热及酸碱处理对A.teichomyceticus FIM 68-66发酵液的影响

目的 为考察温度及酸碱对替考拉宁发酵液的影响.方法 采用加热和酸碱处理A.teichomyceticus FIM 68-66发酵液,以HPLC检测其替考拉宁含量.结果 结果表明热和酸处理显著降低发酵液中的替考拉宁含量,发酵液在不超60℃处理3h时或pH值不低于2.5处理0.5h,替考拉宁损失低于10%;而发酵液调节至pH 9.5-11.5处理2h,其替考拉宁含量明显提高.结论 本研究为替考拉宁提取工艺奠定基础.     

Eupenicillum sp.UN88胞内活性物质的分离纯化与结构鉴定

在筛选微生物来源代谢产物的过程中,分离到一株抗真菌活性强的正青霉Eupenicillum sp.UN88,采用溶媒浸提与结晶进行分离和纯化Eupenicillum sp.UN88的发酵产物,得到一个大环内酯类化合物UN88A。经理化性质研究和UV、MS、IR、1HNRM、13CNMR及DEPT及HSBC和HMQC等波谱分析,确定由Eupenicillum sp.UN88产生具有活性的次级代谢产物UN88A的化学结构与布雷菲尔德菌素A相同。     

FIM-0916菌株中代谢产物的抗菌活性及稳定性考察

目的：鉴定链霉菌Streptomyces sp.FIM-0916发酵液中的抗菌活性代谢产物并探讨其化合物的稳定性。方法采用大孔吸附柱层析、常压反相色谱、高效液相色谱等方法对FIM-0916菌株发酵液进行分离纯化,通过现代波谱分析对获得抗菌活性物质0916A进行鉴定,并考察其稳定性。结果从FIM-0916菌株发酵液中分离到1个环脂肽类化合物并具有相关抑菌活性,根据理化性质研究和波谱分析,证实该化合物与Amphomycin（安福霉素）同质,该化合物在在偏碱性水溶液、低温温度条件下稳定。结论从FIM-0916发酵液中分离得到环脂肽化合物0916A,与amphomycin同质,有机溶剂、pH、温度对0916A的稳定性具有重要影响。活性研究表明该化合物对革兰氏阳性菌如枯草芽孢杆菌、耐药金黄色葡萄球菌等具有明显的抑制活性。     

产利普斯他汀菌株Streptomyces toxytricini FIM-17-16发酵条件的优化

目的 Streptomyces toxytricini FIM-17-16菌株生物合成利普斯他汀发酵条件的优化。方法 采用单因素试验和正交设计实验相结合的方法,优化Streptomyces toxytricini FIM-17-16发酵培养基和发酵参数。结果 确定了适宜发酵培养基配方和发酵参数：葵花籽油7%,甘油2%,黄豆粉3.25%,麸皮1%,卵磷脂1%,硫酸锌0.01%,碳酸钙0.08%,初始pH自然,装料系数80mL/500mL,种龄20h,接种量15%,摇床转速230r/min,发酵温度28℃,发酵时间168h,产利普斯他汀的水平达到了9667μg/mL,提高了20.6%,发酵周期缩短24h。结论 经过优化发酵条件,S. toxytricini FIM-17-16生物合成利普斯他汀能力大幅提高,为该菌株的工业化生产奠定了基础。     

埃博霉素产生菌Myxobacteria sp．Ery1369的培养条件优化

对前期筛选得到的埃博霉素产生菌Myxobacteria sp．Ery1369,通过单因素筛选结合正交试验进行发酵培养基优化,同时对摇瓶发酵的主要影响因子温度、转速、初始pH等进行实验探讨,确定了最佳培养条件：土豆淀粉0．8％,酵母提取物0．5％,葡萄糖0．3％,CaCl2·2H200．05％,MSS04·7H200．15％,XAD-163％,初始pH值7．4,种子菌龄72h,500mL三角瓶装液量100mL,接种量20％,摇床转速200r·min^-1,发酵温度30℃;最佳发酵时间为8d,其埃博霉素B产量相比对照提高45％以上,为埃博霉素的工业化生产奠定基础。     

N-CWS对小鼠皮肤创伤愈合的影响#br#

目的 探讨红色诺卡菌细胞壁骨架(N-CWS)对小鼠皮肤创伤愈合的影响。方法 建立小鼠背部皮肤创伤模型,观察小鼠伤口愈合时间和愈合率,HE染色观察创面组织学的变化,免疫组织化学染色法检测血管内皮生长因子(VEGF)和血小板源性生长因子(PDGF)的变化。结果 与空白组比较,N-CWS能明显提高小鼠创伤愈合速度和愈合率(P<0.05或P<0.01)。HE染色显示N-CWS组毛细血管和胶原纤维增生明显,表皮再生完全。免疫组织化学染色显示,5d时N-CWS组VEGF表达水平明显高于空白组(P<0.05),与对照组差异无统计学意义(P＞0.05);7d时N-CWS组PDGF表达水平明显高于空白组(P<0.05),低于对照组的表达水平。结论 N-CWS在创伤修复愈合过程中起明显促进作用,可能与适度调节VEGF和PDGF生长因子表达有关。     

沙棘籽渣黄酮类化合物诱导人肝癌细胞凋亡研究

目的：探讨沙棘籽渣黄酮类化合物(FSH)对人肝癌细胞BEL-7402的抑制和诱导凋亡作用。方法：采用SRB观察FSH对人肝癌细胞BEL-7402的生长抑制作用，采用wright染色、透射电镜和流式细胞术检测FSH对BEL-7402细胞的促凋亡作用。结果：200～1200μg／ml FSH能够剂量依赖性地抑制BEL-7402细胞的增殖，wright染色观察到凋亡小体，透射电镜下发生染色质边集，流式细胞术检测出现亚二倍体峰。结论：FSH能够抑制BEL-7402的生长并能诱导细胞凋亡。     

蒺藜皂苷对肾癌细胞的实验影响

目的:探讨蒺藜皂苷(简称STT)对体外培养的肾癌细胞(786-O)的影响及其抑癌机制。方法:应用MTT法、Wright染色及AO荧光染色法和流式细胞术(FCM)及结合免疫荧光分别测定STT对细胞的生长抑制作用,细胞凋亡的形态变化,细胞周期及Bcl-2蛋白表达的影响。结果:MTT法显示STT可对786-O产生明显的细胞毒作用;Wright染色及吖啶橙荧光染色法发现STT可诱导786-O在体外产生凋亡;STT可使786-O的S期细胞比例增多;STT能够降低786-O细胞的抗凋亡蛋白Bcl-2及细胞周期蛋白D1的表达。结论:STT对786-O细胞有明显的体外生长抑制作用,并通过影响细胞周期及下调Bcl-2蛋白表达而诱导细胞凋亡。     

蒺藜皂苷对人肝癌细胞BEL7402生长抑制和诱导凋亡作用的研究

目的 :探讨蒺藜皂苷 (STT)对体外培养的人肝癌细胞BEL-7402的增殖抑制作用及诱导凋亡作用。方法 :应用MTT与SRB法检测蒺藜皂苷对人肝癌细胞BEL-7402的抑制作用 ,采用形态学观察以及流式细胞术 (FCM)检测了STT诱导人肝癌细胞BEL-7402凋亡的效应 ,采用流式细胞术检测BEL-7402细胞Bcl-2蛋白表达。结果 :①STT能够剂量依赖地抑制人肝癌细胞BEL-7402的增殖 ;②细胞显现典型的凋亡形态学改变 ,FCM出现凋亡峰 ;③STT能降低BEL-7402细胞的Bcl-2蛋白表达。结论 :STT在体外能抑制BEL-7402细胞的增殖并能诱导细胞凋亡 ,其诱导凋亡作用的途径之一是下调Bcl-2蛋白表达。     

红色诺卡氏菌细胞壁骨架药膜的制备与含量测定

目的:制备红色诺卡氏菌细胞壁骨架(N-CWS)药膜并考察其含量测定方法。方法:以N-CWS为模型药物,壳聚糖、聚乙烯醇为成膜材料,通过溶液浇铸法制备N-CWS药膜;使用扫描电子显微镜(SEM)、红外光谱仪、万能试验机对药膜性能进行表征;采用柱前衍生化高效液相色谱法测定药膜中D-阿拉伯糖的含量,采用Kromasil C₁₈(150 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱,以50 mmol·L^-1(pH 7.0)磷酸盐缓冲液-乙腈(80∶20,v/v)为流动相,流速1.0 mL·min^-1,检测波长254 nm,柱温40℃。结果:当壳聚糖与聚乙烯醇质量比为3∶2,膜材与甘油质量比为1∶2时,断裂拉伸应变为136.67%,拉伸应力为2.47 mPa。扫描电镜观察到N-CWS主要分布在膜的底面,呈不对称分布;制备的药膜中D-阿拉伯糖在1.1～220μg·mL^-1范围内线性关系良好,平均加样回收率为99.5%,测得3批次药膜中D-阿拉伯糖分别为(0.988±0.041)mg·g^-1、(1....