HGF对人胶质瘤新生血管形成的影响研究

目的 探讨肝细胞生长因子(HGF)在人胶质瘤新生血管形成中的作用及可能机制.方法 中山大学附属第一医院病理科白2002年1月至2008年6月共确诊胶质瘤患者72例,其中Ⅰ级19例,Ⅱ级18例,Ⅲ级20例,Ⅳ级15例,免疫组化染色检测胶质瘤组织HGF、CD34的表达.体外常规培养胶质瘤细胞株U87MG,将荧光标记的HGF si-RNA(si-HGF)特异性干扰序列转染至细胞内为转染si-HGF组,同时设正常对照组和阴性转染组作为对照；Western blotting检测转染后细胞HGF、血管内皮生长因子(VEGF)的表达；将3组细胞悬液接种于鸡胚尿囊膜(CAM),5d后观察各组移植瘤周围血管形成情况. 结果 低级别胶质瘤(Ⅰ级、Ⅱ级)HGF阳性率低于高级别胶质瘤(Ⅲ级、Ⅳ级),HGF阳性胶质瘤中微血管密度(MVD)高于HGF阴性胶质瘤,差异均有统计学意义(P＜0.05).Western boltting检测结果显示,与正常对照组和阴性转染组比较,转染si-HGF组细胞HGF的表达下降约76％,VEGF的表达下降约53％；移植瘤实验显示转染si-HGF组新生血管数、血管面积及血管生成面积比均低于正常对照组和阴性转染组组,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 HGF与胶质瘤新生血管的形成关系密切,提示其有可能成为今后抗肿瘤血管生成的一个靶点.     

尿酸性肾病大鼠模型的建立

目的：考察4种不同的方法,建立稳定的尿酸性肾病（uAN）大鼠模型。方法：50只雄性SD大鼠随机分成5组,正常对照组实验过程中正常饲养;模型I、Ⅱ、Ⅲ组给予10％高酵母饲料喂养,同时分别给予腺嘌呤每日50mg／kg、100mg／kg、200mg／kg灌胃;模型Ⅳ组按腺嘌呤100mg／kg、乙胺丁醇250mg／kg的比例,配置成混悬液每日350mg／kg灌胃,连续给药2ld,制造UAN模型。实验前、实验第10天、第21天大鼠测定血清uA、BUN、CR水平;HE染色观察肾脏组织病理变化;免疫组化法观察。肾脏组织尿酸盐阴离子交换器1（uRAT1）、有机阴离子转运子1（OAT1）、有机阳离子转运体2（OCT2）的表达。结果：模型I组uA、BUN、CR水平较正常组轻微升高（P〉0．05）;模型Ⅱ组UA、BUN、CR水平在第10天、第21天较正常组升高（P〈0．05）;模型Ⅲ、Ⅳ组仅在第10天uA水平较正常组升高（P〈0．05）;BUN、CR水平在第10天、第21天,较正常组升高明显（P〈0．05）。HE染色病理切片结果提示：各模型组肾小管和间质均有不同程度的损伤,模型Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组肾组织内可见黄褐色结晶,其中模型Ⅲ、Ⅳ组肾组织存在广泛性损害。免疫组化法观察肾组织蛋白表达情况：模型Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组URAT1蛋白表达较正常组上调（P〈0．05,P〈0．01）;同时,OAT1、OCT2蛋白表达较正常组下调（P〈0．05,P〈0．01）。结论：采用酵母和腺嘌呤适合剂量联合用药,可建立稳定的UAN大鼠模型。