医学生物化学实验改革的尝试

为了培养提高学生动手能力,掌握基本生化技术,培养学生独立思考、分析解决问题的能力,最近我室生物化学实验教学在教材建设,教学改革,加强实验技能和实验室建设等方面做了一些探索和尝试。     

肺癌细胞系内皮蛋白C受体的表达及其意义

目的 从细胞、蛋白和基因三个水平分析内皮蛋白C受体（endothelial protein C receptor，EPCR）在肺癌细胞系的表达。方法 以EA．hy926内皮细胞作阳性对照，人胚肺W138细胞作阴性对照，通过流式细胞术、West-ern．blot及半定量逆转录-聚合酶链反应分析EPCR在6种肺癌细胞系的表达水平。结果 6株肺癌细胞系均有EPCR的表达。高转移肺癌95D细胞表达最高。结论 EPCR的表达是肺癌细胞的重要特征，可能与肺癌增殖及转移有关。     

PA317产生高滴度带有人TNF-α基因逆转录病毒的研究

逆转录病毒介导的基因转移技术要过渡到临床应用，主要解决如何使病毒载体具有高滴度而不具有复制活性．本文旨在探索建立一种合适的方法，能产生高滴度而且是安全的逆转录病毒载体。采用带有人肿瘤坏死因子基因的LXSN载体转染PA317包装细胞，建立产病毒的包装细胞株，结果表明：病毒载体滴度受包装培养液体积和胎牛血清浓度影响：包装细胞在32℃产生的病毒滴度比37℃高，而且比较稳定。产病毒包装细胞和被感染的靶细胞经PCR分析显示．被转染和被转导的细胞都有病毒基因的整合．而且包装细胞不会产生具有复制活性的逆转录病毒，因此能进一步用于临床研究．     

用爱呼唤生命

曾经有一位病人在他的诗中这样写到：夜莺婉转／把生的激情从死亡中轻轻唤起／将死的恐惧用微笑轻轻抹去／流萤明媚／象希望的启明星高高升起／将绝望的黑暗用光明代替／天使圣洁／那爱的温馨从心中阵阵涌起／将痛苦的伤痕轻轻抚愈／有人问你：为什么你象天使般的圣洁／你说：因为爱在呼唤。是的，有一种你无法不面对的呼唤，爱的呼唤在病人的心里强烈地响起，在他们的目光中燃烧。作为人们所说的白衣天使，爱是什么呢？我认为那便是一种无形的气候，一种由护士心灵所形成的，影响病人心灵的气候。它给病人带来的是生的力量、生的希望。对于…     

阿司匹林对维持性血液透析患者血小板活化的影响

目的探讨阿司匹林对维持性血液透析患者血小板活化的影响。方法将研究对象分3组(A组和B组各10 人,均为维持性血液透析患者,其自身动静脉内瘘反复失败;C组10人,为健康志愿者,做为对照组),A组病人口服阿司匹林75mg／d,B组不服用阿司匹林,观察3个月内血透病人自身动静脉内瘘的存活情况,并采用流式细胞仪测定其治疗前后血小板活化指标(CD62P,CD63,PAC-1)的表达,并进行组间比较。结果阿司匹林治疗后,A组活化血小板百分率明显低于B组,但仍高于C组(CD62P:A组2．63±1．08,B组5．21±1．90,C组1．31±0．88,PA-B<0． 002,PA-C<0．01;CD63:A组1．34±0．53;B组1．92±0．88,C组0．77±0．47,PA-B>0．05,PA-C<0．05;PAC-1:A组1． 35±0．68,B组2．13±0．87,C组0．81±0．41,PA-B<0．05,PA-C<0．05)。结论阿司匹林能部分抑制血小板活化。     

二位点酶联免疫测定血浆P-选择素方法的建立及临床意义

血小板活化与血管内皮细胞损伤在动脉血栓形成中起着重要的作用。P-选择素是血小板α-颗粒膜蛋白,它在血小板活化和释放过程中随着α-颗粒膜与血小板浆膜的融合暴露在血小板表面,成为体内血小板活化和血栓形成的特异标志。P-选择素有两种形式,其一是具有跨膜区域的整合型,另一种为缺乏跨膜区的游离型,后者在血小板活化时,释放到血浆内,成为血浆P-选择素的主要来源。因此,测定血浆内P-选择素的浓度变化,对体内血小板活化及血栓形成亦具有重要诊断价值。我们利用二株抗P-选择素的单克隆抗体,建立了双克隆抗体二位点酶联免疫测定血浆内P-选择素的方法,并测定了正常人和某些血栓性疾病病人血浆内P-选择素的浓度,为血栓性疾病的诊断提供了一个新的方法。     

SZ-102影响中性粒细胞与血管内皮细胞粘附的初步研究

目的 观察单克隆抗体SZ-102对中性粒细胞与血管内皮细胞粘附的影响作用。方法 用流式细胞术检测中性粒细胞、人脐静脉内皮细胞、HL-60细胞及ECV304的结合反应性；用虎红染色法检测SZ—102对中性粒细胞与血管内皮细胞粘附的影响。结果 SZ—102与静息的人脐静脉内皮细胞、HL-60细胞及ECV304有结合反应，它能促进中性粒细胞与脂多糖活化的内皮细胞粘附。结论 SZ—102所识别的抗原在细胞粘附中具有重要作用。     

CD40L在特发性血小板减少性紫癜患者中的表达及其意义

目的研究特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者血浆中可溶性CD40配体（sCD40L）及T、B淋巴细胞和血小板上CD40L的变化,探讨CD40分子在ITP中的作用。方法应用酶联免疫吸附法检测患者血浆中sCD40L的变化;流式细胞术检测不同细胞上CD40L的表达水平。结果 ITP患者血浆中的sCD40L浓度明显高于正常对照组（P〈0.05）,且血小板计数对血浆中sCD40L浓度有一定程度的影响（r=0.58,P〈0.05）;ITP患者T淋巴细胞上CD40L的表达率较正常对照组明显升高（P〈0.05）。结论 ITP患者血浆及T细胞上CD40L升高,淋巴细胞表面的CD40-CD40L相互作用可能与ITP的发病有关。     

慢性肾病患者循环血小板微颗粒水平的变化

目的探讨血小板微颗粒（PMPs）在慢性肾病（CKD）中的意义。方法采用流式细胞术及酶联免疫吸附试验（ELISA法）检测72例慢性肾病患者和20名健康对照者血浆PMPs、P-选择素的水平,并分析PMPs水平与血压、肌酐清除率、24h尿蛋白定量、血红蛋白、胆固醇之间的关系。结果 （1）CKD组患者血浆PMPs及P-选择素水平均较对照组明显增高（均P〈0.05）。（2）肾病综合征组及慢性肾炎组患者血浆PMPs的含量也显著高于对照组（分别P〈0.01和〈0.05）,肾病综合征组血浆PMPs的含量明显高于高血压肾病组（P〈0.05）;各临床分类组患者血浆P-选择素的含量均显著高于对照组（P〈0.01）,其中肾病综合征组血浆P-选择素的含量明显高于狼疮性肾病组、糖尿病肾病组和高血压肾病组（P〈0.05或〈0.01）,慢性肾炎组血浆P-选择素的含量显著高于糖尿病肾病组（P〈0.01）。（3）CKD分期I期患者血浆PMPs含量明显高于Ⅳ期患者（P〈0.05）;不同的CKD分期间P-选择素含量的差异无统计学意义（P〉0.05）。（4）PMPs的水平与血压成正相关（P〈0.05）,与肌酐清除率、24h尿蛋白定量、血红蛋白、胆固醇无明显相关性（均P〉0.05）。P-选择素与PMPs成正相关（P〈0.05）。结论 CKD患者存在明显的血小板活化,血小板活化参与CKD发生发展的病理生理过程;高血压是使CKD患者血小板活化的重要原因之一;PMPs可作为一种反映血小板活化的新标记,对评估CKD的发展及预后有一定的意义。     

血栓性疾病患者FDP、SFC测定的临床意义

应用本室生产的单抗SZ－58和SZ－65建立了测定人血浆SFC或血清FDP的ELISA方法，测定30例正常人和58例脑血栓患者的SFC和FDP含量。结果SFC和FDP值正常人分别为48.5±15．gmg/L和23.0±5．4μg／L，脑血栓患者分别为74．8±23.6mg／L和78．1±11.2μg/L。两组差异皆显著（P＜0．01），表明脑血栓病人的凝血和纤溶功能均有不同程度的增高。