逆转录病毒介导的人卵巢癌 p53基因治疗体外及小鼠体内实验研究

目的 :评价人卵巢癌的 p5 3基因治疗效果。 方法 :用携带人野生型 p5 3的逆转录病毒转导 p5 3蛋白表达缺如的人卵巢癌细胞系SK OV 3,通过体外及小鼠体内实验研究转基因的表达及对肿瘤的抑制作用。结果 :逆转录病毒介导的 p5 3基因能够在体外及小鼠体内人卵巢癌细胞SK OV 3中表达 ,并对人卵巢癌生长有抑制作用。体外抑制率为 5 7%～ 88% ;对体内肿瘤抑制率为 40 %。结论 :逆转录病毒介导的外源野生型p5 3能够抑制人卵巢癌生长 ,增加病毒滴度将进一步提高体内治疗效果     

逆转录病毒载体介导的bcl-2反义RNA促进胃癌MGC-803细胞凋亡

bcl-2是Tsujimoto在Ⅱ型B细胞淋巴瘤中发现的一种基因,其过度表达能抑制撤退生长因子、射线、热休克、化疗药物、病毒及促凋亡基因等多种因素诱导的细胞凋亡 .bcl-2蛋白高表达赋予肿瘤细胞对多种化疗药物的抗性,导致化疗失败或复发.逆转bcl -2的表达可能提高化疗效果.我们将bcl-2的编码序列反向插入逆转录病毒表达载体中并转导实体瘤胃癌细胞株MGC-803,观察bcl-2反义序列对实体瘤肿瘤细胞的作用.     

不同启动子指导的HSV1-sr39TK/GCV系统对小鼠淋巴细胞的敏感性研究

目的观察慢病毒载体中不同启动子指导的突变型单纯疱疹病毒1型胸苷激酶(HSV1-sr39TK)基因在小鼠T淋巴细胞内的表达差异,并进一步比较对丙氧鸟苷(ganciclovir,GCV)的敏感性。方法用亚克隆技术将PCR扩增的HSV1-sr39TK基因分别连接至慢病毒载体不同启动子后,然后在HSV1-sr39TK基因后以内部核糖体进入位点(internal ribosome entry sites,IRES)连接绿色荧光蛋白(green fluorescent pro-tein,GFP)报告基因;采用三质粒包装系统包装病毒,将病毒感染刀豆蛋白A(concanavalin,ConA)激活的小鼠淋巴细胞,分别用流式细胞术、RT-PCR法鉴定HSV1-sr39TK和GFP基因在小鼠淋巴细胞的表达,用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法观察感染不同病毒的淋巴细胞对前体药物GCV的敏感性。结果不同启动子指导的HSV1-sr39TK及GFP基因均可在小鼠淋巴细胞表达,巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)启动子驱动表达能力最强,磷酸甘油激酶(phosphoglycerokinase,PGK)启动子最弱。感染含CMV启动子病毒的淋巴细胞对GCV的IC50值最小。结论在小鼠淋巴细胞内CMV启动子驱动的慢病毒载体HSV1-sr39TK基因表达最强,对前体药物GCV敏感性最高。     

褐家鼠传播的流行性出血热393例临床分析

本文报导了1982年11月～1983年4月沛县暴发流行的由褐家鼠传播的出血热393例临床分型、临床特征、治疗效果及转归。临床上以轻型多见,越期病例较多(约占半数以上),预后良好,病死率低。     

流行性出血热患者血浆血栓素B_2和6—酮—前列腺素F_(1α)的测定

测定了37例流行性出血热患者血浆血栓素B_2(TXB_2)和6-酮-前列腺素F_(1α)水平,发现发热期和少尿期患者及有重度出血者血浆TXB_2/6-酮-PGF_(1α)(T/6)比值较正常对照明显降低,多尿、恢复期逐渐恢复正常。随病情加重,比值渐降低。上述改变有统计学意义。     

再生障碍性贫血外周血出现有核红细胞的临床意义探讨

观察396例再生障碍性贫血（AA）,28例外周血出现有核红细胞（Eb1）,重型再障（SAA）11例,慢性再障（CAA）17例。作者将Eb1（＋）AA与Eb1（－）AA病人临床特点和实验室指标进行比较,发现Eb1（＋）SAA较Eb1（－）SAA有更低的Hb值。腔道出血、败血症的发生率及死亡率较高,Eb1（＋）CAA较Eb1（－）CAA有更高的网织红计数（Ret）,骨髓多为增生活跃,红系比例偏高,治愈率亦高。并对Eb1在AA中出现的机理作了探讨。     

慢病毒载体介导不同内部启动子驱动绿色荧光蛋白表达效率

目的在人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)慢病毒载体中引入三种不同的内部启动子来驱动绿色荧光蛋白基因(GFP)的表达,初步比较内部启动子的效率。方法慢病毒载体三质粒系统中,转移质粒的构建采用限制性内切酶酶切、T4DNA连接酶连接方法和内切酶酶切鉴定。磷酸钙沉淀法将三质粒共转染293T包装细胞。病毒滴度的测定采用6孔板培养感染细胞,荧光显微镜计数GFP阳性细胞。通过荧光显微镜观察绿色荧光的表达情况判断启动子的效率。结果构建了含PPT元件和含不同内部启动子和GFP的质粒。转染293T细胞后均观察到较强的绿色荧光。表达荧光的293T细胞数以巨细胞病毒(CMV)启动子最多,肝细胞特异性启动子(LSP)较少,泛醌启动子(PUB)介于两者之间。CMV为内部启动子的慢病毒载体滴度5×106I U/ml,其他二种启动子的滴度(1~2)×105I U/ml。结论在所选择的三种内部启动子中,CMV启动子的效率最高,LSP较强,PUB介于两者之间。     

急性淋巴细胞性白血病IL-3R α基因表达的意义

目的探讨白细胞介素-3受体α亚基（IL-3Rα）在急性淋巴细胞性白血病（ALL）中的表达及意义。方法采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测54例ALL患者IL-3Rα mRNA的表达。结果①10例正常人和12例ALL缓解患者未检测到IL-3Rα的表达。42例初治和复发的ALL患者中IL-3Ra阳性表达12例，占28．57％。其中13例T—ALL患者未检测到IL-3Rα的表达，而B—ALL患者IL-3Ra的表达率为41．38％。②ALL患者IL-3Rα的阳性表达与外周血白细胞计数、骨髓中原始细胞比例及CD34阳性表达有关（P〈0．05）。③ALL患者中IL-3Rα阳性表达的患者CR率低于阴性者（P〈0．05）。结论IL-3Rα在ALL发生发展中起一定作用，检测IL-3Rα有助于ALL的T、B两型的鉴别，IL-3Rα基因表达可能是B—ALL的一个不良预后因素。     

急性白血病红细胞与白细胞免疫调节

目的探讨急性白血病患者红细胞免疫调节和白细胞免疫的变化及其相互关系。方法检测急性白血病红细胞免疫调节因子、白细胞免疫指标变化，对两者相互关系及化学治疗前后变化作比较。结果急性白血病红细胞ＣＲ１活性下降，ＣＲ１抑制因子增高，ＣＲ１促进因子降低；化疗后缓解者上述指标均有不同程度恢复，未缓解者恢复不明显；白细胞ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ１９比正常低。结论急性白血病红细胞与白细胞免疫的研究对加深急性白血病时免疫功能的认识有一定意义。     

Evans综合征后发生非霍奇金淋巴瘤1例并文献复习

报道Evans综合征后发生非霍奇金淋巴瘤（NHL）1例。该患者乙肝病毒携带病史7年，乙肝后肝硬化病史1年余，确诊为Evans综合征后经糖皮质激素、COP方案治疗，最终以脾切除治疗缓解。2年后出现颈部首发的淋巴结肿大，胸部CT示两肺结节状阴影及纵隔淋巴结肿大，病理检查和免疫组化证实为弥漫大B细胞淋巴瘤，采用CHOP方案化疗后淋巴结明显缩小。复习相关文献并结合本例报道发现Evans综合征伴发NHL罕见，发病无明显性别差异，患者年龄较大，部位多以结外为主，病理分型B细胞型较多，两病发病间隔时间较长，发病机制可能与免疫异常和（或）化疗免疫抑制剂应用、免疫监视失控有关。