萘甲异喹的降压作用

五十年代后期就有粉防己碱(Tet)降压作用的报道,近年研究表明它有钙拮抗作用。但由于其来源困难,又难以合成,临床应用受到限制。萘甲异喹(naphthylmethyl isoquinoline NI)系Tet改构后的化合物,本文研究了NI对正常和高血压动物的降压作用并对其降压机理作了初步探讨。     

萘甲异喹对离体豚鼠心肌的作用

萘甲异喹(NI)呈浓度依赖性地降低离体豚鼠心房收缩力和频率。其拮抗豚鼠左房肌Iso正性肌力作用的PD2₂′值为5.4,Ver为5.8。NI10μmol/L明显降低豚鼠乳头肌收缩力;缩短快反应APD,以对APD₂₀影响最大,但不影响APA和V_max。对高K⁺去极化慢反应动作电位,NI产生浓度依赖性负性肌力作用,同时明显降低APA,V_max,缩短APD;提高细胞外液Ca²⁺浓度可使其抑制作用逆转。结果提示NI具有钙通道阻滞作用。     

小分子干扰RNA抑制大鼠心肌H9C2细胞血管紧张素转换酶2的表达

目的研究siRNA对大鼠心肌H9C2细胞血管紧张素转换酶2(ACE2)的抑制作用。方法根据大鼠ACE2基因序列设计并化学合成3条siRNA及1条阴性对照siRNA,并标记FAM荧光,以Lipofectamine2000转染入大鼠心肌H9C2细胞,用Realtime Quantity RT-PCR和Western-blot分别检测ACE2基因和蛋白表达量的改变、验证所设计的siRNA的抑制效应。结果以Lipofectamine2000转染所设计的siRNA进入H9C2细胞,转染效率>95%。起始于434、567位点的siRNA在基因水平对ACE2无明显抑制效应(P>0·05);起始于1205位点的siRNA在基因和蛋白水平均有明显的抑制效应,基因水平下降73·5%(P<0·05);蛋白水平下降70·0%(P<0·01)。结论起始于1205位点的siRNA对大鼠心肌H9C2细胞ACE2有明显的抑制效应。     

小分子干扰RNA抑制大鼠心肌H9C2细胞血管紧张素转换酶2的表达

目的 研究siRNA对大鼠心肌H9C2细胞血管紧张素转换酶2(ACE2)的抑制作用.方法 根据大鼠ACE2基因序列设计并化学合成3条siRNA及1条阴性对照siRNA,并标记FAM荧光,以Lipofectamine 2000转染人大鼠心肌H9C2细胞,用Realtime Quantity RT-PCR和Western-blot分别检测ACE2基因和蛋白表达量的改变、验证所设计的siRNA的抑制效应.结果 以Lipofectamine 2000转染所设计的siRNA进入H9C2细胞,转染效率＞95%.起始于434、567位点的siRNA在基因水平对ACE2无明显抑制效应(P＞0.05);起始于1205位点的siRNA在基因和蛋白水平均有明显的抑制效应,基因水平下降73.5%(P＜0.05);蛋白水平下降70.0%(P＜0.01).结论 起始于1205位点的siRNA对大鼠心肌H9C2细胞ACE2有明显的抑制效应.     

大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞诱导分化的体外条件研究

目的研究体外条件下大鼠骨髓间充质干细胞(rat mesenchymal stem cells,rMSCs)向心肌样细胞分化的影响因素。方法采用免疫细胞化学方法检测rMSCs表面CD71、SH2、CD31、 CD34、CD45以及5-氮胞苷诱导后心肌细胞特异性蛋白α-sarcomeric actin、troponin T的表达;细胞计数法计算rMSCs倍增时间;观察不同传代数、不同时间及不同剂量5-氮胞苷、依地酸二钠(ethylenediami- netetraacetic acid tetrasodium salt,EDTA-2Na)及无血清培养液对rMSCs分化潜能的影响。结果rMSCs 表达CD71、SH2,而CD31、CD34和CD45呈阴性表达。第3代rMSCs经10μM 5-氮胞苷诱导后细胞呈现克隆、肌管等结,构,表达α-sarcomeric actin、troponin T等心肌细胞特异蛋白,细胞倍增时间为(100 ±8)h。第1、12代rMSCs诱导后细胞形态未发现明显改变、未出现上述结构,细胞倍增时间分别为 32±4 h、38±3 h。1、15、100μM 5-氮胞苷刺激12-72 h,2周后未发现克隆或肌管结构。5-氮胞苷刺激,以1 mM EDTA处理以及无血清培养液培养rMSCs形成的克隆、肌管结构不典型,α-sarcomeric ac- tin、troponin T表达较弱。结论rMSCs具有体外分化潜能,并且受细胞传代数、细胞倍增时间、诱导浓度和时间、细胞外钙离子浓度及培养条件等因素的影响。     

心经经脉与心脏相关的差异表达基因的研究

目的:从基因差异表达方面探讨心经与心脏相关的特异性基础。方法:复制大鼠急性心肌缺血模型,分别电针心经“神门”至“通里”段、小肠经“养老”至“支正”段、肺经“太渊”至“列缺”段。刺激电压5V,频率2Hz,波宽300μs,正负向交替方波,每次电刺激20min,1次/d,共3次。取缺血心肌组织,采用大鼠全基因U230序列芯片进行芯片检测,大规模筛选差异表达基因。结果:与模型组比较,差异表达2倍以上的基因,电针心经组有20个上调70个下调;电针小肠经组有18个上调26个下调;电针肺经组有14个上调20个下调,且3组之间鲜有相同的基因表达。结论:经脉脏腑相关具有确实的分子基础,电针心经、小肠经、肺经具有相对特异性作用途径。     

Ryanodine受体2增快胚胎发育期心肌细胞胞浆内钙瞬变

目的 :在成年心肌细胞中 ,细胞内钙瞬变是由外钙内流激发肌浆网储存钙的释放而引起的 ,位于肌浆网的钙离子释放通道ryanodine受体 2 (RyR2 )在其中起着关键的调控作用。但RyR2在发育早期心肌细胞钙瞬变形成中的作用和地位仍不清楚。本课题利用RyR2基因剔除 (RyR2 -/-)胚胎干细胞 (embryonicstemcell,ESC)体外分化的心肌细胞 ,探讨了RyR2在心肌发育过程中对钙瞬变的调控作用。方法 :在体外诱导正常R1系ESC (RyR2 + /+ )和RyR2 -/-ESC分化为心肌细胞 ,并分离出能自主收缩的心肌细胞 ,以钙离子荧光指示剂Indo - 1为探针 ,应用光谱荧…     

心肌α_1肾上腺素受体研究进展──正性肌力作用机制及受体亚型

心肌α_１肾上腺素受体研究进展──正性肌力作用机制及受体亚型杨黄恬，杨毓麟（南通医学院药理教研室，江苏２２６００１）自１９４８年Ａｈｌｑｕｉｓｔ将肾上腺素受体分为α和β受体直至１９６６年Ｗｅｎｚｅｌ等报道α受体亦参与心肌功能调节为止，β受体一直被认为...