洗涤回收式自体输血对膝关节、髋关节置换术患者血栓弹力图及免疫功能的影响

目的探讨洗涤回收式自体输血对膝关节、髋关节置换术患者血栓弹力图及免疫功能的影响。 方法选取2019年1月至12月甘肃省中医院骨科收治的膝关节、髋关节置换术中出血400~1 000 ml,回收输血量400~600 ml的患者186例为观察组,并选择同期只接受异体输血的患者162例为对照组。对两组患者输血前与输血后1 d、5 d的血红蛋白(Hb)、红细胞计数(RBC)、红细胞比容(HCT)、血小板(PLT)、血栓弹力图[包括凝血反应时间(R)、最大振幅(MA)、血凝块形成时间(K)、凝固角度(α)]及细胞免疫功能(包括CD3⁺CD4⁺T细胞、CD3⁺CD8⁺T细胞、CD16⁺CD56⁺NK细胞)水平进行检测并比较。 结果输血后1 d,观察组Hb(112.57±14.32)g/L、HCT(34.10±3.32)%、RBC(3.12±0.53)×10¹²/L、PLT(125±31)×10⁹/L与对照组Hb(108.35±12.84)g/L、HCT(33.52±3.04)%、RBC(2.91±0.42)×10¹²/L、PLT(123±40)×10⁹/L比较,均差异无统计学意义(t＝0.36,1.21,1.37,1.94;均P>0.05);输血后5 d,观察组Hb(122.52±13.70)g/L、HCT(40.12±3.80)%、RBC(3.91±0.45)×10¹²/L、PLT(135±39)×10⁹/L与对照组Hb(118.31±13.91)g/L、HCT(35.50±3.70)%、RBC(3.14±0.61)×10¹²/L、PLT(127±31)×10⁹/L比较,均差异有统计学意义(t＝7.01,5.58,5.72,7.61;均P<0.05)。输血后1 d,观察组R(5.97±0.31)min、MA(56.73±2.24)mm、K(2.57±0.10)min、α(59.88±1.73)°与对照组R(6.07±0.30)min、MA(57.68±1.78)mm、K(2.70±0.52)min、α(61.12±3.09)°比较,均差异无统计学意义(t＝2.02,0.90,0.66,0.99;均P>0.05)。输血后5 d,观察组R(6.62±0.59)min、MA(63.81±0.86)mm、K(2.95±0.19)min、α(61.12±2.36)°与对照组R(6.82±1.21)min、MA(62.99±1.88)mm、K(2.82±0.18)min、α(60.50±2.07)°比较,均差异无统计学意义(t＝1.70,1.04,1.33,0.56;均P>0.05)。流式细胞分析表明,输血后1 d,观察组患者CD3⁺CD4⁺T细胞的水平(33.66±2.10)高于对照组(29.88±1.97),差异有统计学意义(t＝3.72,P<0.01);输血后5 d,观察组CD3⁺CD4⁺T细胞(35.92±0.79)、CD3⁺CD8⁺T细胞(21.82±1.61)、CD16⁺CD56⁺NK细胞(1.68±0.14)水平均高于对照组(29.83±2.11、20.53±2.71、1.03±0.13),均差异有统计学意义(t＝7.66,6.57,9.58;均P<0.01)。 结论与异体输血比较,洗涤回收式自体输血不影响膝关节置换、髋关节置换患者血栓弹力图R、MA、K、α,可以提高患者的细胞免疫功能。     

核酸适体电化学生物传感器的研究进展

核酸适体(aptamer)是一种体外筛选,功能类似于单克隆抗体的,能与靶物质高特异性、高亲和力结合的寡核苷酸片段。因其具有诸多优于抗体的特点,已被广泛应用到生物传感器领域。而电化学检测技术因其具有选择性好、灵敏度高,以及快速、简单、测试费用低和易于联机化等优点而在适体传感器的发展中占有重要的地位。本研究依据电化学适体传感器的构建原理中DNA链的数量和结构,对近几年电化学适体传感器的研究发展做一综述,包括单链核酸物质体系构建的核酸适体电化学传感器、双螺旋结构的核酸物质体系构建的核酸适体电化学传感器和两条单链核酸物质体系构建的核酸适体电化学传感器。     

不同穿刺方法对透析患者动静脉内瘘的影响

目的:探讨不同穿刺方法对血液透析患者动静脉内瘘的影响,为患者选择最佳穿刺方法提供依据。方法:将透析1年以上的124例患者分为治疗组和对照组各62例,分别采用阶梯式或纽扣式穿刺法和常规穿刺方法,观察穿刺时渗血、血肿、内瘘血管内膜壁厚度及内瘘瘤、内瘘狭窄、堵塞等并发症发生情况。结果:治疗组不良事件发生情况均明显少于常规随意点穿刺法,差异具有统计学意义(P<0.05);在穿刺50次后实验组血管内膜壁厚度小于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);穿刺1年后,治疗组患者动脉瘤、内瘘狭窄、堵塞等不良并发症发生情况均明显少于常规随意点穿刺法,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:阶梯式或纽扣式穿刺方法,能够明显减少穿刺渗血、血肿、穿刺失败等不良事件的发生率,减少血管内膜壁的增生,降低内瘘瘤、血管狭窄、血管堵塞等并发症的发生。     

兰州地区健康人群血清糖类抗原199参考值范围的建立

目的:建立电化学发光法测定血清糖类抗原199(CA199)在兰州地区健康人群的正常参考值范围。方法:通过Roche E601电化学发光分析仪进行血清糖类抗原199检测,采用SPSS 17.0建立本实验室95%可信区间。结果:600例中CA199最小值0.6IU/m,最大值36.05IU/m,平均(10.1±6.9)IU/m,总体健康人群的95%参考区间为0~23.62 IU/mL。健康人群参考区间男、女比较,差异无统计学意义(P0.05);21~40岁年龄组和其他年龄组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:兰州地区健康人群血清糖类抗原199正常人群参考范围为0~23.62 IU/mL。     

引入易错PCR和DNA-shuffling技术构建单链抗体库

 摘要：目的 引入易错PCR和DNA -shuffling技术构建库容量高的单链抗体库,为后续筛选得到高亲和力抗体奠定基础。方法 收集不同年龄组、不同性别、不同健康状态的人的静脉血各5ml提取单个核细胞总RNA,反转录,PCR扩增VH和VL基因,应用易错PCR对VH和VL基因进行突变,同时用DNA-shuffling技术对全长单链抗体进行体外改组,获得的分子与T载体连接转化E.coli DH5α后,采用菌落PCR鉴定重组率,酶切鉴定抗体库多样性。结果 引入易错PCR和DNA-shuffling技术后,成功构建了单链抗体库,经酶切鉴定,初步判断抗体库多样性良好、库容量高。结论 构建单链抗体库的过程中,引入易错PCR和DNA-shuffling技术,有利于提高基因的多样性,利于构建高库容量的单链抗体库。     

兰州地区健康人群tPSA、fPSA以及fPSA/tPSA参考值范围的建立

目的：建立电化学发光法测定血清总前列腺特异性抗原（tPSA）、游离前列腺特异抗原（fPSA）以及二者比值（fPSA/tPSA）在兰州地区健康人群中的正常参考值范围。方法：通过Roche E411电化学发光分析仪进行血清tPSA和fPSA检测,采用SPSS 17.0建立本实验室95%可信区间。结果：兰州地区健康人群血清中tPSA、fPSA以及fPSA/tPSA结果呈近似正态分布。 tPSA正常人群参考范围为＜2.00 ng/mL（年龄小于60岁）和＜3.7 ng/ml（年龄大于60岁）,fPSA正常人群参考范围为＜0.63 ng/mL（年龄小于60岁）和＜1.27 ng/mL （年龄大于60岁）,fPSA/tPSA正常人群参考范围为＜0.66（年龄小于60岁）和＜0.43（年龄大于60岁）。结论：兰州地区健康人群tPSA参考范围为＜2.00 ng/mL（年龄小于60岁）和＜3.7 ng/mL（年龄大于60岁）,fPSA参考范围为＜0.63 ng/mL（年龄小于60岁）和〈1.27 ng/mL（年龄大于60岁）,fPSA/tPSA参考范围为＜0.66（年龄小于60岁）和＜0.43（年龄大于60岁）。     

兰州地区健康人群甲胎蛋白、癌胚抗原参考值调查

目的：建立电化学发光法测定血清甲胎蛋白（AFP）和癌胚抗原（CEA）在兰州地区健康人群的参考值。方法：通过RocheE411电化学发光分析仪进行血清AFP和CEA检测,采用SPSS16．0建立本实验室95％可信区间。结果：兰州地区健康人群血清中AFP、CEA结果呈正态分布,男性与女性之间差异无统计学意义（P〉0．05）。正常人群AFP参考范围为0-4．33IU／mL;CEA〉61岁为0-4．33ng／mL,〈61岁为0-3．07ng／mL。结论：兰州地区健康人群AFP参考范围为〈4．33IU／mL;CEA〉61岁为〈4．33ng／ml,〈61岁为〈3．07ng／mL。     

养阴生胍膜治疗复发性口腔溃疡102例

目的：观察养阴生肌膜治疗复发性口腔溃疡的,临床疗效。方法：将307例患者随机分为3组。养阴生肌膜组给予养阴生肌膜口腔患处贴敷,3次／d。养阴生肌散给予养阴生肌散组口腔患处贴敷,3次／d。奥硝唑膜组给予奥硝唑膜口腔患处贴敷,3次／d。3组均以用药10天为1个疗程,治疗5个疗程后进行病例回访,随访时间1．5年。结果：临床疗效养阴生肌膜组、养阴生肌散组与奥硝唑膜组相比差异显著（P〈0．05）。养阴生肌膜组与养阴生肌散组相比,无显著差异（P〉0．05）。疼痛消失时间、溃疡愈合时间、复发间隔时间养阴生肌膜组、养阴生肌散组与奥硝唑膜组相比差异显著（P〈0．05）;养阴生肌膜组与养阴生肌散组相比,无显著差异（P〉0．05）。结论：养阴生肌膜治疗复发性口腔溃疡临床疗效显著。     

癌胚抗原ssDNA核酸适配子的体外筛选及鉴定

目的通过SELEX技术筛选获得癌胚抗原(CEA)特异性核酸适配子,为建立CEA适配子检测方法和肿瘤靶向治疗奠定实验基础。方法构建长度为88bp的随机ssDNA文库,体外筛选人血清CEA特异性适配子,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测特异性适配子结合蛋白。结果经过优化体外筛选条件,经12轮筛选,获得特异性核酸适配子,经SDS-PAGE证实了其识别并特异性结合的物质为人血清CEA。结论经体外12轮筛选,证实了所获得的CEA适配子可特异性地与人血清CEA蛋白结合,为后续建立CEA特异性检测平台提供基础,也为靶向治疗药物的研制提供一定的思路。