脂肪干细胞来源外泌体促进糖尿病小鼠创面愈合的实验研究

目的探讨脂肪干细胞来源外泌体(adipose-derived stem cell released exosomes,ADSC-Exos)对糖尿病小鼠创面愈合的影响。方法取患者自愿捐赠脂肪组织,采用酶消化法分离培养ADSCs,并于第3代细胞上清液提取Exos(ADSC-Exos);透射电镜观察ADSC-Exos形态,Western blot检测膜表面标志性蛋白Alix、CD63,纳米颗粒跟踪分析仪检测粒径分布。取患者自愿捐赠皮肤组织,采用酶消化法分离培养成纤维细胞。将PKH26标记的ADSC-Exos与第5代成纤维细胞培养,共聚焦荧光显微镜观察其能否进入细胞,采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)及划痕法观察ADSC-Exos对成纤维细胞增殖及迁移的影响。取24只8周龄Balb/c雄性小鼠制备糖尿病模型后,背部制备直径8 mm全层皮肤缺损创面,实验组(n=12)及对照组(n=12)创面真皮层分别注射0.2 mL ADSC-Exos及PBS。第1、4、7、11、16、21天大体观察创面愈合情况,计算创面愈合率;第7、14、21天取材,行组织学(HE及Masson)及CD31免疫组织化学染色,观察创面结构、胶原纤维及新生血管情况。结果ADSC-Exos为边缘清晰、大小分布均匀的膜性囊泡;粒径为40~200 nm,平均102.1 nm;膜表面标志性蛋白Alix、CD63均呈阳性。ADSC-Exos与成纤维细胞复合培养观察示,ADSC-Exos可进入成纤维细胞胞内,并能促进成纤维细胞增殖及迁移。动物实验显示,实验组小鼠背部创面愈合明显快于对照组,各时间点创面愈合率差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,实验组创面结构愈合更好,愈合前期新生微血管更多,愈合后期胶原纤维沉积更多;其中,第7、14、21天创面缺损长度,第7、14天微血管数量,第14、21天胶原纤维沉积百分比,组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论ADSC-Exos通过促进创面血管新生以及成纤维细胞增殖、迁移和胶原合成来促进糖尿病小鼠创面愈合。     

PDGF-BB和CTGF在体外对人皮肤成纤维细胞增殖的影响

目的探讨重组人血小板衍生生长因子（rhPDGF-BB）和重组人结缔组织生长因子（rhCTGF）单独或联合应用对体外培养的人皮肤成纤维细胞（human skin fibroblast,HSF）增殖的影响,为寻求快速扩增HSF的方法提供参考依据。方法取手术中切除的正常皮肤,以常规组织块法体外获得皮肤成纤维细胞。取生长良好的第4~7代细胞种入96孔板,分实验组和对照组,分别加入不同浓度的rhPDGF-BB、rhCTGF或rhPDGF-BB＋rhCTGF作用。于第1、3、6、9d采用四唑盐（MTT）法分别测定各组吸光度A值,观察上述两种生长因子对细胞的增殖作用。结果 rhPDGF-BB能明显促进体外培养的HSF增殖,在1~9d,0.1ng/ml~100ng/ml范围内呈浓度时间依赖关系。rhCTGF也能明显促进HSF增殖,除第1d最大效应浓度为50ng/ml,其余时间点在10ng/ml~100ng/ml范围内呈浓度时间依赖关系。而rhCTGF150ng/ml组的增殖效果相对100ng/ml组略成下降趋势。rhPDGF-BB与rhCTGF最大与最小效应联用组亦成浓度时间依赖关系。最大效应联用组的增殖效果与以上两种生长因子单独应用比较均具有统计学意义（P〈0.05）。最小效应联用组与rhCTGF10ng/ml组比较有统计学意义（P〈0.05）,而与rhPDGF-BB0.1ng/ml组比较无统计学意义（P〉0.05）。另外,最大效应浓度的两生长因子单独应用时,rhPDGF-BB促增殖效果优于rhCTGF（P〈0.05）。结论 rh-PDGF-BB和rhCTGF均可促进体外培养的HSF增殖,在一定范围内呈浓度时间依赖关系,而且前者优于后者。两者联合应用对HSF增殖具有协同效应。     

皮肤填充剂并发症原因分析及处理

皮肤填充剂(或称软组织填充剂,fillers),在美容整形外科中广泛用于体表皱纹、凹陷、缺损的填充.自软组织填充剂问世以来,美容整形外科医师一直在寻求一种理想的填充材料,它必须符合以下条件[1-2]:①安全,生物相容性良好;②无毒性,无致癌性;③无过敏反应;④稳定性好,无游走性;⑤保持原有体积和柔韧性;⑥不会因吞噬作用而被清除;⑦诱发异物反应的可能性低;⑧不会导致异物肉芽肿.     

复方平阳霉素联合长脉宽1064nm激光治疗静脉血管畸形

目的观察复方平阳霉素联合长脉宽1 064 nm激光治疗皮肤静脉血管畸形的疗效。方法 47例皮肤静脉血管畸形的患者先瘤内注射平阳霉素、地塞米松、明胶海绵和利多卡因的混合药液,待瘤体明显变薄(厚度约0.8 cm)后,再选用长脉宽1 064 nm Gentle YAG激光治疗。结果治疗后随访6~12个月,完全治愈23例(48.94%),基本治愈15例(31.91%),显效6例(12.77%),好转3例(6.38%),无效0例(0%),总有效率93.62%。结论复方平阳霉素联合长脉宽1 064 nm激光治疗皮肤静脉血管畸形能有效避免单一治疗方法的不足,疗效高,复发率低。     

2种唐松草属植物异喹啉类生物碱的研究北大核心CSCD

该文对2种唐松草属植物高原唐松草Thalictrum cultratum和贝加尔唐松草T.baicalense根的化学成分进行了研究。通过硅胶、氧化铝、ODS、Sephadex LH-20凝胶等多种柱色谱方法,以及制备高效液相等分离手段,从2种唐松草属植物乙醇提取物中分离鉴定了11个简单异喹啉类生物碱,包括1个新化合物,命名为去氢黄白蓬草碱(1),和10个已知化合物:N-甲基紫堇碱(2)、N-methylthalidaldine(3)、黄白蓬草碱(4)、氧化北美黄连次碱(5)、降氧化北美黄连次碱(6)、6,7-二甲氧基-2-甲基异喹诺酮(7)、thalactamine(8)、去氢降氧化北美黄连次碱(9)、6,7-二甲氧基-2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉(10)、isopicnarrhine(11)。通过HR-ESI-MS、1D和2D NMR等波谱技术鉴定了化合物的结构。其中化合物1为新的简单异喹啉类生物碱,化合物11为首次从该属植物中分离得到。对化合物的细胞毒活性进行了评价,实验结果表明所有化合物对肿瘤细胞株HL-60、U937、HCT116、Caco-2、HepG2均无明显的细胞毒活性。     

倍频Nd∶YAG激光两种波长治疗血管瘤效果比较

目的 观察比较倍频Nd∶YAG 532 nm和1064 nm激光治疗皮肤血管瘤的疗效.方法 分别使用532 nm和1064 nm两种波长治疗皮肤血管瘤108例,观察病变范围的大小和色泽变化,并结合病理切片比较两者疗效.结果 倍频Nd:YAG 532 nm和1 064 nm两种波长治疗血管瘤4次后有效率分别为75.9％和94.4％,总有效率为85.2％,不艮反应发生率低.病理切片结果显示,两种治疗波长照射后瘤体内血管数量减少,血管腔变细,且1 064 nm较532 nm治疗后的改变更明显.结论 倍频Nd∶YAG 1 064 nm激光治疗皮肤血管瘤是一种安全、有效的方法.     

持续正压通气及固尔苏联合治疗新生儿呼吸窘迫综合征疗效观察及护理

目的:评价经鼻持续正压通气(NCPAP)及固尔苏联合治疗新生儿呼吸窘迫综合征(NRDS)的治疗效果,同时探讨护理措施。方法:对36例NRDS患儿进行临床观察。结果:治疗组明显优于观察组。两组在治疗后1h、6h、12h,临床症状、体征及血气分析较治疗前显著改善,但治疗组肺部感染的并发症及氧疗时间均少于观察组。结论:持续正压通气及固尔苏联合治疗新生儿呼吸窘迫综合征疗效肯定,肺部感染并发症少,氧疗时间短,明显优于常规机械通气。     

人脂肪干细胞与不同浓度纤维蛋白胶的相容性研究

目的 研究人脂肪干细胞(ASCs)与不同浓度纤维蛋白胶支架的体外生物相容性.方法 获取人原代ASCs,鉴定后通过CCK-8试验检测纤维蛋白胶对ASCs的毒性.通过光镜直接观察和活细胞/死细胞(DEAD/LIVE)双标染色荧光观察ASCs分别与100.0、50.0、25.0、12.5 mg/mL 4组不同浓度纤维蛋白胶支架三维培养后ASCs的生长状况.结果 CCK-8试验显示纤维蛋白胶对ASCs无明显毒性.通过光镜直接观察及DEAD/LIVE双荧光染色后观察显示ASCs与不同浓度纤维蛋白胶复合后细胞呈立体三维生长,ASCs增殖速率和健康程度(DEAD/LIVE值)随纤维蛋白浓度降低而提高,低于25.0 mg/mL时细胞增殖速率和健康程度趋于良好.结论 ASCs与纤维蛋白胶支架具有良好的体外生物相容性,纤维蛋白浓度低于25.0 mg/mL为与ASCs三维培养的适宜浓度.     

基于指纹图谱和多成分定量结合化学模式识别的莲房药材质量评价

目的 建立不同产地莲房Nelumbo nucifera的HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法,结合化学模式识别法评价不同产地莲房药材质量。方法 采用Welch Ultimate^® Polar-RP（250 mmÍ4.6 mm,3 μm）色谱柱,以甲醇-乙腈（1∶2,A）-0.2%甲酸水溶液（B）为流动相,柱温40 ℃,体积流量0.6 mL/min,检测波长270 nm,绘制20批不同产地的莲房药材的指纹图谱,应用SPSS 26.0和SIMCA 14.1软件结合化学模式识别,聚类分析（cluster analysis,CA）、主成分分析（principal component analysis,PCA）、正交偏最小二乘法判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA）、优劣解距离法（technique for order preference by similarity to ideal solution,TOPSIS）对不同产地莲房样品进行质量评价,并测定6种主要成分的含量。结果 20批HPLC指纹图谱共匹配出17个共有峰,分别指认出儿茶素、荷叶碱、N-去甲荷叶碱、金丝桃苷、异槲皮苷、槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷和紫云英苷7个成分;指纹图谱相似度在0.546～0.991,CA将20批莲房分为3类;PCA、OPLS-DA与TOPSIS分析结果为产于安徽芜湖、江西赣州、山东微山湖的药材质量较好;并分析筛选出荷叶碱、N-去甲荷叶碱和儿茶素等5个成分为引起不同产地质量差异的标志性成分。莲房中6个主要成分儿茶素、荷叶碱、N-去甲荷叶碱、金丝桃苷、异槲皮苷和槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷的质量分数分别为0.029%～0.958%、0.007%～0.137%、0.013%～0.104%、0.015%～0.282%、0.008%～0.110%、0.027%～0.541%。结论 建立的莲房HPLC指纹图谱操作简便、结果可靠,儿茶素、荷叶碱、N-去甲荷叶碱、金丝桃苷、异槲皮苷和槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷可以作为莲房质量评价的主要指标性成分。