排序方式: 共有3条查询结果,搜索用时 8 毫秒
1
1.
目的:采用原代分离培养Sprague-Dawley(SD)大鼠脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMECs)和星形胶质细胞(astrocyte,As)建立相对简单可靠、重复性好、接近在体状态的体外血脑脊液屏障(blood-cerebrospinal fluid barrier,blood-CSF barrier)模型。方法:原代分离、纯化和培养BMECs 和As,通过细胞形态学和免疫细胞化学染色方法鉴定原代培养的细胞;通过培养在具有特殊质材和孔径的Transwell 小室上建立体外血脑脊液屏障实验模型,采用倒置显微镜观察细胞形态结构,经跨内皮电阻值(trans endothelialelectrical resistance,TEER)、4 h 液面试漏实验、两种特征性酶检测、荧光素钠通透性(sodium fluorescent,Na-FLU)评价模型的屏障功能。结果:原代培养的BMECs 具有典型的“铺路石”样外观,Ⅷ因子鉴定细胞纯度在95% 以上;As 有细长突触,胞质较浅,胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic portein,GFAP)鉴定细胞纯度在95% 以上。通过测定TEER 值共培养模型组显示高电阻值(378.97±11.38) Ω·cm2;4 h 液面试漏试验阳性;γ- 谷氨酰转肽酶(γ-glutamyltranspeptidase,γ-GT)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)表达分别为(30.88±2.87) μmol·min-1·mL-1 和(2.51±0.88)金氏单位·100 mL-1;Na-FLU 跨膜渗透系数(2.228±0.85)×106 cm·s-1。结论:建立的体外血脑脊液屏障模型在形态学、电阻和通透性方面具备了血脑脊液屏障的基本特性。 相似文献
2.
目的:建立一种简单、准确可靠、可批量检测小鼠皮质和海马内氨基酸类神 分析方法。 方法:采用 A300 氨基酸分析仪,使用 10% 磺基水杨酸进行蛋白沉淀,锂盐试剂为流动相,茚三酮显 色,检测波长为 570 nm,对该方法的分离效果、线性范围、检出限及定量限、日内精密度和回收率、日间精密度进 行测定;选择同日龄的 SPF 级 KM 小鼠分为雌雄两组,每组断头处死 3 只,每只均于冰上分离出皮质和海马,经 匀浆、离心、蛋白沉淀、稀释、过膜等过程制成小鼠脑组织游离氨基酸样品,分别测定雌雄小鼠皮质和海马内天冬 氨酸(aspartic acid,Asp)、谷氨酸(glutamic acid,Glu)、甘氨酸(glycine,Gly)、 γ - 氨基丁酸(gamma-aminobutyric acid,GABA)4 种氨基酸类神经递质的含量和牛磺酸(taurine,Tau)的含量。 结果:标准样品、雌雄小鼠皮质样品 和海马样品中的 5 种目标氨基酸分离度好,在 8~400 μmol·L -1 的浓度范围内,线性良好(R ≥0.999),检测限为 1.29~1.86 μmol·L-1 ,定量限为 4.29~6.20 μmol·L-1 ,日内精密度良好(标准样品相对标准偏差 (relative standard deviation,RSD)<2.23%,脑组织样品 RSD<2.76%),脑组织样品的加标回收率为 91.52%~102.51%,采用绘制标 样峰面积曲线的方法准确获取样品中的 5 种氨基酸含量,实验用雌雄小鼠之间未发现明显统计学差异(P>0.05)。 结论:该方法简便、准确可靠,适用于小鼠皮质和海马组织中游离氨基酸含量的批量检测。 相似文献
3.
目的制备具有缓释作用的姜黄素固体脂质纳米粒(curcumin solid lipid nanoparticles,Cur-SLN)和长循环固体脂质纳米粒(long-circulating solid lipid nanoparticles,LSLN),并对2种纳米粒的理化性质进行考察。方法采用乳化-超声法制备Cur-SLN,并对最优处方下制备的Cur-SLN进行包封率和载药量的测定,采用后插法制备Cur-LSLN,并考察Cur-SLN和Cur-LSLN的粒径、Zeta电位,差示扫描量热法(DSC)分析姜黄素在纳米粒中的存在状态,透射电镜观察两者的形态,透析法进行体外释放实验。结果最优处方下制备的Cur-SLN和Cur-LSLN的外观为球形及类球形,包封率分别为(89.15±0.66)%、(92.97±0.27)%,载药量分别为(1.72±0.08)%、(1.98±0.08)%,粒径分别为(144.5±4.1)、(155.0±2.6)nm,Zeta电位分别为(-23.6±0.2)、(-47.8±1.8)m V,通过DSC检测,可确定纳米粒中的Cur已转变为无定形态,体外释放实验结果显示,2种制剂的药物释放分为突释期和缓释期,均在12 h内释放较快,Cur-SLN在96 h累积释放86.63%,Cur-LSLN在96h累积释放76.98%,Cur-LSLN表现出更好的缓释效果。结论采用乳化-超声法可成功制备Cur-SLN和Cur-LSLN,PEG修饰后的纳米粒有更好的缓释性能,可延长药物在体内存在的时间,为靶向药物的开发做了铺垫。 相似文献
1