在扫描电镜下观察培养不同时间的人鼻咽癌细胞株(CNE)表面特殊结构变化过程

在常规培养瓶中附贴小块盖玻片,使CNE细胞株在玻片上生长。培养6、24小时和2、3、4天后,各取出附在玻片的瘤细胞进行扫描电镜观察。检查结果,泡状突起和微绒毛是瘤细胞表面结构变化的主要特征。培养后一天,瘤细胞表面出现大量分布均匀的泡状突起,第二天开始分布于细胞周边,第三天后则几乎完全消失。而在培养第一天时,细胞边缘仅有少量微绒毛存在;到第二天时,微绒毛在细胞表面呈稀疏排列;第三天后,可见瘤细胞表面布满致密的微绒毛。此外,培养一天时,在细胞表面还查见叶状伪足和折叠皱纹状结构,后者于第二天消失。丝状伪足在不同培养时间内均可查见,但多分布于细胞一侧,也有的沿细胞周边分布。丝状伪足可见有2级分叉,其末端呈吸盘样结构。本实验表明,CNE细胞株的表面结构不是恒定不变的,而是具有明显的易变性,并可因培养时间的长短,而发生不同的改变。     

PCSK9抑制剂Alirocumab降低LDL-C的研究新进展

Alirocumab为一种抗PCSK9单克隆抗体,可通过抑制PCSK9,阻止LDL-R的降解,从而降低血液中LDL-C水平。在刚刚结束的2014美国心脏协会年会(AHA2014)期间公布了多项有关PCSK9抑制剂Alirocumab在降低LDL-C中的临床研究(Ⅲ期临床试验)。现结合相关临床研究结果,对Alirocumab在降低LDL-C中的作用做一介绍。     

miRNA在缺血性心脏病中的研究进展

<正>缺血性心脏病(IHD)是人类健康的主要杀手,已成为世界第一位的死亡原因〔1〕。当IHD发生发展时,外周血中心肌肌钙蛋白(c Tn)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)等心肌损伤标志物就会大量升高,特别是c Tn对IHD的早期诊断和治疗提供了依据。但c Tn一般在IHD患者具有典型胸痛症状3.5 h后才会有明显的升高,由于这种相对"延迟"的释放,当被检测出时,心肌     

腺苷介导大鼠心脏缺血后适应的保护效应

目的观察大鼠心肌缺血再灌注时NFκ-B mRNA表达和炎性细胞因子的变化及腺苷后适应对其影响,初步探讨腺苷后适应对缺血再灌注损伤心肌的保护机制。方法健康雄性SD大鼠48只随机分为4组:假手术组、缺血再灌注组、缺血后处理组及腺苷后适应组,每组12只,建立大鼠心肌缺血再灌注模型。光镜下观察心肌组织形态学改变;TTC染色计算各组大鼠心肌梗死面积;RT-PCR检测心肌NF-κB mRNA表达水平,ELISA测定组织中TNF-α及白细胞介素6(IL-6)含量。结果假手术组心肌组织无改变,缺血再灌注组心肌损伤较重,腺苷后适应组及缺血后处理组心肌组织病理学改变明显减轻。与缺血再灌注组比较,腺苷后适应组NF-κB mRNA的表达水平、心肌梗死面积及TNF-α与IL-6的含量明显降低(P<0.01);与缺血后处理组比较,腺苷后适应组NFκ-B mRNA表达及TNF-α、IL-6的分泌均下降(P<0.05)。NFκ-B mRNA的表达与心肌中TNF-α、IL-6浓度呈正相关(P<0.01)。结论腺苷后适应可抑制再灌注后心肌NF-κB的表达活化,从而通过促使炎性细胞因子TNFα-、IL-6分泌减少来减轻缺血再灌注损伤。     

慢病毒载体在大鼠颈动脉球囊损伤模型中的应用及观察

目的:研究携带绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)的慢病毒转染球囊损伤大鼠颈动脉的效率和可行性,为利用慢病毒载体介导的基因治疗预防血管再狭窄奠定基础。方法:将携带GFP的慢病毒载体(pGC-LV-GFP载体)和慢病毒包装质粒供转染293T细胞,完成慢病毒颗粒包装及滴度测定。包装产生的慢病毒Lenti-GFP转染至球囊损伤的大鼠颈动脉。术后28d,损伤及病毒转染血管段标本分别行荧光显微镜、光镜检查,评估慢病毒的转染效率及内膜增生情况,并与假手术组(Sham组)、PBS对照组进行比较。结果:经包装产生的Lenti-GFP滴度为2×109TU/mL;术后28d,Sham组与PBS组血管中膜弹力层仅见微弱的自发性绿色荧光,而Lenti-GFP组动脉壁全层可见较强的绿色荧光分布;PBS组与Lenti-GFP转染组大鼠损伤的颈动脉均可见明显内膜增生,内膜和中膜面积之比差异无统计学意义。结论:Lenti-GFP成功转染至球囊损伤的大鼠颈动脉,并能维持目的基因稳定长期的表达,是血管再狭窄基因治疗的理想载体。     

高迁移率蛋白B1对血管平滑肌细胞迁移的影响及分子机制研究

目的：探讨高迁移率蛋白B1（HMGB1）对血管平滑肌细胞（VSMCs）迁移的影响及 TLR4依赖的 TLR4／PI3K／Akt信号通路介导的分子机制。方法体外分离培养大鼠胸主动脉VSMCs ,采用不同浓度 HMGB1（0．1～1000．0 ng ／mL）处理,分为对照组（未经任何处理）、HMGB1组、HMGB1＋ TLR4 siRNA转染组、Control siRNA转染组和磷脂酰肌醇3‐激酶（PI3K）抑制剂（LY294002）干预组,观察各组细胞活性及 HMGB1对 VSMCs 迁移的影响;实时定量 RT‐PCR与 Western blot 分别检测TLR4、Akt、p‐Akt、PI3K mRNA和蛋白的表达;ELISA测定PI3K的活性。结果 HMGB1（0．1～1000．0 ng／mL）呈剂量依赖性促进VSMCs迁移（P＜ 0．05）;经细胞活性测定,HMGB1在使用的浓度范围内对 VSMCs未造成细胞毒性作用（P＜ 0．05）;HMGB1（100 ng／mL）处理的 VSMCs细胞组 PI3K 活性及 Akt磷酸化水平明显增加（P＜ 0．05）;经 TLR4 siRNA 转染发现, HMGB1引起的VSMCs迁移明显减弱（P＜0．05）,同样在PI3k抑制剂干预组,PI3K／Akt途径活化和HMGB1介导的VSMCs迁移也被明显抑制（P＜0．05）。结论 HMGB1呈剂量依赖性促进VSMCs迁移,TLR4依赖的 TLR4／PI3K／Akt信号通路参与了此过程,提示以TLR4依赖的PI3K／Akt途径为靶点,可为阻塞性血管疾病的治疗提供新思路。     

小鼠腹水型肝癌(Hca)的生长规律及一般生物学特性的观察

小鼠腹水型肝癌(Hca)在昆明种小鼠腹腔内接种含10~6个活瘤细胞的0.1毫升的腹水稀释液,可获100%的成活率,无自行消退。腹水瘤细胞的增长可分为三个时期,即增长期(第1—3天)、高峰期(第4—8天)和递减期(第9天以后)。瘤细胞形态呈圆形,分大、中、小三类,核分裂在接种后前8天较为活跃。宿主寿命为11—28天,平均寿命22.3天,中间存活时间20.5天。在腹水瘤生长过程中见大量小淋巴细胞,吞噬细胞和多形核白细胞,以及淋巴细胞与巨噬细胞包围瘤细胞的现象,这是机体的免疫反应。本瘤株对抗癌药物环磷酰胺的作用较为敏感,其平均腹水量的抑制率为84.4%;延长宿主寿命的中间存活时间为133.3%。瘤细胞形态发生明显变化,出现“晖圆细胞”,“多核瘤巨细胞”及核分裂像大大减少等现象。     

亚硝胺诱发大鼠食管癌的一些特性以及癌变的病理学及组织发生学的观察

自从Druckrey等用亚硝胺类化合物诱发多种动物的食管癌和Plessis与Burrel等证实南非特兰斯开食管癌高发地区的浆果及食物中亚硝胺的存在以后,食管癌的发生与亚硝胺的关系受到重视。为了食管癌的病因学与发病学的研究以及癌变理论的探讨,我们在用亚硝胺诱发大鼠食管癌的过程中,观察了其特性,并对癌变的组织发生学加以探讨。     

二亚硝基哌嗪(DNP)诱发大鼠鼻咽癌的癌变过程中病理学与组织发生学的观察

本实验用DNP诱发Wistar大鼠鼻咽癌,平均发癌率为85％。我们将大鼠鼻咽上皮癌变过程中出现的各种病变分为4级14种组织学类型。根据各类病变在实验不同时期出现的比例和在鼻咽各部位的分布,发现单纯增生和不典型增生、单纯化生与不典型化生等病变与实验性鼻咽癌的发生有密切关系,特别是鳞状上皮化生与鼻咽癌的关系密切。我们观察到癌变过程中一些过渡性或伴随性病变,如内翻型丘状增生、外突型丘状增生、乳头状瘤和“棘层松解”等,在以往的实验性鼻咽癌文献中还未见有描述。