于抗HIV-1的药物筛选。以DRB（5，6-二氯-1-β-呋核亚硝脲-苯并咪唑）为阳性对照，进行模型的建立及条件的优化。结果通过反复试验表明，目的基因和报告基因的配比、转染时培养液中小牛血清的含量、细胞浓度、转染前细胞状态以及药物作用时间的长短等对模型的稳定性和敏感性有影响。结论应用优化的细胞模型对文冠果、紫苏等浸提物进行筛选及结果的分析。     

食管癌结合锥形束CT图像引导自适应放射治疗的可行性研究

目的探索利用食管癌患者首周放射治疗时的锥形束CT(cone beam computed tomography,CBCT)图像,建立个体化计划靶区以减少正常组织受照剂量的可行性。方法选取行根治三维放射治疗的食管癌患者10例,获取每位患者治疗首周前5次及后续每周治疗前CBCT验证图像,将其导入治疗计划系统中,与治疗前的定位CT图像配准融合。然后在每个CBCT图像上按患者治疗前靶区勾画原则,再次勾画临床靶区(clinic tumor volume,CTV),并根据首周治疗的摆位误差平均值外扩生成计划靶区(planning tumor volume,PTV)。将首周5个CBCT上勾画的PTV轮廓映射到定位CT上合并生成PTV1,以此法生成后续2～6周的PTV2。按照初始计划(Plan A)的参数设置,保持靶区处方剂量及各危及器官的限量要求不变,以PTV1为靶区,制定一个新的放射治疗计划,即患者个体化的自适应放射治疗计划(Plan B)。用新计划(Plan B)的95%等剂量线评估PTV2覆盖度,通过剂量-体积直方图(DVH)来比较Plan A与Plan B中肺、心脏和脊髓的受照射剂量。结果 PTV1体积比PTV体积小(P<0.05);Plan B中处方剂量95%等剂量线的覆盖率分别为:PTV1=(98.9±2.0)%和PTV2=(99.1±2.0)%,差异无统计学意义(P>0.05)。Plan B的危及器官所受剂量均小于Plan A:肺V20(25.1%vs26.9%)、平均剂量(14.0Gy vs15.1Gy),心脏的平均剂量(16.7Gy vs19.7Gy)和脊髓最大剂量(42Gy vs43Gy),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论利用患者治疗首周CBCT图像资料反馈的信息,可以有效减少计划靶区体积。修改后的计划可在后续治疗中开展,并能进一步减少靶区周围危及器官的照射剂量和潜在提高靶区剂量。     

重组人表皮生长因子预防鼻咽癌放射性口腔黏膜炎和急性放射性皮炎的疗效观察

目的 观察重组人表皮生长因子(rhEGF)预防鼻咽癌(NPC)放射性口腔黏膜炎和急性放射性皮炎的临床疗效。 方法 将2014年1月至2015年12月收治的50例鼻咽癌患者(Ⅱ期5例,Ⅲ期32例,Ⅳa期13例)随机分为试验组(n=26)和对照组(n=24),两组全程均给予调强放射治疗,放疗周期6周,对照组同时采用顺铂单药化疗,每7 d为一周期,化疗周期为5~6周期;试验组在对照组的治疗基础上同期联合重组人表皮生长因子(口腔喷雾和颈部皮肤涂抹凝胶)进行治疗。以完全缓解、部分缓解、疾病稳定和疾病进展评价两组近期疗效,并采用美国国立癌症研究所常规毒性判定标准对不良反应进行评定。 结果 两组近期疗效基本相当(P>0.05);两组未出现因不良反应致死的情况;两组患者在治疗过程中出现的不良反应率基本相当,均以消化道毒性、骨髓抑制、肝功异常为主;两组患者均发生Ⅰ级以上的放射性口腔黏膜炎和颈部急性放射性皮炎,试验组中Ⅱ级以上放射性口腔黏膜炎和急性放射性皮炎的发生率(42.31%和11.54%)均明显低于对照组(70.83%和41.67%),差异均有统计学意义(P=0.042,0.035)。 结论 重组人表皮生长因子同期联合放化疗治疗鼻咽癌可以有效降低放化疗所致的放射性口腔黏膜炎和颈部急性放射性皮炎等不良反应的发生率。     

HIV-1病毒Nef基因克隆、表达、纯化及其抗体的制备

目的:运用基因工程方法制备HIV-1 Nef重组蛋白及其抗体.方法:用PCR技术从HIV-1 H×B2质粒中扩增HIV-1 Nef基因,将测序鉴定过的HIT-1 Nef基因克隆到原核表达载体pET28a( )上,应用酶切鉴定、测序、SDS-PAGE及Western blot等方法鉴定基因片段的正确性及表达蛋白的特异性.纯化的重组蛋白免疫兔3次后,ELISA法测定兔多克隆抗体滴度.用其制备的多克隆抗体通过免疫组织化学方法测定表达Nef基因的内皮细胞.结果:成功地构建了Nef基因的原核表达质粒,测序证明HIV-1 Nef基因全长为621 bp,编码206个氨基酸.在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达的重组蛋白为包涵体的形式.HIV-1 Nef蛋白N端融合6×His标签便于纯化及鉴定.获得的高纯度HIT-1 Nef融合蛋白,免疫动物后,可产生特异的高滴度抗体(ELISA滴度达1∶10000).将转染Nef基因的内皮细胞,应用免疫组化的方法证明其抗体有高度的特异性.结论:构建了高表达HIT-1 Nef蛋白的原核表达系统,制备的Nef重组蛋白免疫动物,获得了特异、高效价的抗体,为研究Nef基因的生物学活性提供了实验材料和依据.     

非小细胞肺癌6MV-X射线和10MV-X射线调强放射治疗计划的剂量学比较

目的比较非小细胞肺癌（NSCLC）调强放射治疗（IMRT）计划中采用6MV-X和10MV-X射线治疗的剂量学差异。方法应用ADAC Pinnacle8治疗计划系统提供的卷积/迭加法对两种能量条件下相同靶区的IMRT计划进行剂量计算,通过剂量-体积直方图（DVH）参数（最大剂量、平均剂量和处方剂量）、均匀性指数（HI）以及适形指数（CI）,比较8例肺癌患者的6MV-X和10MV-X射线的IMRT计划的物理学参数。结果两者靶区的平均剂量、HI和CI之间差异比较无明显统计学差异,但6MV计划中高剂量覆盖靶区的程度优于10MV计划;正常肺组织、心脏、脊髓等危及器官（OAR）的受量基本相同。结论对于肺癌的放射治疗建议选用6MV-X射线。     

天麻种麻与商品麻对东莨菪碱诱发大鼠记忆障碍改善作用的比较

目的 比较天麻种麻与天麻商品麻改善东莨菪碱诱发的记忆障碍的疗效。方法 用天麻种麻，商品麻灌胃饲养幼鼠一个月。然后用东莨菪碱诱发大鼠造记忆获得性障碍模型，通过Morris水迷宫测试大鼠寻找平台的潜伏期。结果天麻种麻。商品麻6g／kg剂量对东莨菪碱诱发的大鼠获得性记忆障碍都有很明显的改善作用，商品麻甚至接近正常水平，达到逆转的疗效，天麻种麻的疗效达到石杉碱甲的疗效水平。结论 天麻种麻对东莨菪碱诱导记忆获得性障碍有明显的改善作用。认为可以替代商品麻投料入药。     

非小细胞肺癌6MV-X射线和10MV-X射线调强放射治疗计划的剂量学比较

目的比较非小细胞肺癌(NSCLC)调强放射治疗(IMRT)计划中采用6MV-X和10MV-X射线治疗的剂量学差异。方法应用ADAC Pinnacle8治疗计划系统提供的卷积/迭加法对两种能量条件下相同靶区的IMRT计划进行剂量计算,通过剂量-体积直方图(DVH)参数(最大剂量、平均剂量和处方剂量)、均匀性指数(HI)以及适形指数(CI),比较8例肺癌患者的6MV-X和10MV-X射线的IMRT计划的物理学参数。结果两者靶区的平均剂量、HI和CI之间差异比较无明显统计学差异,但6MV计划中高剂量覆盖靶区的程度优于10MV计划;正常肺组织、心脏、脊髓等危及器官(OAR)的受量基本相同。结论对于肺癌的放射治疗建议选用6MV-X射线。     

椎前间隙侵犯对鼻咽癌预后影响的回顾性分析

目的探讨椎前间隙侵犯( prevertebral space involvement,PVSI)对鼻咽癌预后的影响。方法回顾性分析柳州市人民医院 2009年7月至 2015年12月经病理证实的初治并排除远处转移的 250例鼻咽癌病人。所有病人放疗前行鼻咽部及颈部 MRI检查,接受二维、三维适形或调强适形放疗联合或不联合化疗。 Kaplan?Meier法计算生存率并经 Log?rank检验,采用 Cox多因素分析比较预后。结果中位随访时间 56个月。共 87例病人椎前间隙受侵(34.8%),为椎前间隙受侵组,另外 163例为椎前间隙未受侵组。椎前间隙受侵组较未受侵组的 T分期、 N分期及临床分期明显较差(均 P＜0.001)。椎前间隙受侵组与未受侵组相比,总生存率(OS)、无局部区域复发生存(LRFS)、无远处转移生存(DMFS)分别为 83.4%比64.4%(P＜0.001)、90.8%比85.1%(P＝0.069)、87.7%比71.3%(P＜0.001)。Cox多因素分析结果提示, PVSI是影响两组病人 OS(P＝0.013)的因素和 DMFS(P＜0.001)的独立预后因素。结论鼻咽癌椎前间隙受侵发生率较高,且较未受侵者的 OS、DMFS低, PVSI是影响鼻咽癌病人预后因素。     

放射治疗在胃癌治疗中的作用

放射治疗很早就有用于治疗胃癌患者的报道,特别是在INT-0116试验结果表明放射治疗联合化疗能够改善肿瘤患者的局控率和长期生存率之后,临床上对存在高危因素的胃癌患者给予放射治疗或联合化疗的治疗越来越多,放射治疗胃癌的作用越来越突显并受到重视.本文就放射治疗在胃癌治疗中的作用做一综述.