桃红四物汤上调Nrf2/HO-1信号通路减轻去势小鼠心肌缺血再灌注损伤

目的 探讨桃红四物汤对去势（OVX）雌性小鼠心肌缺血再灌注损伤（MIRI）的影响及机制研究。方法 雌性小鼠建立去势模型后,采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测小鼠的雌二醇（E₂）水平验证去势模型;对成功建立去势模型的小鼠抽取60只随机分为6组：假手术组、模型组、桃红四物汤低、中、高剂量组（9、18、36 g·kg^-1）、核因子E₂相关因子2（Nrf2）抑制剂组,每组10只;采用激光散斑血流仪验证MIRI模型;采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法与苏木素-伊红（HE）染色法检测心肌组织病理变化;ELISA检测小鼠血清中肌酸激酶同工酶（CK-MB）、心肌肌钙蛋白Ⅰ（CTnⅠ）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）水平;采用免疫荧光染色法观察Nrf2、血红素加氧酶-1（HO-1）的表达情况;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测Nrf2、HO-1与凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、炎症因子白细胞介素-18（IL-18）、白细胞介素-1β（IL-1β）的表达。结果 与假手术组比较,模型组小鼠血清中CK-MB、CTnⅠ、MDA、IL-6水平升高（P<0.01）,SOD、IL-10水平降低（P<0.01）,心肌组织TTC染色、HE染色损伤评分增加（P<0.01）,心肌组织免疫荧光Nrf2、HO-1的表达减少（P<0.01）,心肌组织Nrf2、HO-1、Bcl-2蛋白表达量减少,Bax、IL-18、IL-1β蛋白表达量增加（P<0.01）;与模型组比较,桃红四物汤剂量组小鼠血清中CK-MB、CTnⅠ、MDA、IL-6明显下降（P<0.05,P<0.01）,SOD、IL-10明显增加（P<0.05,P<0.01）,心肌组织的TTC染色、HE染色损伤评分显著降低（P<0.01）,心肌组织免疫荧光Nrf2、HO-1的表达增加（P<0.01）,心肌组织Nrf2、HO-1、Bcl-2蛋白表达量明显增加（P<0.05,P<0.01）,Bax、IL-18、IL-1β蛋白表达量明显减少（P<0.05,P<0.01）,其中以桃红四物汤高剂量组效果最为显著;Nrf2抑制剂组小鼠血清中CK-MB、CTnⅠ、MDA、IL-6水平明显升高（P<0.05,P<0.01）,SOD、IL-10水平明显降低（P<0.05,P<0.01）,心肌组织TTC染色、HE染色损伤评分显著增加（P<0.01）,心肌组织免疫荧光Nrf2、HO-1的表达显著减少（P<0.01）,心肌组织Nrf2、HO-1、Bcl-2蛋白表达量明显减少,Bax、IL-18、IL-1β蛋白表达量显著增加（P<0.01）。结论 桃红四物汤能够减轻去势小鼠心肌缺血再灌注损伤,减轻氧化应激反应,减少炎症因子释放并抑制组织凋亡,对去势MIRI小鼠发挥保护作用,并且该保护作用可能与激活Nrf2/HO-1信号通路有关。