光照节律改变对大鼠视网膜中Cry2表达的影响

背景 Cry2存在于哺乳动物视网膜上,是生物钟振荡器环路中重要的调控因子. 目的 探讨光照节律改变对大鼠视网膜中Cry2表达的影响.方法 将清洁级健康无眼疾SD大鼠30只按随机数字表法分成2个组,正常对照组大鼠在自然昼夜光线照明下喂养,实验组大鼠饲养在光照控制室内,大鼠活动平面光照度为(533±16) lx,设定每日光照明(6:00 ～24:00)、暗(24:00 ～6:00)循环交替时间为18 h/6 h,持续时间为3个月.于实验后3个月时在光学显微镜及透射电子显微镜下观察大鼠视网膜组织结构和超微结构的改变,采用免疫组织化学法检测各组大鼠视网膜中Cry2蛋白的表达,采用实时荧光定量PCR法检测Cry2mRNA在视网膜组织中的表达变化.结果 光学显微镜下可见,正常对照组大鼠喂养3个月时视网膜各层结构清晰,排列整齐,而实验组大鼠视网膜萎缩变薄,排列紊乱.透射电子显微镜下观察表明,正常对照组大鼠光感受器细胞外节膜盘结构清晰,内节线粒体嵴连续,外核层细胞核形态规则,但实验组大鼠光感受器内外节结构紊乱,外节膜盘间隙增大,出现溶解、空泡变,光感受器内节线粒体空泡变,视网膜外核层细胞核染色质浓集,部分出现核碎裂、边集,核膜皱缩、内陷.免疫组织化学检测显示,2个组大鼠Cry2蛋白均在视网膜节细胞及内核层部分细胞的细胞质和核膜阳性表达,实验组大鼠Cry2蛋白表达评分为(0.833±0.197)分,明显低于正常对照组的(1.700±0.245)分,差异有统计学意义(P=0.009).实时荧光定量PCR定量检测结果显示,正常对照组大鼠视网膜中Cry2 mRNA表达量为0.962±0.125,实验组为0.615±0.100,差异有统计学意义(P=0.006).结论 533 lx的光照强度长期节律性照射可导致大鼠视网膜组织结构损伤,其机制可能与视网膜中Cry2的表达下调有关,调整Cry2的表达是否是临床上稳定生物节律的一个重要环节值得探讨.     

光照节律改变对大鼠视网膜的影响及中药干预作用的研究

目的探讨光照节律改变对大鼠视网膜的影响及中药的干预作用。方法 SD大鼠45只随机分成3组,对照组为自然光环境,模型组与中药组饲养在光照控制箱内,光照明/暗交替时间为18 h/6 h,中药组予以中药灌胃,实验时间4个月,观察大鼠视觉电生理、视网膜组织学改变,并对视网膜过氧化物以及抗氧化酶活性进行分析。结果模型组最大混合反应(maximal combined response,Max-R)a、b波振幅下降54.3%、65.4%,明视视锥反应(cone response,Cone-R)a、b波振幅下降35.8%、38.5%,振荡电位(oscillatory potentials,OPs)OS2值、30Hz闪烁光N1-P1振幅下降,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。中药组与模型组相似,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。对照组光学显微镜下见视网膜各层分界清晰,排列整齐,模型组与中药组视网膜普遍萎缩变薄,层次不清。对照组视网膜丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量低,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性高,与模型组及中药组比较差异有统计学意义(P<0.05)。中药组SOD活性比模型组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论光照节律改变对大鼠视网膜结构功能有一定影响,中药可能对视网膜功能有一定的保护作用,但作用位点及机制还需进一步研究。     

玻璃体切除术后白内障患者行无玻璃体腔灌注的白内障超声乳化术

目的 探讨玻璃体切除术后并发性白内障患者在无玻璃体腔灌注情况下行白内障超声乳化手术的安全性.方法 玻璃体切除术后并发性白内障患者32例,术前排除晶状体悬韧带及后囊膜损伤,在无玻璃体腔灌注下实施低灌注、低负压超声乳化手术.结果 32例均顺利完成白内障超声乳化手术.术中无后囊膜破裂,亦无悬韧带损伤和眼内出血;4例后囊膜混浊抛光不净.术后视力均有不同程度提高.术后第1天角膜切口水肿9例,术后1周消失.术后1个月时,4例后囊膜混浊病例行YAG后囊激光切开术,视力提高.结论 对玻璃体切除术后的白内障患者,若无晶状体悬韧带及后囊膜损伤,不行玻璃体腔灌注也能完成白内障手术,可减少创伤和眼内操作.     

人工光环境对大鼠眼压的影响及应用中医阴阳钟理论进行干预的实验研究

目的探讨长时间人工光环境及应用中医阴阳钟理论干预对大鼠眼压的影响。方法将40只SD大鼠(雌雄各半)随机分成8组,1～4组为雄鼠,分别予自然光照射、单纯长时间光照(每天18 h人工光照)、长时间光照+中药1组干预(子时前补阴药,午时前补阳药)、长时间光照+中药2组干预(子时前补阳药,午时前补阴药);5～8组为相应处理的雌鼠。大鼠周龄8周时测量其48 h眼压,时间点间隔3 h左右。结果 1.长时间光照使雌雄大鼠眼压峰值时间点前移,与自然光照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);中药1组干预后大多数雄鼠眼压峰值时间与自然光照组接近,与单纯长时间光照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),而中药2组干预的雄鼠眼压峰值时间未见明显变化(P>0.05);雌鼠各中药干预组较单纯长时间光照组无明显差异(P>0.05)。2.长时间光照使大鼠眼压数值普遍下降,与自然光照组比较差异有统计学意义(P<0.05);中药干预仅对雄鼠眼压谷值及48 h眼压值有影响(P<0.05)。结论长时间光照对大鼠眼压峰值出现时间点及眼压数值均有影响,应用中医阴阳钟理论给予适时中药补阴补阳方治疗对其有一定干预作用。     

针刺降低青光眼模型兔眼压的机理探讨

目的?探讨针刺降低急性高眼压的机理。 方法?12只家兔急性青光眼模型造模成功后4h分为2组,实验组6只家兔进行针灸治疗,对照组6只未做处理。造模前和造模后4h、针刺后1h进行眼压测定和酶联免疫检测方法行血浆β内啡肽含量的测定。结果? 12只家兔眼压值造模前为(7.50±1.62)mmHg,造模后4h为(19.86±9.45)mmHg,两者比较有统计学差异（P<0.05）。针刺组针刺前、针刺后眼压分别为(20.89±11.3)mmHg、(7.55±5.70)mmHg,有统计学差异（P<0.05）。血浆β内啡肽浓度,针刺前针刺组与对照组比较无统计学差异,2组针刺前后无统计学差异,但针刺后针刺组比对照组明显升高,有统计学意义（P<0.05）。结论?在高眼压状态下针刺治疗可以降低眼压,同时使血浆中β内啡肽浓度升高,针刺降眼压的机理可能和血浆β内啡肽浓度升高有关。