基于转录组测序技术探讨电针对脊髓损伤小鼠的抗炎作用及相关分子机制

目的:观察电针对脊髓损伤小鼠神经功能及病理形态的影响,从基因和生物信息学层面探讨电针对脊髓损伤小鼠的抗炎作用及相关分子机制。方法:雌性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组及电针组,每组24只。采用钳夹法制备脊髓损伤小鼠模型。电针组于造模后3 h电针双侧“足三里”“夹脊”,每次10 min,每日1次,连续14 d。采用Basso Mouse Scale(BMS)评分评估小鼠后肢运动功能变化;HE染色法观察脊髓损伤区病理形态;RNA-Seq技术筛选差异基因并进行生物信息学分析;采用荧光定量PCR和Western blot法验证部分差异基因的mRNA及蛋白的表达。结果:与假手术组相比,模型组BMS评分降低(P<0.05);HE染色显示模型组脊髓损伤区结构疏松紊乱,出现空洞,炎性细胞浸润严重,细胞核固缩,神经元坏死;模型组共筛选出565个差异基因(包括545个上调和20个下调),其中与炎性免疫相关的基因为脂肪酸结合蛋白4(Fabp4)、脂联素(Adipoq)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(Pck1),其mRNA表达量均显著升高(P<0.001),蛋白表达量亦显著升高(P<0...     

川芎嗪对脊髓损伤后小鼠神经保护作用的实验研究北大核心CSCD

探讨川芎嗪对脊髓损伤后小鼠的神经保护作用及机制。75只雌性C57BL/6小鼠随机分为5组,假手术组、模型组、川芎嗪低剂量组(25 mg·kg-1)、川芎嗪中剂量组(50 mg·kg-1)、川芎嗪高剂量组(100 mg·kg-1),每组15只,采用改良的Rivlin法建立小鼠急性脊髓损伤模型。川芎嗪干预14 d后,采用脊髓损伤评分标准(basso mouse scale,BMS)评分法及斜板实验对小鼠后肢运动功能进行评价。酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测脊髓匀浆中炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的水平。苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察脊髓组织学情况,尼氏染色观察神经元数目变化。通过蛋白免疫印迹法与免疫荧光法检测脊髓组织胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和补体C3蛋白的表达。川芎嗪治疗组对于小鼠脊髓损伤后的后肢运动功能有明显的改善,其中川芎嗪高剂量组BMS评分及斜板实验评分较模型组显著升高(P<0.01)。川芎嗪高剂量组脊髓匀浆中TNF-α、IL-6和IL-1β水平显著降低(P<0.01)。经川芎嗪治疗后脊髓形态有恢复,尼氏体数目明显增加且形态规则,神经元丢失减少。与模型组相比,川芎嗪高剂量组GFAP、C3蛋白表达明显减少(P<0.05,P<0.01)。综上,川芎嗪能促进脊髓损伤后小鼠运动功能的改善,发挥神经保护作用,其机制可能与抑制炎症反应、改善胶质瘢痕的过度增生有关。