芪灵扶正清解颗粒调控P53/AMPK信号通路诱导HepG2细胞铁死亡

目的 探究芪灵扶正清解颗粒是否调控P53/AMPK信号通路诱导Hepg2细胞铁死亡。方法 (1)使用不同浓度芪灵扶正清解颗粒培养液培养HepG2细胞,CCK-8法筛选其最佳干预浓度;(2)将Hepg2细胞分为空白组、Fer-1组、芪灵组、Fer-1+芪灵组;(3)透射电镜观察HepG2细胞线粒体形态;(4)流式细胞术检测活性氧ROS含量;(5)生化法检测Fe²⁺含量;(6)免疫荧光检测P53、Slc7a11、Gpx4蛋白表达;(7)荧光定量PCR测定P53、Ampk、Gpx4mRNA水平;(8)蛋白印迹法检测Ampk、p-Ampk、P53、Beclin1、Acsl4、Slc7a11、Gpx4蛋白表达情况。结果 (1)芪灵扶正清解颗粒能够抑制HepG2细胞增殖,以5mg/ml浓度的抑制作用最明显(P<0.05);(2)与空白组及Fer-1+芪灵组比较,芪灵组ROS和Fe²⁺均升高(P<0.05),Ampk、p-Ampk、P53、Beclin1、Acsl4蛋白、ACSL4、P53mRNA表达水平及P53荧光信号强度升高(P<0....     

金水六君煎加减联合西药治疗支气管哮喘慢性持续期肺肾两虚证30例

目的 观察金水六君煎加减联合西药治疗支气管哮喘慢性持续期肺肾两虚证的疗效。方法选取2020年3月—2021年3月在福建省人民医院呼吸科门诊就诊的2、3级支气管哮喘慢性持续期肺肾两虚证患者60例,按照随机数字表法分为观察组和对照组各30例。对照组给予信必可都保吸入治疗,观察组在对照组基础上加用金水六君煎加减口服,疗程均为8周。比较2组疗效及治疗前后哮喘控制水平测试（ACT）评分、肺功能（FEV1、PEF）、呼出气一氧化氮（FeNO）、CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg比例及调节性T细胞（Tregs）数量的变化情况。结果 观察组总有效率为93.33%,优于对照组的73.33%（P<0.05）;与治疗前比较,2组治疗后ACT评分、FEV1、PEF、CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Tregs比例均明显升高,且观察组升高更为明显（P均<0.05）;与治疗前比较,2组治疗后FeNO及Tregs数量均降低,且观察组降低更为明显（P均<0.05）。结论...     

加味涤痰汤对慢性间歇低氧模型大鼠心肌组织损伤及Keap1-Nrf2信号通路的影响

目的探讨加味涤痰汤对慢性间歇性低氧诱导大鼠心肌损伤的影响及可能作用机制。方法 30只SD大鼠随机分为正常组、模型组、加味涤痰汤组,每组10只。模型组和加味涤痰汤组放入低氧舱内建立慢性间歇性低氧大鼠模型。加味涤痰汤组每天放进低氧舱前30 min按14.8 g/(kg·d)灌胃给药,正常组和模型组则按相同体积予生理盐水灌胃,共干预12周。检测血清心肌酶指标[包括肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)]、氧化应激指标[包括丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)]和组织铁含量;检测心肌组织中kelch样ECH关联蛋白1 (Keap1)、核红系转录因子2 (Nrf2)、谷胱甘肽过氧化物酶4 (Gpx4)、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4 (Acsl4)蛋白和mRNA的表达;HE染色观察心肌细胞的形态。结果与正常组比较,模型组大鼠血清CK、CK-MB、LDH、MDA上升,GSH表达和组织铁含量降低,心肌组织Keap1、Acsl4蛋白和mRNA表达增加,Nrf2、Gpx4蛋白和mRNA表达减少(P<0.05);HE染色结果显示模型组大鼠心肌组织内血管充血,淋巴细胞浸润...     

基于自噬探讨芪灵扶正清解方抗抑郁作用研究＊

目的 观察芪灵扶正清解方对抑郁模型大鼠行为学及海马神经元微结构的影响，探讨其对自噬相关蛋白、基因的调节及其抗抑郁机制。方法 30只SD大鼠随机分3组：正常组、模型组、芪灵组。正常组不干预，其余2组以慢性不可预知温和应激联合孤养建立抑郁大鼠模型。各组大鼠进行糖水消耗实验、敞箱实验行为学观察；HE染色观察海马细胞形态；透射电镜观察海马细胞超微结构及自噬变化；蛋白免疫印迹法（Western blot）和实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测Ulk1、Beclin1、P62、LC3蛋白和mRNA的表达；免疫组织化学染色法（IHC）检测海马组织Beclin1表达。结果 行为学实验提示：与正常组比较，模型组大鼠糖水消耗量明显降低（P<0.05）；直立次数、水平穿越的格数和理毛时间减少，粪便粒数和中央格停留时间增加（P<0.05）；与模型组比较，芪灵组大鼠糖水消耗量明显增加（P<0.05）；直立次数、水平穿越的格数和理毛时间增加，粪便粒数和中央格停留时间减少（P<0.05）。HE染色提示：与正常组比较，模型组海马CA3区细胞数量减少，排列紊乱，部分细胞核模糊；CA1区细胞形态不规则，数量稀疏，体积明显变大，排列紊乱，细胞核模糊；与模型组比较，芪灵组海马CA1区、CA3区细胞形态相对规则，细胞数量相对较多，排列相对齐整，细胞体积相对正常，细胞核较清晰。透射电镜显示：与正常组比较，模型组大鼠海马区神经细胞形态不规则，线粒体结构损伤严重，细胞自噬的表征数量较为丰富；与模型组比较，芪灵组神经细胞形态相对规则，线粒体损伤相对轻微，细胞自噬的表征数量较少。Western blot与qPCR实验提示：与正常组比较，模型组大鼠的Ulk1、Beclin1、LC3-II蛋白和mRNA的表达增加（P<0.05），P62蛋白和mRNA的表达减少（P<0.05）；与模型组比较，芪灵组大鼠的Ulk1、Beclin1、LC3-II蛋白和mRNA的表达减少（P<0.05），P62蛋白和mRNA的表达增加（P<0.05）。IHC实验提示：与正常组比较，模型组大鼠海马CA3区Beclin1表达增加（P<0.05）；与模型组比较，芪灵组大鼠CA3区Beclin1表达减少（P<0.05）。结论 CUMS联合孤养诱导的抑郁模型大鼠海马神经元CA1区、CA3区首先出现损伤性改变，CA3区可能首先出现自噬异常激活；芪灵扶正清解方能改善抑郁模型大鼠的行为学指标，对其海马神经细胞具有一定的神经保护作用，其抗抑郁机制可能与调节海马细胞异常自噬有关。     

玉女煎治疗糖尿病肾病的网络药理学研究及实验验证

目的 利用网络药理学技术结合动物实验验证，探讨玉女煎治疗糖尿病肾病可能的作用靶点与作用机制。方法 从基因表达综合数据库（GEO）中获得人糖尿病肾病的差异基因；通过TCMSP、HERB和TCMID数据库搜集玉女煎活性成分及其对应的作用靶点。将获得的差异基因与玉女煎的作用靶点进行交集分析获得共同靶点，并对共同靶点进行蛋白互作（PPI），获取玉女煎作用的核心靶点。构建“玉女煎活性成分-共同靶点”网络，获取玉女煎的关键活性成分。通过KEGG富集分析，获取玉女煎作用的核心基因。将玉女煎中关键的活性成分和核心靶点及核心基因进行分子对接。以自发性2型糖尿病大鼠（GK大鼠）肾脏为研究对象，蛋白印迹检测网络药理学及分子对接预测的信号通路相关蛋白的表达情况。结果 通过GEO基因芯片差异分析，获得了1 434个糖尿病肾病的差异基因。从数据库中筛选了37个玉女煎活性成分，共对应419个靶点。通过交集分析共获得47个共同靶点。PPI互作网络拓扑分析可得核心靶点血管细胞黏附分子1(VCAM1)，通过网络分析玉女煎关键活性成分20个。KEGG结果可知玉女煎作用的核心基因为上皮生长因子（EGF）、血管内皮生长因子（V...