藏药短穗兔耳草不同部位对急性痛风性关节炎模型大鼠的作用 及其机制研究

目的探讨藏药短穗兔耳草不同极性部位对急性痛风性关节炎大鼠模型的作用,及对模型大鼠Toll 样 受体2（TLR2）/髓样分化因子88（MyD88）/核转录因子κB（NF-κB）和NOD 样受体蛋白3（NALP3）信号通路的影 响。方法110 只SD 雄性大鼠,随机均分成正常组,模型组,秋水仙碱（0.3 mg·kg-1）组及短穗兔耳草30%乙 醇低、高剂量组（0.8、3.2 g·kg-1）,短穗兔耳草50%乙醇低、高剂量组（0.8、3.2 g·kg-1）,短穗兔耳草95%乙醇 低、高剂量组（0.8、3.2 g·kg-1）,短穗兔耳草水部位低、高剂量组（0.8、3.2 g·kg-1）。适应性喂养7 d后各给药组 每天按10 mL·kg-1 灌胃剂量进行给药处理,连续灌胃给药7 d,正常组和模型组同等剂量灌胃蒸馏水。于第 5 d给药1 h后向各组（正常组除外）大鼠右后踝关节处注射0.1 mL 尿酸钠混悬液（50 mg·mL-1）建立大鼠急性痛风 性关节炎模型,正常组注射等体积的无菌生理盐水。用足趾容积测量仪检测大鼠右后踝关节的肿胀度;造模 48 h 后取血清和滑膜组织,采用Elisa 法检测血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素1β（IL-1β）含量, 蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测关节滑膜组织中TLR2、TLR4、MyD88、NF-κB 和NALP3 等相关蛋白含量 的表达;HE 染色法检测大鼠滑膜组织的病理学变化。结果与正常组比较,模型组各时间点均出现明显的踝 关节肿胀,且具有明显差异（P＜0.01）;模型组大鼠血清TNF-α 和IL-1β 含量及滑膜组织中TLR2、TLR4、 MyD88、NF-κB 和NALP3 等蛋白含量水平均明显升高（P＜0.05,P＜0.01）。与模型组比较,在造模后48 h 内,秋水仙碱组、30%乙醇部位低剂量组和50%乙醇部位的低、高剂量组大鼠踝关节肿胀率均明显下降（P＜ 0.05,P＜0.01）。秋水仙碱组及30%乙醇部位低、高剂量组均能使血清TNF-α 和IL-1β 含量及滑膜组织中 TLR2、TLR4、MyD88、NF-κB 和NALP3 蛋白表达量下调（P＜0.05,P＜0.01）。同时,滑膜病理切片显示30% 乙醇部位更能改善大鼠滑膜组织病理变化。结论藏药短穗兔耳草对尿酸钠诱导的急性痛风性关节炎大鼠具有 一定的保护作用,其中30%乙醇部位为有效部位,其作用机制与TLR/MyD88/NF-κB 和NALP3 信号通路有关。     

大青龙汤浅析

关于大青龙汤,很多人认为是由麻黄汤和桂枝汤组成的,但看《伤寒论》第23条、第25条就发现小青龙汤与麻黄汤和桂枝汤的病机不同,且桂枝麻黄各半汤和桂枝二麻黄一汤都没有烦躁的症状,而大青龙汤中的烦躁是主症之一,所以笔者认为此说法欠妥。也有人认为大青龙汤和桂枝二越婢一汤相似,分析原文和方义就能发现这两个方子差别较大,且仲景注重方中药物剂量的变化,研究仲景书时不能忽略方中药物的剂量,不然就会认为桂枝汤和桂枝加芍药汤一样。越婢汤有里热,但跟大青龙汤不一样,所以笔者不赞同大青龙汤和桂枝二越婢一汤相似。大青龙汤是伤寒重症而里有热,为太阳阳明合病,是麻黄汤重用麻黄加石膏等而成。     

基于TLR2/MyD88/NF-κB和NALP3信号通路探讨藏族药短穗兔耳草提取物抗慢性酒精性肝损伤大鼠的作用机制

目的:通过酒精灌胃8周建立大鼠慢性酒精性肝损伤模型,研究藏族药短穗兔耳草提取物对Toll样受体(TLR2/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)和NOD样受体蛋白3(NALP3)信号通路的影响,探讨其提取物抗慢性酒精性肝损伤的作用机制。方法:60只SD雄性大鼠随机分成正常组、模型组、联苯双酯组(0.1 g·kg^-1)及短穗兔耳草低、中、高剂量组(0.5,1,2 g·kg^-1),每日上午各给药组按10 m L·kg^-1给予相应的药物,下午梯度乙醇灌胃法给予56度白酒灌胃,连续8周后,取血,测定各组大鼠血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST),丙氨酸氨基转移酶(ALT),甘油三酯(TC),总胆固醇(TG)及肝脏谷胱甘肽(GSH)水平;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝脏中TLR2,MyD88,NF-κB和NALP3蛋白的表达;苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏病理学形态改变。结果:与正常组比较,模型组血清中AST,ALT,TC,TG,IL-1β水平均明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,藏族药短穗兔耳草各剂量组能降低血清AST,ALT,TC,TG,IL-1β水平,其中高剂量组的效果尤为显著(P<0.05,P<0.01)。与正常组比较,模型组肝匀浆中GSH水平下降;模型组肝组织中TLR2,MyD88,NF-κB和NALP3蛋白水平明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,藏族药短穗兔耳草各剂量组能降低肝脏中GSH水平以及TLR2,MyD88,NF-κB和NALP3的蛋白表达(P<0.05,P<0.01);肝脏病理切片表明,藏族药短穗兔耳草能改善大鼠肝组织病理变化。结论:藏族药短穗兔耳草对酒精诱导的慢性酒精性肝损伤大鼠具有一定的保护作用,其机制可能与TLR/MyD88/NF-κB和NALP3信号通路有关。