益肺宣肺降浊方对血管性痴呆大鼠海马神经元凋亡及p-CREB和CREB蛋白表达的影响

目的:观察益肺宣肺降浊方对血管性痴呆大鼠海马神经元凋亡及p-CREB和CREB蛋白表达的影响。方法:采用双侧颈总动脉夹闭再通法制备痴呆模型,随机分为空白组、模型组、石杉碱甲组、中药高剂量组、中药中剂量组和中药低剂量组。药物治疗30天后,采用Tunel检测神经细胞凋亡,Western Blot检测大鼠海马CA1区cAMP/PKA-CREB信号通路相关因子p-CREB和CREB的蛋白表达。结果:①Tunel检测结果显示,模型组神经细胞凋亡明显;与模型组比较,各用药组神经细胞凋亡数目明显减少,有显著性差异(P0.01);中药随着剂量的增加,其改善海马神经细胞凋亡的作用越明显,呈剂量正相关(P0.01),其中高剂量组与石杉碱甲组作用相当(P0.05)。②与空白组比较,模型组p-CREB、CREB蛋白表达均明显下降(P0.01);与模型组比较,中药高、中剂量组p-CREB、CREB蛋白表达均明显升高(P0.01),其中中药高剂量组接近空白组水平(P0.05);石杉碱甲组CREB蛋白表达明显升高,与模型组比较有显著性差异(P0.01)。结论:益肺宣肺降浊方具有减少海马神经元凋亡和增加p-CREB和CREB蛋白表达的作用。     

益肺宣肺降浊方对血管性痴呆大鼠行为学及海马病理和神经元凋亡的影响

目的:观察益肺宣肺降浊方对血管性痴呆大鼠行为学及海马病理和神经元凋亡的影响。方法:采用双侧颈总动脉夹闭再通法制备痴呆模型,随机分为模型组、石杉碱甲组、中药高剂量组、中药中剂量组和中药低剂量组(注:中药为益肺宣肺降浊方)。药物治疗30 d后,采用Morris水迷宫实验观察大鼠的学习、记忆能力,光镜下观察大鼠海马CA1区的病理变化,用TUNEL法检测神经细胞凋亡。结果:在定位航行试验中,中药3个组的平均潜伏期较模型组明显缩短,与模型组比较有统计学差异(P0.01)。在空间探索实验中,中药3个组与模型组比较,成功次数差异均具有统计学意义(P0.01)。与模型组比较,各中药组大鼠海马CA1区神经细胞坏死、变性和凋亡明显减轻。结论:益肺宣肺降浊方具有改善痴呆大鼠学习、记忆能力及减轻海马损伤和神经元凋亡的作用。     

温脾通络开窍汤对老年性痴呆大鼠学习记忆能力及海马CA3区JNK蛋白表达的影响

目的:观察温脾通络开窍汤对老年性痴呆大鼠学习记忆能力及海马CA3区神经元JNK蛋白表达的影响。方法:将120只大鼠随机分为假手术组、模型组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组及石杉碱甲组共6组,除假手术组外,其他组大鼠均在海马CA3区注射冈田酸诱导老年性痴呆模型,假手术组在海马CA3区注射等体积的10%二甲亚砜。观察大鼠的学习记忆能力及海马CA3区神经元JNK蛋白表达的变化。结果:①与假手术组比较,模型组大鼠在空间探索实验中跨越平台的次数明显减少(P0.01);与模型组比较,各用药组均能增加大鼠跨越平台的次数(P0.05或P0.01);与石杉碱甲组比较,中药低、中剂量组大鼠跨越平台的次数明显减少(P0.01),而中药高剂量组大鼠跨越平台的次数与石杉碱甲组无显著性差异(P0.05)。②与假手术组比较,模型组大鼠海马CA3区JNK蛋白阳性表达显著升高(P0.01);与模型组比较,各用药组大鼠海马CA3区JNK蛋白阳性表达均有显著下降(P0.01);各用药组中石杉碱甲组降低效果最为明显,优于中药中、低剂量组(P0.05),中药高剂量组与石杉碱甲组效果相当(P0.05)。结论:温脾通络开窍汤可以改善AD大鼠的学习记忆能力,其机制可能与下调CA3区JNK蛋白表达有关。     

温脾通络开窍方对Aβ_(1-42)诱导小胶质细胞炎性因子的影响

目的:研究温脾通络开窍方对Aβ1-42诱导小胶质细胞生成和释放炎性因子IL-1β、IL-6及TNF-α的抑制作用。方法:实验分为5组:空白对照组,模型组,温脾通络开窍方高、中、低浓度组。除空白对照组外,余组均予Aβ1-42诱导BV-2细胞释放IL-1β、IL-6及TNF-α等炎性细胞因子,温脾通络开窍方予不同浓度进行干预,用ELISA法检测各组IL-1β、IL-6及TNF-α含量的变化。结果:与模型组比较,温脾通络开窍方细胞上清液中IL-1β、IL-6及TNF-α含量均显著降低,尤以高浓度作用最明显(P<0.01)。结论:温脾通络开窍方对活化后BV-2细胞IL-1β、IL-6及TNF-α的分泌有显著的抑制作用,提示良好的抗炎作用可能是温脾通络开窍方治疗老年性痴呆的药理机制之一。     

温脾通络开窍方对老年性痴呆模型大鼠记忆能力、β-分泌酶的影响

目的:观察温脾通络开窍方对老年性痴呆模型大鼠记忆能力、β-分泌酶的影响。方法:采用冈田酸诱导亚急性老年性痴呆模型,随机分为模型组,西药组,温脾通络开窍方高剂量组、中剂量组、低剂量,对照组。药物治疗2个月后,采用Morris水迷宫实验观察大鼠的学习记忆能力,电镜下观察大鼠海马CA1区的病理变化,Western blot法检测脑组织β-分泌酶的表达。结果:(1)Morris水迷宫定位航行实验逃避潜伏期比较:对照组逃避潜伏期短于模型组,差异有统计学意义(P0.05);西药组,温脾通络开窍方高剂量组、中剂量组、低剂量组逃避潜伏期短于模型组,差异有统计学意义(P0.05);西药组与温脾通络开窍方高剂量组、中剂量组、低剂量组比较,差异无统计学意义(P0.05)。(2)Morris水迷宫空间探索实验游泳距离及跨越平台次数比较:模型组与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05);模型组与西药组,温脾通络开窍方高剂量组、中剂量组、低剂量组比较,差异有统计学意义(P0.05);西药组与温脾通络开窍方高剂量组、中剂量组、低剂量组,差异无统计学意义(P0.05)。(3)β-分泌酶的活性比较:对照组与西药组,温脾通络开窍方高剂量组、中剂量组、低剂量组比较,差异有统计学意义(P0.05);模型组与温脾通络开窍方高剂量组、中剂量组、低剂量组比较,差异有统计学意义(P0.05);西药组与温脾通络开窍方高剂量组、中剂量组比较,差异有统计学意义(P0.05)。(4)神经元细胞凋亡率比较:对照组与西药组,模型组,温脾通络开窍方中剂量组、低剂量组比较,差异有统计学意义(P0.05);模型组与温脾通络开窍方高剂量组、中剂量组、低剂量组比较,差异有统计学意义(P0.05);西药组与温脾通络开窍方高剂量组、中剂量组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论:温脾通络开窍方能减少β-分泌酶活性,抑制神经细胞凋亡率,从而改善痴呆大鼠学习记忆能力及减轻海马神经元损伤。     

血管性痴呆动物模型的研究进展

正血管性痴呆(Vascluar Dementia,VD)是由脑血管病(缺血或出血或急慢性缺氧性脑血管病等)引起的有痴呆表现的临床综合征,是临床常见的老年期痴呆的一种类型,其患病率位居老年期痴呆类型的第二位,仅次于阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)。血管性痴呆的神经病理分类包括缺血性和出血性脑损害所致的痴呆以及低血氧-低灌流性痴呆。患者多为慢性、进行性、持续性智能障碍综合征,临床表现为记忆及认知等功能障碍综合征[1]。VD动物模型种类繁多,其主要的研究思路就是建立一种与人类血管性痴呆发病及病理特点相似的血管性痴呆动物模型。近年来关于VD动物模型的研究日渐增多,并取得了一定进展,对VD的临床及实验研究起了很大的推动作用。本文就近年来常用的VD动物模型综述如下。     

温脾通络开窍法对Aβ1—42诱导小胶质细胞炎性因子的影响

目的研究温脾通络开窍法对Aβ1—42诱导小胶质细胞炎性因子的影响。方法采用体外培养小鼠小胶质（BV-2）细胞株,Aβ1—42诱导BV-2细胞活化,用ELISA法检测不同浓度组（10×106-3kg／L、0．1×10^-3kg／L、1×10μkg／L）温脾通络开窍汤对白细胞介素1B（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）及肿瘤坏死因子（TNF—a）含量的影响。结果与模型组比较,各温脾通络开窍汤组细胞上清中IL-1β、IL-6及TNF—a含量均有降低,以高浓度（10×10^-3kg／L）温脾通络开窍汤组最为显著,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论温脾通络开窍法对活化后BV-2细胞分泌IL-1β、IL-6及TNF—a有显著的抑制作用,良好的抗炎作用可能是温脾通络开窍法治疗老年性痴呆的药理机制之一。     

基于网络药理学探讨肉苁蓉治疗血管性痴呆的作用机制

目的基于网络药理学探讨肉苁蓉治疗血管性痴呆(vascular dementia,VD)的作用机制。方法采用TCMSP分析平台检索中药活性成分和中药靶点,利用GeneCards数据库和OMIM数据库筛选肉苁蓉治疗VD的作用靶点,构建蛋白互作网络(PPI),进行GO功能富集分析及KEGG通路富集分析,构建可视化的中药-疾病靶点相关的信号通路。结果从肉苁蓉中筛选出4个有效成分,作用于60个血管性痴呆靶点,肉苁蓉治疗VD的核心基因主要有IL6、VEGFA、EGFR、CASP3、MYC、CCND1、FOS、PPARG、AR、RELA、NOS3、ICAM1等。中药-疾病靶点涉及的GO功能主要包括DNA结合转录激活活性、核受体活性、转录因子活性,直接配体调节的序列特异性DNA、乙酰胆碱受体活性、泛素蛋白连接酶结合、RNA聚合酶II转录因子结合等。中药-疾病靶标涉及的KEGG通路主要包括流体剪切应力与动脉粥样硬化信号通路、前列腺癌信号通路、糖尿病并发症中AGE-RAGE信号通路、肿瘤坏死因子信号通路、癌症中的蛋白多糖信号通路、PI3K-Akt信号通路、肝细胞癌信号通路、细胞凋亡信号通路、丙肝信号通路等。结论基于网络药理学探讨了肉苁蓉治疗血管性痴呆的分子机制,为中药现代化研究提供了理论基础。     

温脾通络开窍汤联合尼莫地平对血管性痴呆患者MMSE评分以及炎性因子的影响

目的:研究温脾通络开窍汤联合尼莫地平对血管性痴呆患者的临床疗效以及对发病机制炎性因子的影响。方法:采用回顾性研究方法,将我院80例血管性痴呆患者随机分为观察组和对照组。对照组予以降压、降脂和抗血小板凝聚等基础治疗措施,口服尼莫地平片30 mg,每日3次,并停用其他抗痴呆药物。观察组在对照组治疗基础上加用温脾通络开窍汤治疗。分别于治疗前1天、治疗结束后第1天对患者进行MMSE量表评分,并测量血清中炎性因子IL-6及TNF-α的含量。结果:观察组的总有效率明显高于对照组,差异有显著性意义(P<0.05)。与治疗前比较,两组治疗后的MMSE评分均明显增加,差异有显著性意义(P<0.05);且观察组的MMSE评分增加明显高于对照组,差异有显著性意义(P<0.05);两组治疗后IL-6,TNF-α的含量均较治疗前明显降低,且观察组治疗后血清中的IL-6及TNF-α含量明显低于对照组(均P<0.05)。结论:温脾通络开窍汤联合尼莫地平治疗VaD患者效果明显,值得临床上进一步推广。