动物慢性脑缺血模型的研究现状

慢性脑缺血主要由于全脑血流供应减少,从而发生脑组织不同程度病理损害,出现记忆力下降等一系列症状,引起学者广泛关注。对慢性脑缺血病理机制及损伤后修复的研究更是当今神经科学研究的热点之一。本文通过对近年来国内外研究进行总结,就其模型制作、评价方法及常见问题予以综述,为慢性脑缺血的进一步研究提供参考资料。     

大鼠慢性脑缺血认知、情绪及小胶质细胞的变化

目的：利用大鼠双侧颈总动脉永久性结扎（permanent,bilateral common carotid artery occlusion,BCCA）方法制作慢性脑缺血模型,观察42 d 与56 d 两时间点在认知、情绪、组织状态的差异及小胶质细胞状态改变,在模型制作时间上为慢性脑缺血实验研究提供依据。方法雄性 SD 大鼠采用抽签法随机分为42 d-假手术组（42 d-Sham）、42 d-模型组（42 d-Model）、56 d-假手术组（56 d-Sham）及56 d-模型组（56 d-Model）。采用 Morris 水迷宫、新旧物体识别和旷场试验3种方法评价大鼠认知能力和情绪, HE 染色观察大鼠海马组织状态改变,用脑组织冰冻切片 Iba1免疫荧光染色观察各组海马及皮质小胶质细胞的活化状态。结果Morris 水迷宫试验结果显示,与 Sham 组相比,Model 组大鼠出现认知障碍,56 d 较42 d 下降更为显著,表现为逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少。新旧物体识别试验结果表明,Model 组大鼠认知能力下降,表现为新旧物体分辨指数下降,新物体探索时间减少,但42 d 与56 d 手术组及 Sham 组之间差异无统计学意义。旷场试验结果提示,Model 组大鼠出现焦虑样行为,表现为直立次数和穿格次数明显增多。 HE 染色结果提示 BCCA 模型42 d 及56 d 在双侧海马均未出现明显的组织状态改变。免疫荧光结果显示,Iba1的表达在 Model 组与 Sham 组差异有统计学意义,Model 组海马与皮质中小胶质细胞数量均较多,染色加深,胞体增大,突起增多、变短,呈“阿米巴样”。结论 BCCA 法制作的大鼠慢性脑缺血模型42 d 即出现认知能力下降,小胶质细胞出现活化改变,提示42 d 即可作为慢性脑缺血动物实验模型制作的备选时间点。56 d 较42 d 认知能力下降更为显著,提示随时间延长,改变更为显著。但42 d 及56 d 均未出现 HE 染色可观察到的组织状态学改变。     

氢氯噻嗪长期联用卡托普利对高血压患者肾素-血管紧张素-醛固酮系统及生化指标的影响

目的 探讨氢氯噻嗪(HCTZ)与卡托普利长期联合治疗对高血压患者肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)活性及生化指标的影响.方法 在9所开滦矿区医院筛选出轻、中度高血压患者,在2周洗脱期和6周HCTZ(12.5 mg,1次/d)导入期后加服卡托普利(25 mg,2次/d),治疗5 a.于洗脱期末、导入期末、治疗2 a和5 a时检测RAAS活性,每年检测血生化指标,比较各时间点RAAS活性变化与生化指标变化.结果 6周HCTZ导入期末,患者血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和醛固酮(ALD)浓度较基线值升高,差别有统计学意义(P＜0.01),血钠浓度下降(P＜0.01);治疗2 a时血浆AngⅡ、ALD和血钠浓度已恢复至基线水平,血糖浓度下降(P＜0.01);治疗5 a后,血钾浓度下降(P＜0.01),而血糖、血钠、AngⅡ、ALD浓度变化与基线值比较,差别无统计学意义(P＞0.05).结论 高血压患者长期合用HCTZ与卡托普利治疗后,RAAS活性可恢复至治疗前水平,对血糖浓度影响不大,而血钾降低.     

天葛定眩颗粒对椎-基底动脉供血不足性眩晕的疗效观察

目的：观察天葛定眩颗粒对椎-基底动脉供血不足性眩晕的疗效。方法：纳入53例椎-基底动脉供血不足性眩晕患者,给予天葛定眩颗粒治疗2周,通过治疗前后中医症状分值量表、欧洲眩晕量表及国际DHI眩晕障碍量表分值比较,明确该方的临床疗效。结果：治疗前后中医症状分值、欧洲眩晕量表及DHI眩晕障碍量表分值比较有统计学意义（P<0.01）。结论：天葛定眩颗粒可明显改善患者眩晕症状,减少发作频率及眩晕程度,提高患者的生活质量。     

白细胞介素-1β基因多态性与汉族人群慢性阻塞性肺疾病的相关性

目的探讨白细胞介素-1β(IL-1β)基因-511C/T、-31 C/T、+3954 C/T位点多态性与汉族人群慢性阻塞性肺疾病(COPD)易感性之间的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,检测河北省唐山地区汉族162例COPD稳定期患者和162例对照组人群的IL-1β基因-511、-31、+3954位点的基因型和等位基因及其分布。结果 (1)COPD组IL-1β基因-511位点CC、CT、TT基因型频率分别为19.75%、62.96%、17.28%,对照组分别为22.22%、61.11%、16.67%,两组比较,差异无统计学意义(P>0.05);COPD组IL-1β基因-31位点CC、CT、TT基因型频率分别为19.75%、62.35%、17.90%,对照组分别为22.22%、61.11%、16.67%,两组比较,差异无统计学意义(P>0.05);COPD组IL-1β基因+3954位点CC、CT、TT基因型频率分别为87.04%、12.96%、0.00%,对照组分别为90.12%、9.26%、0.62%,两组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。COPD组IL-1β基因-511位点C、T等位基因频率分别为51.23%和48.77%,对照组为52.78%和47.22%,两组比较,差异无统计学意义(P>0.05);COPD组IL-1β基因-31位点C、T等位基因频率分别为50.93%和49.07%,对照组为52.78%和47.22%,两组比较,差异无统计学意义(P>0.05);COPD组IL-1β基因+3954位点C、T等位基因频率分别为93.52%和6.48%,对照组为94.75%和5.25%,两组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)COPD组IL-1β基因-31C:+3954T单体型频率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)COPD组血清IL-1β水平([3.96±0.35)ng/ml]明显高于对照组([2.69±0.14)ng/ml],差异有统计学意义(P<0.01)。结论 IL-1β基因-511、-31、+3954位点C/T多态性与COPD无关,IL-1β基因-31C:+3954T单体型频率可能与汉族人群COPD的发病有关联。     

不同血管紧张素转换酶基因型高血压患者治疗依从性差异对终点事件的影响

目的探讨长期降压治疗的依从性差异对不同血管紧张素转换酶(ACE)基因型高血压患者临床终点事件的影响。方法于2002年6月—2003年5月选择轻、中度高血压患者853例,入选患者经安慰剂洗脱2周和氢氯噻嗪(HCTZ)导入6周后随机给予HCTZ 12.5mg/d或HCTZ 12.5mg/d+螺内酯20mg/d或HCTZ 12.5mg/d+卡托普利25mg2次/d。治疗期间每月随访1次,监测血压,记录终点事件,每年进行生化指标检测,随访6年。根据患者的治疗依从性分为依从组和非依从组,比较不同依从组各基因型患者临床终点事件发生率。结果第6年时依从组发生临床终点事件20例(致死性2例,非致死性18例),低于非依从组61例(致死性15例,非致死性46例),差异有统计学意义(P0.01)。依从组各基因型间累积发生事件率差别无统计学意义;而非依从组DD基因型的累积发生事件率最高(25.7%),ID型为15.4%,Ⅱ型为12.8%,且各基因型间发生率差异有统计学意义(P0.05)。结论 ACE基因DD基因型是治疗依从性不良高血压患者发生临床心脑事件的危险因素,而良好的治疗依从性可减轻或消除DD基因型对心脑事件的不利影响。     

多药耐药菌感染分析及控制对策

目的 为了解多药耐药菌耐药性变化趋势,以达到预防和控制多药耐药菌感染的目的.方法 对某院2009年11月-2011年8月住院患者多药耐药菌感染的变迁进行回顾性调查分析,针对不同感染部位分别采取痰、咽拭子、尿、分泌物、引流液等标本进行细菌培养.结果 35 016例住院患者送检微生物标本16 802份,送检率47.98％；分离病原菌5489株,检出率32.67％,其中多药耐药菌检出663株,占12.08％；住院患者多药耐药菌感染率为1.89％;663株多药耐药菌中革兰阴性菌569株占85.82％,以产ESBLs大肠埃希菌、产ESBLs肺炎克雷伯菌、耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌为主,分别占42.99％、21.27％、11.01％；革兰阳性菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌94株,占14.18％；标本类型以痰标本为主,占51.28％,其次是尿液标本,占20.21％;多药耐药菌感染患者最多的科室是ICU,占24.59％、其次是神经外科、泌尿外科、神经内科和呼吸科,分别占18.10％、9.50％、9.05％、6.79％.结论 为有效控制多药耐药菌的产生和流行,保障患者安全,医院建筑布局和工作流程要符合感染控制的要求；职能科室应加强医务人员多药耐药菌知识的培训、监测和消毒隔离工作的督导检查；微生物实验室要加强和临床的沟通合作,做到早发现、早诊断、早隔离；临床科室对多药耐药菌感染患者要严格执行无菌操作、手卫生、合理使用抗菌药物.     

溶栓治疗肺血栓栓塞症的临床疗效及其影响其疗效的因素

目的观察分析溶栓治疗肺血栓栓塞症的临床疗效及其影响其疗效的因素。方法选取入住河北省唐山市开滦总医院呼吸科和心内科、CCU等科室(在2006年2月-2014年2月)收治的300例肺血栓栓塞症患者,按照不同治疗方法分为对照组(258例,应用抗凝治疗方法)和实验组(42例,应用溶栓治疗方法)。采用统计学分析两组肺血栓栓塞症患者的临床治疗效果以及治疗前后的凝血功能指标(纤维蛋白原、凝血酶原时间、部分凝血活酶时间等),采用Logistic回归模型分析影响血管再通率的因素。结果两组肺血栓栓塞症患者治疗前凝血功能指标(纤维蛋白原、凝血酶原时间、部分凝血活酶时间等)比较未有统计学差异(P0.05),实验组肺血栓栓塞症患者治疗后凝血功能指标(纤维蛋白原、凝血酶原时间、部分凝血活酶时间等)显著优于对照组(P0.05);实验组肺血栓栓塞症患者的临床治疗总有效率(95.24%,40/42)显著高于对照组(67.83%,175/258)(P0.05); Logistic回归模型分析影响血管再通率的因素有溶栓药物、时间窗、面积大小、栓塞部位、红细胞压积、年龄、基础疾病等,各组数据比较差异有统计学意义(P0.05)。结论溶栓治疗肺血栓栓塞症的临床疗效显著高于抗凝治疗。     

络瘀通胶囊对大鼠脑缺血-再灌注损伤的作用

目的观察并探讨络瘀通胶囊对大鼠脑缺血-再灌注后神经功能的影响及其保护机制。方法采用改良Longa法制备大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,缺血1.5 h后进行再灌注。选取10只大鼠作为假手术组,将40只造模成功的雄性SD大鼠按照随机数字表法分为4组,每组10只:模型组、络瘀通中剂量组(LYTM组)、络瘀通高剂量组(LYTH组)及胞磷胆碱钠组(CS组)。分别于造模后3 d及7 d采用12分评分及前肢踩空实验评价大鼠神经功能,应用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测造模3 d后大鼠缺血侧及假手术组同侧脑组织中脑源性神经营养因子(BDNF)、碱性成纤维生长因子(b-FGF)及磷酸化蛋白激酶/蛋白激酶(p-AKT/AKT)的表达,及造模后7 d同侧脑组织中Caspase-12的表达并进行组间比较。结果 (1)神经功能评分:造模后3 d各组12分评分及前肢踩空实验评分差异均无统计学意义(均P0.05);造模后7 d,LYTM组、LYTH组、CS组较模型组均明显改善(均P0.05)。(2)Western blot结果显示:1模型组BDNF及b-FGF表达明显少于假手术组(均P0.05);与模型组比较,LYTM组、LYTH组、CS组均可上调BDNF和b-FGF表达,以LYTH组作用最明显(P0.01)。2与假手术组比较,模型组p-AKT/AKT表达明显减少(P0.05);与模型组比较,LYTM组、LYTH组、CS组p-AKT/AKT表达增加,以LYTH组和CS组明显,差异均有统计学意义(均P0.05)。3在Caspase-12的表达中,模型组裂解后Caspase-12表达较假手术组明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。与模型组比较,LYTM组、LYTH组Caspase-12前体(pro Caspase-12)和裂解后Caspase-12表达有减少趋势,但差异无统计学意义(均P0.05);CS组Caspase-12前体和裂解后Caspase-12表达水平明显低于模型组(P0.05)。结论络瘀通胶囊可通过促进神经元存活及再生对大鼠脑缺血-再灌注性损伤起到保护作用,且该保护作用也可能与抑制神经细胞凋亡有关。