壮医针挑疗法对哮喘小鼠miRNA-126/TSLP的影响

目的:观察壮医针挑疗法对哮喘小鼠miRNA-126/TSLP的影响。方法:选取6~8周龄的SPF级BALB/c小鼠,将其随机分为对照组、模型组、针挑组、阳性组、阴性组,每组各10只。对除对照组外的其余组小鼠采用卵清蛋白致敏及激发方法制备哮喘模型,针挑组采用壮医针挑疗法,阳性组给予miRNA-126抑制剂,阴性组给予miRNA-126激动剂,每天1次,连续干预7d。干预后对各组小鼠进行肺功能(FEV0.1、FEV0.2、FEV0.4/FVC、PEF)测定。眼球取血,采用ELISA法检测IL-4、IL-5、IL-10、IL-13水平;取外周血,采用RT-PCR法检测miRNA-126、TSLP基因的相对表达。结果:与对照组比较,模型组、阴性组肺功能各项指标均降低,IL-4、IL-5、IL-10、IL-13水平及miRNA-126、TSLP基因相对表达均升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,针挑组、阳性组肺功能各项指标均升高,IL-4、IL-5、IL-10、IL-13水平以及miRNA-126、TSLP基因相对表达均下降,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:针挑疗法治疗哮喘、改善肺功能的起效环节与其调节miRNA-126/TSLP基因表达、降低Th2型细胞因子水平有关。     

青天葵实时荧光定量PCR内参基因的选择

目的 筛选合适的内参基因用于青天葵实时荧光定量PCR分析的校正.方法 以毛唇芋兰3个组织(叶片、叶柄和球茎)为材料,利用实时荧光定量PCR技术探讨18S rRNA、actin、ubiquitin、EF-lα和β-tubulin 5个常用内参基因在毛唇芋兰不同组织中表达差异.利用GeNorm和NormFinder软件比较各内参基因的Ct值,以分析他们在青天葵3个组织的表达稳定性.结果 5个内参基因的表达稳定性各异,GeNorm软件分析结果表明,稳定性β-tubulin=EF-lα＞ubiquitin＞actin＞ 18S rRNA;NormFinder软件结果显示β-tubulin稳定性最好,EF-1α次之,18S rRNA则最差.两个不同软件分析结果一致.结论 β-tubulin可作为毛唇芋兰不同组织中基因表达差异分析的校正内参基因.