Ad-METH1对培养的内皮细胞分泌活性的影响

目的：研究基因重组血管抑制剂Ad-METH1（metalloprotease and thrombospondin1）对培养的内皮细胞分泌活性的影响,探讨血管生成抑制防治增生性瘢痕的可能机制。方法：制备重组血管抑制剂Ad-METH1,转染培养的人脐静脉内皮细胞,通过放射免疫分析法及酶联免疫分析法研究Ad-METH1对内皮细胞分泌内皮素-1（endothelin-1,ET-1）及碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）的影响。结果：基因转染后24h内皮细胞ET-1、bFGF分泌受到明显抑制。结论：Ad-METH1对内皮细胞ET-1、bFGF分泌活性有影响,此是其早期参与抑制增生性瘢痕形成的可能机制之一。     

胰岛素对大鼠血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

目的　探讨胰岛素对血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响 .方法　体外进行大鼠血管平滑肌细胞的培养 ,以 5～ 10代细胞为实验对象 ,随机分成空白对照组和胰岛素组 ,胰岛素组又按浓度 1× 10 - 9、1× 10 - 8、1× 10 - 7和 1× 10 - 6 mol· L- 1分为 4小组 ,在加药后 2 4 h、4 8h和 72 h用 MTT法分析细胞增殖活力 ,免疫细胞化学观察细胞核增殖抗原 (PCNA)的表达 ,用末端脱氧核苷酸转移酶介导的 d UTP缺口末端标记法检测 H2 O2 诱导的细胞凋亡 .结果　加药 4 8h后 ,1× 10 - 9mol· L- 1胰岛素组的 MMT A值 (0 .4 2± 0 .0 4 )高于空白组(0 .30± 0 .0 2 ) ,P<0 .0 5 ,低于 1× 10 - 6 mol· L- 1 胰岛素组(0 .5 2± 0 .0 5 ) ,P<0 .0 5 ;1× 10 - 9mol·L- 1胰岛素作用 4 8h后细胞的 MMT A值比空白组增加 4 0 % ,高于 2 4 h细胞的MMT A值增加率 (2 7% ) ,P<0 . 0 5 ;1× 10 - 9～ 1× 10 - 6mol· L- 1 胰岛素作用 4 8h后细胞 PCNA的表达率 (5 0 %～80 % )均高于空白对照组的 (30 % ) P<0 .0 5 ;加药 2 4 h后 ,1× 10 - 6 mol· L- 1胰岛素组细胞凋亡率 (30 % )低于空白组(70 % ) P<0 .0 5 .结论　胰岛素有明显促 VSMC(vascularsmooth m uscle cells)增殖的作用 ,并且这种作用时间和浓度依赖性 ;同时胰岛素     

内皮祖细胞和去细胞猪主动脉瓣构建组织工程瓣膜的研究

目的将内皮祖细胞(EPCs)诱导分化为内皮细胞后种植在去细胞猪主动脉瓣膜(APV)上,以期为组织工程瓣膜(TEHV)的研制提供一个新的思路。方法采用去垢剂联合胰蛋白酶法去除猪主动脉瓣膜细胞。采用密度梯度离心法从羊骨髓中分离出EPCs,并诱导分化后,免疫组织化学染色鉴定。将诱导分化得到内皮细胞种植到APV上。采用光镜和电镜检测猪主动脉瓣膜的去细胞效果。对内皮细胞在APV上的生长效果进行观察。结果猪主动脉瓣内的细胞完全去除。EPCs经定向诱导后,具有表达CD-31,CD-34,von Willebrand因子等内皮细胞特征。诱导分化后的EPCs可以在APV表面黏附生长,并且表达CD-31和yon Willebrand因子。结论EPCs可以定向诱导分化为内皮细胞并可以在APV上种植生长。     

不同试剂脱除猪胸主动脉壁细胞的对比研究

目的:用不同方法去除猪胸主动脉壁细胞,并比较去细胞效果,为组织工程瓣膜或带瓣管道提供良好的实验材料。方法:采用十二烷基硫酸钠、胆脂酸钠、曲拉通（TritonX100）制备猪胸主动脉脱细胞基质。将实验分为十二烷基硫酸钠组、胆脂酸钠、曲拉通组和空白对照组。标本进行大体、光镜、电镜观察,力学性能的检测并做比较。结果:胆脂酸钠无法完全脱除主动脉壁内细胞,十二烷基硫酸钠和曲拉通都能完全脱除猪胸主动脉细胞,曲拉通较好地保持了胶原纤维和弹性纤维的原有排列和分布,并有较好的力学性能。后两者脱细胞时间无显著差别。结论:曲拉通可以成功用于制备大血管脱细胞基质,为组织工程瓣膜或带瓣管道的研究提供材料。     

猪主动脉瓣去细胞基质的制备

目的完全去除猪主动脉瓣细胞,取得良好的去细胞支架材料。方法用5 g/L胰酶对标本中的某些基质和细胞加以消化后,再应用不同去垢剂（十二烷基硫酸钠、脱氧胆脂酸钠、Triton X-100）加以洗脱,结合溶液渗透压改变等去除猪主动脉瓣细胞;标本进行大体、光镜、电镜观察和热皱缩温度的检测。结果胆脂酸钠无法完全脱除猪主动脉瓣细胞,十二烷基硫酸钠和曲拉通均可完全去除猪主动脉瓣细胞,Triton X-100组的主动脉瓣胶原纤维和弹性纤维得以较好保持。结论Triton X-100可以成功脱除猪主动脉瓣细胞,为组织工程瓣膜的研究提供材料。     

99mTc-HL91显像对乳腺癌的诊断价值

目的:探讨99mTc-HL91乏氧显像对乳腺癌的鉴别诊断的临床价值。方法:51例乳腺包块患者行99mTc-HL91早期(1h)、延迟(4h)平面显像和延迟(4h)断层融合显像,利用计算机感兴趣区(ROI)技术,计算靶/非靶比值(T/TN)。结果:恶性组在1h、4h平面和4h断层图像上T/TN值分别为1.68±0.16、1.85±0.23、2.28±0.49,良性组为1.15±0.18、1.23±0.25、1.43±0.37,良恶性组之间均有显著的差异性(P<0.01);恶性组4h平面T/TN值明显高于1h T/TN值(P<0.01),而良性组增高不明显(P>0.05);以恶性组延迟(4h)断层显像T/TN值-x-1s为截断点,99mTc-HL91对乳腺癌诊断的灵敏度、特异度、准确度分别为93.55%(29/31)、80.00%(16/20)、88.24%(45/51),以良性组延迟(4h)断层显像T/TN值-x 1s为截断点,99mTc-HL91对乳腺癌诊断的灵敏度、特异度、准确度分别为93.75%(30/32)、84.21%(16/19)9、0.20%(46/51)。结论:99mTc-HL91乏氧显像对原发性乳腺癌的诊断具有较高的灵敏度和特异度,具有一定的临床应用价值,而且能提供乳腺癌的氧态信息,从而为制定治疗方案提供依据。     

生化标本检验前质量控制

完整的实验室质量控制包括检验前质量控制、检验中质量控制、检验后质量控制。然而,长期以来,大多数实验室只重视检验过程中的质量控制,而忽视检验前质量控制,加上与     

不同试剂脱除猪主动脉瓣细胞的对比研究

目的 用不同方法去除猪主动脉瓣的细胞并比较效果，为组织工程瓣膜提供良好的实验材料。方法 采用十二烷基硫酸钠（SDS）、脱氧胆酯酸钠（SD）、曲拉通（Triton）X-100制备猪主动脉瓣脱细胞基质。标本进行大体、光镜、电镜观察，DNA提取、力学性能的检测并比较。结果 SD无法完全脱除主动脉瓣瓣根内的细胞。TritonX-100和SDS可以完全脱除瓣膜细胞。TritonX-100较好的保持了主动脉瓣胶原纤维和弹性纤维的原有排列和分布，并有较好的力学性能。而SDS对瓣叶和瓣根血管壁中的纤维支架都造成了一定的损伤。SDS和TritonX-100脱细胞时间无明显差别。结论 TritonX-100可以成功脱除猪主动脉瓣细胞，并较好的保持了主动脉瓣的结构和力学性能。     

动态种植法提高在去细胞猪瓣支架上种植内皮细胞效率和均匀性的研究

目的:尝试使用简单的动态种植方法来提高内皮细胞在去细胞牛心包支架上的种植效率和均匀性,以更有效地构建组织工程瓣膜.方法:采用胰酶-去垢剂法制备去细胞牛心包. 内皮细胞以下列方式在去细胞牛心包支架进行种植和培养: ①振荡种植振荡培养(OO);②振荡种植静止培养(OS);③静止种植静止培养(SS). 定期取样品进行电镜、组织学检测及细胞计数分析. 结果:细胞加入24 h后振荡种植的样品比静止种植的样品细胞在支架内分布更为均匀,同时振荡种植的样品细胞贴壁率[ (36±3) %]高于静止种植的样品细胞贴壁率[(21±2)%, P<0.05]. 振荡种植振荡培养的样品在培养过程中细胞脱离支架而死亡,因此放弃了这些样品的继续培养. 振荡种植静止培养的样品和静止种植静止培养的样品细胞一直保持正常的伸展状态. 在培养过程中支架上的活细胞总数振荡种植静止培养的样品一直高于静止种植静止培养的样品. 结论:采取振荡种植的方式种植细胞可明显提高内皮细胞在三维支架上种植的效率和分布均匀性.