遗传性朊病毒病额叶脑组织差异蛋白质组学研究CSCD

目的 应用蛋白质组学方法,筛选遗传性朊病毒病（Prion disease）额中回皮质差异表达蛋白以探究朊病毒病的发病机制和干预靶点.方法 对我国经临床、病理及分子生物学方法确诊的3例遗传性朊病毒病尸检脑组织额中回皮质,以3例同年龄组的心脏猝死且无神经系统病变的尸检脑组织为对照,进行了差异蛋白质组研究.应用荧光双向差异凝胶蛋白电泳、MALDI-TOF/MS串联质谱仪进行差异蛋白质谱分析.Mascot search results软件进行搜库,确定差异表达蛋白.结果 表达上调的蛋白有：半乳糖凝集素-1（Galectin-1,Gal-1）;泛素（Ubiquitin）;兰尼碱受体2（Ryanodine receptor 2,RyR2）;肌动蛋白结合蛋白（Profilin-2,PFN2）;Rab相互作用溶酶体蛋白样蛋白-1（Rab-interacting lysomes protein-like protein 1,RILPL-1）;髓鞘碱性蛋白异构体4（Isoform 4 of myelin basic protein）;表达下调的蛋白是血色素β亚单位（Hemoglobin subunit beta）.结论 结合文献分析其中泛素、Gal-1、RyR、PFN2和RILPL-1可能与遗传性朊病毒病发病机制关系更为密切.Gal-1可能在朊病毒病中发挥内源性神经保护机制;RyR2与记忆及肌阵挛有关;泛素、RILP-1与错误折叠蛋白质清除有关;PFN2可能与神经变性病的轴浆运输障碍有关.     

炮制前处理对三七中三七皂苷含量的影响

目的:研究前处理对三七主根中皂苷含量的影响,为研究三七炮制工艺及探讨生熟三七功效异同提供物质基础。方法:采用蒸制法将三七主根炮制成熟三七,高效液相色谱法测定10种单体皂苷含量。Vision HT C₁₈柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈和水梯度洗脱,流速1.0 ml·min^-1,柱温24℃,检测波长203 nm。结果:三七经蒸制后皂苷成分三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁、Rd含量均有不同程度的降低,而人参皂苷Rh₁、Rh₄、Rk₃、20(S)-Rg₃、20(R)-Rg₃含量均有不同程度的增加;炮制品中5种皂苷成分含量下降程度和新产生成分含量增加程度与蒸制时间、温度相关;皂苷成分在120℃条件下降解和形成的速度比105℃快,总体上降解和形成的快慢:蒸制鲜三七主根切片>蒸制干三七主根整体>蒸制鲜三七主根整体,其中,Rg₁降解最快,Rh₄形成最快。结论:前处理方法影响皂苷成分降解和形成的快慢,高温高压对皂苷成分有一定的破坏作用,该方法可用于三七炮制品中皂苷类成分的含量测定和质量控制,为三七"生打熟补"与物质变化之间的相关性研究提供依据。     

不同蒸制法对三七主根中皂苷的影响

目的研究不同蒸制法对三七主根中皂苷的影响。方法采用比色法测定主根中总皂苷的量,采用HPLC法测定主根中单体皂苷的量。结果蒸制后主根中总皂苷及单体皂苷三七皂苷R1和人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd的量均有不同程度的降低,而人参皂苷Rh1、Rh4、Rk3和20(S)-、20(R)-人参皂苷Rg3这5种单体皂苷的量均有不同程度的增加。结论不同蒸制法对三七中皂苷成分的影响不同,总皂苷和5种主要皂苷成分的量下降程度和新产生成分的量增加程度与蒸制时间和温度相关。该方法可用于三七炮制品中皂苷类成分的定量测定和质量控制,为三七"生打熟补"与物质变化之间的相关性研究提供依据,同时为研究稀有皂苷的积累规律提供了一定的理论基础。     

痰瘀互结型动脉粥样硬化大鼠视网膜和肠系膜微循环观察

目的:观察痰瘀互结型动脉粥样硬化(AS)大鼠视网膜和肠系膜微循环的变化。方法:雄性6周龄Wistar大鼠40只,其中20只采用维生素D3(VD3)大剂量腹腔注射联合高脂乳剂长期灌胃的方法,建立痰瘀互结型AS大鼠模型(AS组),其余20只平行腹腔注射生理水以及纯净水灌胃作为对照组。对两组大鼠进行视多膜荧光造影,观察视网膜微血管形态及伴行动、静脉管径比值(DA/DV)。采用微循环观测系统分析两组大鼠肠系膜微血管形态、血流速度和DA/DV。结果:VD3大剂量腹腔注射联合高脂乳剂长期灌胃可成功建立痰瘀互结型AS大鼠模型,与对照组比较,AS组大鼠体重增加(t=5.99,P0.05),总胆固醇水平升高(t=-13.94,P0.05),动脉硬化指数(AI)≥4.0。AS组大鼠视网膜及肠系膜微血管数量减少、形态异常,血供不足,血液流速较对照组明显减慢(P0.05)、微动脉变细、DA/DV明显小于对照组(P均0.05);并可见视网膜微血管瘤及血液渗出。结论:观察痰瘀互结型AS大鼠视网膜及肠系膜微循环变化,可为临床诊疗和新药研发提供实验依据。     

人乳头状瘤病毒16型E6E7基因与MCA、TPA协同诱导细胞恶性转化的实验研究

目的探讨人乳头状瘤病毒(HPV)16型E6E7基因与化学致癌物MCA、TPA对Balb/c 3T3细胞恶性转化的协同作用。方法构建含HPV16 E6E7基因的重组质粒,用其转染Balb/c 3T3细胞。采用RT-PCR和Westernblot技术检测HPV16 E6E7基因和蛋白表达;应用细胞转化实验研究由MCA和TPA诱导的细胞恶性转化;并检验转化细胞在软琼脂上形成集落的能力及对SCID小鼠的致瘤能力。结果转染HPV16 E6E7基因的细胞比未转染细胞形成更多的转化灶,转化灶个数增加4～25倍,且实验时间明显缩短;其转化细胞在软琼脂上形成集落的能力及对SCID小鼠的致瘤能力更强。结论 HPV16 E6E7基因与MCA、TPA可协同诱导Balb/c 3T3细胞恶性转化。     

两种检测多环芳烃致癌性细胞转化实验方法的研究

目的 比较BALB/c-E6E7细胞(含HPV16 E6E7基因的BALB/c 3T3细胞)转化实验与BALB/c 3T3细胞转化实验对三种多环芳烃致癌性的评价能力.方法 应用已优化的BALB/c-E6E7细胞转化实验与Ⅱ阶段BALB/c3T3细胞转化实验检测三种多环芳烃的致癌性和促癌性.结果 两种细胞转化实验对三种多环芳烃致癌性和促癌性的评价结果一致,且符合IARC对其致癌性的分类标准.BALB/c-E6E7细胞可形成更多的转化灶,转化频率约为BALB/c 3T3细胞的2～10倍,该细胞转化实验具有更高的敏感性并可有效缩短实验时间.结论 BALB-E6E7细胞转化实验是一种更为敏感和高效的评价多环芳烃致癌性和促癌性的方法,有助于环境致癌物的风险评估.     

人参皂苷生物转化研究进展

人参皂苷是人参属植物药理活性的重要物质,尤以稀有人参皂苷及苷元的抗肿瘤,保护神经系统,保肝护肝等药理活性最为显著,因此,研究稀有人参皂苷获取的方法也日益增多。该文对人参属植物中人参皂苷的生物转化进行了简要的概述和展望。     

二硫腙水相江度法测定饮用的中锌

用二硫腙水相光度法测定定水源水、井水自来水中锌人一。测定波长为５４０ｎｍ，检测限为０．０２４ｍｇ／Ｌ，ＬＫ 收率在９３．７％－１０６．５％，变异系数在３．３％－６．５％之间，可满足分析要求。