肾消康对糖尿病大鼠肾组织基因Gna12表达的影响

[目的]观察中药复方肾消康对糖尿病。肾病大鼠的防治作用及对肾脏基因表达的影响,探讨糖尿病肾病（DN）的发病机制,揭示中药复方肾消康防治DN的作用机制,筛选药效作用靶点,为临床推广应用提供科学依据。[方法]本实验采用链脲佐菌素（STZ）加高热量饮食建立糖尿病大鼠肾脏损伤模型。运用放免、生化、光镜、电镜及美国Affymetrix公司的基因表达谱芯片、逆转录聚合酶链反应法（RT—PCR）等先进检测手段和方法,观察了多项指标,尤其是通过聚类分析寻找和DN有重要相关性的基因,并进一步采用实时荧光定量RT—PCR法做验证实验研究。[结果]鸟嘌呤核苷酸结合蛋白cd2（Gna12）,在糖尿病大鼠肾脏表达下调,肾消康中剂量组表达上调。[结论]应用Aflymetrix Rat2302．0基因表达谱芯片检测糖尿病大鼠肾脏基因的表达,Gna12是筛选出的肾脏差异表达基因和药效靶点之一,并对该基因做荧光定量RT—PCR测序分析。基因功能分析表明,在糖尿病状态下,Gna12表达下调,与糖尿病肾脏损伤有重要相关性,而经肾消康治疗后大鼠肾脏组织中Gna12表达上调,可见肾消康对Gna12基因表达具有良性调节作用,其作用机制还有待于进一步研究。     

肾消康对糖尿病大鼠肾组织基因ubiquitin mRNA表达的影响

目的观察中药复方肾消康对糖尿病肾病大鼠的防治作用及对肾脏基因表达的影响,探讨DN的发病机制,揭示中药复方肾消康防治DN的作用机理,筛选药效作用靶点,为临床推广应用提供科学依据。方法采用链脲佐菌素(STZ)加高热量饮食建立糖尿病大鼠肾脏损伤模型。运用放免、生化、光镜、电镜及美国Affymetrix公司的基因表达谱芯片、RT-PCR等先进检测手段和方法,观察多项指标,通过聚类分析寻找和DN有重要相关性的基因,并进一步采用实时荧光定量RT-PCR法做验证实验研究。结果泛素mRNA(ubiquitin mRNA)在糖尿病大鼠肾脏表达上调,肾消康治疗组表达下调。结论应用Affymetrix Rat2302.0基因表达谱芯片检测糖尿病大鼠肾脏基因的表达,ubiquitin mRNA基因是筛选出的肾脏差异表达基因和药效靶点之一。糖尿病状态下,ubiquitin mRNA基因表达上调,与糖尿病肾脏损伤有重要相关性,而经肾消康治疗后大鼠肾脏组织中ubiquitinm RNA表达下调。肾消康对ubiquitin mRNA基因表达具有良性调节作用。     

白涩症源流浅析

本文通过对历史相关古籍文献的整理研究,梳理白涩症发展沿革,探讨历代医家对其病因病机及治疗方法的认识,以期为白涩症的研究提供理论基础,并为临床治疗开拓思路。中医对白涩症的相关记载,最早可追溯至晋代《针灸甲乙经》中有关目涩的论述,其对于自觉眼部干涩不适的症状有了初步的认识。“白涩症”之名首见于《证治准绳》,后沿用至今。其基本病因病机主要归责于津液亏少,眼目不得濡养,外感邪气、脏腑内伤、情志失常、饮食劳倦等因素均可致病,内治法治疗主要分为祛邪、泻实、补虚三个方面,外治法包括点眼法及针灸疗法,临床上当审察病因,随证治之。现代医学对该病的治疗主要以缓解症状为主,寻找有效的中医治疗手段在现代临床应用中意义重大。     

肾消康对糖尿病大鼠肾组织基因Gna12表达的影响

[目的] 观察中药复方肾消康对糖尿病肾病大鼠的防治作用及对肾脏基因表达的影响, 探讨糖尿病肾病(DN)的发病机制, 揭示中药复方肾消康防治DN的作用机制, 筛选药效作用靶点, 为临床推广应用提供科学依据。[方法] 本实验采用链脲佐菌素(STZ)加高热量饮食建立糖尿病大鼠肾脏损伤模型。运用放免、生化、光镜、电镜及美国Affymetrix公司的基因表达谱芯片、逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)等先进检测手段和方法, 观察了多项指标, 尤其是通过聚类分析寻找和DN有重要相关性的基因, 并进一步采用实时荧光定量RT-PCR法做验证实验研究。 [结果] 鸟嘌呤核苷酸结合蛋白α12(Gna12), 在糖尿病大鼠肾脏表达下调, 肾消康中剂量组表达上调。 [结论] 应用Affymetrix Rat2302.0基因表达谱芯片检测糖尿病大鼠肾脏基因的表达, Gna12是筛选出的肾脏差异表达基因和药效靶点之一, 并对该基因做荧光定量RT-PCR测序分析。基因功能分析表明, 在糖尿病状态下, Gna12表达下调, 与糖尿病肾脏损伤有重要相关性, 而经肾消康治疗后大鼠肾脏组织中Gna12表达上调, 可见肾消康对Gna12基因表达具有良性调节作用, 其作用机制还有待于进一步研究。     

糖心康对糖尿病大鼠心肌NF-κB表达的影响

目的探讨糖心康对糖尿病性心肌病的治疗作用及其作用机制。方法通过腹腔小剂量多次注射链脲佐菌素(STZ)加高热量饮食建立糖尿病大鼠心肌损伤模型,采用全自动生化分析仪测定空腹血糖、糖化血红蛋白,放免法测定胰岛素含量观察糖心康对糖尿病大鼠糖代谢及胰岛素水平的影响;采用免疫组织化学法观察糖心康对糖尿病大鼠心肌NF-κB表达的影响。结果糖心康有明显降低血糖、糖化血红蛋白及提高胰岛素水平的作用(P<0.05);糖心康对糖尿病大鼠心肌NF-κB的过度表达有显著抑制作用(P<0.01)。结论糖心康对糖尿病性心肌病有显著治疗作用,其作用机制之一是通过抑制心肌NF-κB过度表达实现的。     

糖心康对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的影响

1材料与方法主要试剂和药品:链尿佐菌素(STZ)为美国Sigma公司产品,糖心康(太子参、土鳖虫、枸杞子、丹参等)为黑龙江中医药大学附属第一医院药厂制作.原位末端标记检测试剂盒购自德国ROCHE-BM公司.有关芯片试剂及仪器设备,均为上海博星基因芯片公司制备.动物造模及分组:Wistar大鼠,雄性,体重200～230g,除空白对照组外,余者以25mg/kgSTZ左下腹腔注射,造模成功后,随机分为模型组和治疗组.各组均喂以高热量饲料.给药方法:治疗组以中药糖心康灌胃,空白组及模型组以生理盐水灌胃.标本采集:快速用-180℃、12h处理过的手术剪刀摘取心脏,立即用预冷的生理盐水冲洗,冲洗后在冰上操作,沿心室长轴切取心肌,部分置于2.5%戊二醛及4%多聚甲醛固定,供光、电镜观察使用.细胞凋亡检测:TUNEL法检测心肌细胞凋亡.具体步骤按试剂盒使用说明操作.阳性制定标准:以细胞核被染成棕褐色为阳性结果.②电镜超微形态学检测心肌凋亡,其特征是:细胞核染色质密度高并边集,核固缩畸变,核膜内陷,可见凋亡小体.     

肝达康中挥发油的提取工艺研究

目的 优化肝达康复方中挥发油的最佳提取工艺.方法 采用L9(34)正交设计,以挥发油得率为指标,优选肝达康中柴胡、枳实两味药材中挥发油类成分的提取方法.结果 最佳提取条件为6倍量水浸泡30 min,提取4h.结论 确定的最佳工艺条件可行,能为实际生产提供依据.     

《三因司天方》剖析

宋代陈无择在其所著《三因极一病证方论》中记载运气方16首,为医家应用运气学说指导临床提供了范例。虽然今人应用该方并发表多种临床验案,但在理论上并无突破,文章对运气致病的机制,以及陈无择所传运气方最初的适用范围、组方的规律等问题进行探讨。     

肾消康对糖尿病大鼠肾组织基因CcL5mRNA表达的影响

目的:比较糖尿病肾病（DN）大鼠和中药复方肾消康治疗组大鼠肾脏组织中基因表达的差异,并用Eve green实时荧光RT-PCR技术定量检测CcL5mRNA在各组大鼠肾脏组织的表达水平。方法:（1）差异表达基因的筛选:实验大鼠分为空白组、模型组、治疗组。从肾脏组织中抽提mRNA,由纯化的总RNA合成双链cDNA,并将其纯化,以生物素标记cRNA合成,纯化和质控体外转录（IVT）产物,片断化cRNA,然后进行杂交、洗脱、染色、芯片扫描并用软件进行统计分析,筛选出差异表达数据。不同肾脏组织样本用灰度扫描图和杂交信号强度散点图表示。（2）荧光定量RT-PCR的检测: RNA样品反转录,荧光定量PCR反应。结果:仅对筛选出差异表达基因谱中的CcL5mRNA进行报告。糖尿病肾病模型组肾脏组织基因CcL5mRNA表达上调,中药复方肾消康治疗组肾脏组织基因CcL5mRNA表达下调。结论:CcL5mRNA在糖尿病状态下肾脏也有表达,并且表达上调,而中药复方肾消康可使其下调,这也是中药复方对糖尿病性肾组织损伤具有保护作用的机制之一。     

基于《内经》"浆粥入胃,泄注止,则虚者活"探讨叶天士辨治虚损思想

"浆粥入胃,泄注止,则虚者活"是《素问·玉机真脏论》中对"五虚"生还之机的论述,意在说明虚损的治疗要点在于减少精气之损耗和增加精气之化生.叶天士继承和发扬了这一理论,其虚损医案中充分体现了增加精气化生及减少精气消耗的治疗法则,处方精当,用药平和,强调静养,善用食疗,颇具特色.