新生期缺血缺氧脑损伤大鼠早期认知功能的实验研究

目的探讨不同日龄的新生大鼠缺血缺氧脑损伤后早期认知功能的改变。 方法选取SD新生大鼠46只,按照后期测试时间的不同,分为21日龄的大鼠23只（21日龄组）,31日龄的大鼠23只（31日龄组）,2组按照随机数字标法根据是否制备缺氧缺血模型分成21日龄造模组12只,21日龄假手术组11只,31日龄造模组12只,31日龄假手术组11只。采用改良Rice模型方法将21日龄造模组和31日龄造模组制成新生期大鼠早期认知功能障碍模型,假手术组均模拟皮肤切开分离颈总动脉,但不结扎,无缺氧。4组大鼠造模成功后采用Morris水迷宫测试空间定位学习能力及空间记忆水平。结束水迷宫测试后断头取脑,进行电镜及尼氏染色观察脑组织细胞形态及尼氏小体定量 神经细胞活力分析。 结果经Morris水迷宫实验发现,21日龄造模组和21日龄假手术组平均逃避潜伏期均明显落后于31日龄造模组和31日龄假手术组,差异有统计学意义（P<0.05）,另2个造模组平均逃避潜伏期亦明显落后于相应的假手术组,差异有统计学意义（P<0.05）。4组大鼠的平均穿台次数和平均台周Ⅰ区活动时间比较,差异均无统计学意义（P&rt;0.05）,而21日龄造模组平均台周Ⅰ区活动路程明显低于21日龄假手术组,差异有统计学意义（P<0.05）,同时21日龄2组大鼠的平均台周Ⅰ区活动路程明显低于相应的31日龄2组大鼠,差异有统计学意义（P<0.05）。31日龄造模组平均台周Ⅰ区活动路程亦明显低于31日龄假手术组,差异有统计学意义（P<0.05）。电镜观察显示,2个假手术组缺血侧的海马组织神经细胞结构正常,突触前膜内少见线粒体,2个造模组神经细胞有不同程度核固缩表现及内质网扩张等,海马突触内见较多线粒体。经尼氏小体定量－神经细胞活力分析发现,2个造模组的右大脑皮质活力较相应的假手术组显著下降,差异有统计学意义（P<0.01）;31日龄组均较相应21日龄组升高（P<0.01）。 结论早期缺血缺氧脑损伤大鼠存在认知功能障碍,31日龄大鼠的空间定位学习及空间记忆明显优于21日龄大鼠,可能与日龄的增加有关。     

芹菜素对大鼠脑缺血再灌注NF—κBiNOS动态表达的影响

目的:探讨芹菜素对局灶性脑缺血再灌注损伤后核转录因子-κB(NF-κB)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)动态表达的影响。方法:将大鼠135只随机分为假手术组(S组)、模型组(M组)及芹菜素组(A组),后2组按再灌注时间不同又分为再灌注24h、48h、72h和7天各4小组,总共9小组,每组15只大鼠。采用线栓法制备大鼠左侧大脑中动脉缺血(1.5h)再灌注模型。光镜电镜观察脑组织病理形态改变,免疫组织化学法检测NF-κBp65蛋白表达,比色法检测iNOS活性。结果:大鼠脑缺血再灌注后M组各时间点NF-κBp65表达增多(P<0.01)、iNOS活性增高(P<0.01)。芹菜素在脑缺血再灌注后72h和7天有下调NF-κBp65的表达(P<0.05),降低iNOS活性的作用(P<0.05)。M组脑缺血再灌注后各个时间点皮层和海马细胞肿胀、细胞间质水肿,有空泡形成,尤以缺血再灌注后48h最为明显,而神经细胞均有核固缩、碎裂、溶解,以缺血再灌注后24h为著。芹菜素有减轻脑缺血再灌注后组织细胞水肿的作用,对神经细胞超微结构改变不明显。结论:芹菜素的神经保护作用可能与抑制大鼠缺血再灌注后脑组织中NF-κB的表达及iNOS活性有关。     

芹菜素对大鼠急性脑缺血损伤的干预作用及机制研究

目的 探讨芹菜素在大鼠急性局灶性脑缺血/再灌注(I/R)损伤中的抗炎作用及意义.方法 将SD大鼠随机分为假手术组、模型组和芹菜素组,后两组按再灌注时间分为0.5 h组和4 h组,每组8只.采用改良大脑中动脉线栓法建立急性局灶性大鼠脑I/R模型;分别用干湿法和甲酰胺浸泡法定量测定各组大鼠脑组织含水量及伊文思蓝(EB)含量,用酶联免疫吸附法(ELISA)和比色法测定脑组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)含量以及诱生型一氧化氮合酶(iNOS)活性.结果 与假手术组比较,模型组大鼠脑组织含水量、EB含量及TNF-α、IL-1β含量、iNOS活性均显著升高,并与时间呈正相关(P<0.05或P<0.01).芹菜素组各时间点脑组织含水量、EB含量及TNF-α、IL-1β含量、iNOS活性均较模型组显著下降(P<0.05或P<0.01).结论 芹菜素对急性局灶性脑I/R损伤的保护作用可能与抑制TNF-α启动的炎症反应有关.     

婴儿神经学检查联合头颅MRI检测对脑瘫高危儿不良神经发育的预测价值

目的 探讨Hammersmith婴儿神经学检查（HINE）联合头颅MRI检测对脑瘫高危儿12月龄诊断脑瘫和运动发育迟缓的预测价值。 方法 选取矫正2～6月龄行HINE和头颅MRI检查的脑瘫高危儿45例,随访至矫正12月龄,最终完成随访共36例,采用Peabody运动发育量表(PDMS)对其运动发育程度进行评估,分为正常组（21例）、迟缓组（8例）和脑瘫组（7例）。根据头颅MRI检测Woodward白质评分法评价患儿的脑白质异常程度,计算2～6月龄HINE得分、12月龄HINE得分与头颅MRI脑白质异常程度之间的Spearman系数,计算2～6月龄HINE得分与脑瘫严重程度和迟缓严重程度之间的Spearman系数,计算单独使用HINE、头颅MRI及其联合使用与婴儿发育结局之间的Spearman系数。采用受试者工作特征曲线(ROC)描绘单独使用HINE、头颅MRI、HINE或头颅MRI异常、HINE且头颅MRI异常四个指标预测矫正12月龄时诊断脑瘫和迟缓的曲线下面积(AUC),并评价其预测价值。 结果 ①36例高危儿中,12例HINE得分预测为脑瘫;头颅MRI脑白质评分,中重度异常9例,轻度异常9例,无异常18例;随访至矫正12月龄,发育正常21例,运动发育迟缓8例（7例差,1例非常差）,脑瘫7例,其中脑瘫粗大运动功能分级系统（GMFCS）分级Ⅲ级2例,Ⅳ级4例,Ⅴ级1例。②2～6月HINE得分与脑瘫严重程度分级（r=-0.867,P＝0.012）、迟缓严重程度（r=-0.598,P＝0.000）之间均具有相关性,HINE得分越低其预后越差。③矫正2～6月龄HINE得分和12月龄HINE得分与头颅MRI的脑白质异常程度之间均具有相关性（r值分别为-0.790和-0.683,P值均为0.000）。④HINE、头颅MRI、HINE或头颅MRI异常、HINE且头颅MRI异常与脑瘫和迟缓结局均具有相关性（r值分别为0.644、0.772、0.572、0.839和0.781、0.783、0.714、0.944,P值均为0.000）;预测脑瘫和迟缓结局诊断的敏感性分别为100.0%、100.0%、100.0%、100.0%和93.3%、93.3%、100.0%、93.3%,特异性分别为82.8%、93.1%、79.3%、96.6%和85.7%、81.0%、71.4%、100.0%,AUC值分别为0.914、0.966、0.897、0.983和0.895、0.871、0.857、0.967（P值均为0.000）。 结论 HINE联合头颅MRI检测对脑瘫高危儿12月龄发育结局预测价值更高。     

温州市学龄期儿童孤独症谱系障碍的患病情况调查

目的探讨温州市学龄期儿童孤独症谱系障碍（ASD）的患病情况,为孤独症的三级预防工作提供现实参考依据。方法采用随机整群收样的方法,抽取温州市2个城区内户籍所在的6～12岁儿童共13987名,使用社会行为和沟通能力筛查量表（ASRS）问卷筛查出可疑ASD患儿,再运用精神障碍诊断与统计手册第5版（DSM-V）、孤独症诊断观察量表（ADOS）、孤独症诊断访谈量表（ADI-R）及韦氏儿童智力量表（WISC-R）对被试儿童进行诊断和评估,统计分析得出患病情况。结果（1）本样本患病率为1.78‰,确诊男21例,女4例,男女比例为5.25颐1;（2）多动症、智力发育障碍、癫痫及胃肠道功能障碍是ASD的主要共患病;其次,社交恐怖、恶劣心境、躁狂发作、广场恐怖、特定恐怖症、对立违抗障碍、睡眠障碍、离别性焦虑障碍、品行障碍及精神病性障碍等也是ASD的常见共患病;（3）困难抚养型气质、父母亲生育年龄大、孕期接触杀虫剂、儿童排便控制时间晚等是ASD患病的高危因素。结论温州市6～12岁学龄期儿童ASD患病率与国内外报道相当,应关注具有ASD发病高危因素的儿童,分析出的ASD患病相关因素可以为孕期保健工作和特殊教育工作者提供建设性意见。     

芹菜素对缺血缺氧脑损伤大鼠早期认知功能的影响

目的:探讨芹菜素对新生大鼠缺血缺氧脑损伤后早期认知功能的影响。方法:根据改良Rice模型建立新生大鼠缺血缺氧脑损伤模型,随机分为假手术组(Sham-operated,SH)、模型组(Model,M)、芹菜素干预组(Apigenin,A)和神经节苷脂GM1有效对照组(Ganglioside-GM1,GM1)。各组按后期测试的日龄不同又分为21日龄组和31日龄组,分别在Morris水迷宫中进行测试,测试结束后处死留取脑组织标本观察大鼠脑组织结构改变。结果:1.脑组织病理观察,(1)肉眼观:29只缺血缺氧脑损伤大鼠脑组织呈现明显的脑萎缩改变,约占51.8%(29/56)。假手术组大鼠无脑组织萎缩。(2)光镜观察:SH组的神经元细胞丰富且排列整齐有序,间质均匀;M组可见明显的胶质细胞增生,神经元排列不规则;A组和GM1组神经元细胞排列欠规则,较多见胶质细胞。(3)尼氏小体定量-神经细胞活力分析:M组、A组GM1组较相应SH组活力下降,有显著性差异(P0.01或P0.05);31日龄组较21日龄组升高,各组均有显著性差异(P0.01)。(4)海马组织电镜观察:SH组神经细胞结构正常,突触前膜内少见线粒体,其余各组神经细胞有不同程度核固缩表现及内质网扩张等,海马突触内见较多线粒体。2.Morris水迷宫实验,(1)空间定位(平均逃避潜伏期):M21组潜伏期较SH21组明显延长,空间定位学习能力差(P0.01);A21组潜伏期较M21组缩短(P0.05);GM1组潜伏期与M组比较差异无统计学意义(P0.05);31日龄组潜伏期较相应21日龄组缩短,差异有统计学意义(P0.01或P0.05)。(2)空间记忆:平均穿台次数:A21组较GM1-21组多,有显著性差异(P0.05);GM1-31组较GM1-21多,有显著性差异(P0.05)。平均台周Ⅰ区时间:A31组较A21组长(P0.05)。平均台周Ⅰ区路程:GM1-31组较GM1-21组长(P0.01)、A31组较A21组长(P0.05)。结论芹菜素可改善新生期缺血缺氧脑损伤后21日龄大鼠的空间定位学习能力。     

芹菜素对大鼠脑缺血再灌注损伤后的神经保护作用

目的 观察芹菜素对大鼠脑缺血不同时间再灌注损伤后丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）表达的影响,探讨芹菜素的神经保护作用,为脑缺血再灌注损伤的防治提供新药可能.方法 将大鼠72只随机分为假手术组（S组）、模型组（M组）及芹菜素组（A组）,后2组按再灌注时间不同又分为再灌注24、48、72h和7d各4亚组,总共9小组.每组8只大鼠.采用线栓法制备大鼠左侧大脑中动脉缺血（1.5h）再灌注模型.造模后按Zea Iorlga法评定神经功能缺损状况.观察至规定时间断头取脑,制备脑组织匀浆,用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法分别测定脑组织SOD活性和MDA含量.结果 与S组比较,M组在脑缺血再灌注后各时间点,MDA含量均明显升高（P〈0.05或0.01）,SOD活性均明显下降（P〈0.05或0.01）;M72h组MDA含量明显高于M24h和M7d组,差异有统计学意义（P〈0.05）.芹菜素干预后,脑组织MDA含量在脑缺血再灌注后48h和72h有所降低（P〈0.05）,而SOD活性在缺血再灌注后48、72h和7d有所增高（P〈0.05）.大鼠脑缺血再灌注后均出现神经功能缺损症状,M组在脑缺血再灌注7d神经行为学评分较之前各时间点均有明显改善,芹菜素在脑缺血再灌注后72h有改善神经功能的作用.大鼠脑缺血再灌注后24h和7d,神经行为学评分与MDA含量呈正相关关系（r=0.516,P=0.041;r=0.582,P=0.018）;与SOD活性呈负相关关系（r=-0.565,P=0.023;r=0.599,P=0.014）.结论 芹菜素对脑缺血再灌注后自由基损伤有一定保护作用.     

芹菜素对脑缺血再灌注大鼠神经功能恢复的影响及其作用机制分析

目的观察芹菜素对局灶性脑缺血再灌注大鼠神经功能的影响,并探讨其相关作用机制。 方法将90只大鼠随机分为假手术组、模型组及芹菜素组。采用线栓法将模型组和芹菜素组大鼠制成左侧大脑中动脉缺血再灌注（1.5 h）模型,假手术组大鼠在制模过程中不阻断大脑中动脉血流。芹菜素组大鼠于再灌注同时及其后每24 h腹腔注射芹菜素液,假手术组及模型组大鼠则在相同时间点注射等体积生理盐水。于再灌注第24,48,72小时及第7天时参照Zea longa法评定大鼠神经功能缺损程度,同时采用光镜、电镜观察各组大鼠脑组织病理形态学改变,选用ELISA法测定脑组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）含量。 结果模型组大鼠神经功能缺损症状于脑缺血再灌注第7天时明显改善,芹菜素组大鼠神经功能缺损症状于脑缺血再灌注第72小时时即有显著提高。与假手术组比较,模型组、芹菜素组TNF-α和IL-1β含量均显著增高（P<0.01）,芹菜素组TNF-α、IL-1β含量在脑缺血再灌注第48和72小时时均较模型组显著降低（P<0.05）。进一步分析后发现,大鼠神经功能缺损评分均与IL-1β含量、TNF-α含量呈正相关。模型组大鼠脑皮质和海马细胞肿胀、细胞间质水肿,有空泡形成,神经细胞均有核固缩、碎裂、溶解表现。芹菜素组大鼠脑组织神经细胞轻度肿胀,细胞间质、毛细血管壁轻微水肿,神经细胞有明显核固缩、碎裂、溶解表现。 结论芹菜素能促进局部脑缺血再灌注大鼠神经功能恢复,其作用机制可能与下调TNF-α和IL-1β水平有关。     

肿瘤坏死因子α和缺血性脑损伤

缺血性脑损伤是由多种因素综合作用的结果,肿瘤坏死因子α是一种参与缺血性脑损伤病理生理过程的多功能细胞因子,具有双重、多样及网络性生物效应,在脑缺血的不同阶段产生不同甚至相反的综合性作用。本文对近年来脑缺血时肿瘤坏死因子α的表达变化、作用及相关机制的研究进展进行了综述。文中表明肿瘤坏死因子α在脑缺血后反应性增高,不仅可促进炎性坏死和细胞凋亡,而且还具有一定的神经保护作用。通过进一步研究其双向作用的机制,阻断它的神经毒性作用,充分发挥其神经保护作用,可为脑缺血损伤的有效治疗提供新思路。     

芹菜素对大鼠急性脑损伤的保护作用

目的 研究芹菜素对大鼠脑匀浆铁依赖性脂质过氧化(IDLPO)的抑制作用以及对急性脑缺血-再灌注大鼠脑损伤的保护作用.方法 体外实验用Fe2+诱导大鼠脑匀浆IDLPO反应,TBA试验测定不同质量浓度芹菜素和去铁胺干预的脑匀浆丙二醛(MDA)水平.体内实验采用改良大脑中动脉线栓法建立急性局灶性大鼠脑缺血模型,对大鼠进行神经行为学评分、脑组织TTC染色及电镜观察,观察芹菜素对不同再灌注时间(24、48、72 h)脑组织MDA、超氧化物歧化酶(SOD)的影响.结果 芹菜素能使大鼠脑匀浆的MDA水平显著下降(P<0.01);与去铁胺组比较无显著性差异(P>0.05).体内实验模型组和芹菜素组大鼠均出现不同程度的神经行为学评分异常,TTC染色出现额颞顶叶和尾壳核梗死灶,电镜下模型组病变侧细胞内及间质水肿,呈空泡化,神经细胞均有核固缩表现;芹菜素组病变较之明显减轻.与假手术组比较,模型组和芹菜素组各时间点MDA水平均有升高(P<0.01、0.05),模型72 h组较模型24、48 h组明显升高(P<0.01、0.05),芹菜素48、72 h组与相应模型组比较明显降低(P<0.01、0.05);模型组和芹菜素组的SOD活性与假手术组比较显著降低(P<0.01、0.05);芹菜素组(除24 h组)较相应模型组显著升高(P<0.05).结论 芹菜素对大鼠急性脑缺血-再灌注损伤有保护作用,其机制可能与抑制IDLPO作用、螫合脑组织Fe2+及激活脑组织SOD的活性有关.