阿尔茨海默病与胰岛素信号传导通路

胰岛素及其受体在中枢神经系统中广泛存在,与阿尔茨海默病的发生、发展密切相关。当胰岛素信号通路出现障碍时,会出现β淀粉样蛋白的异常折叠及tau蛋白的异常磷酸化,增加阿尔茨海默病的人群患病率。因此,研究胰岛素信号传导通路与阿尔茨海默病的关系,对寻求该疾病可能的潜在治疗靶点具有重要的意义。     

清心开窍方对APP/PS1双转基因小鼠海马区AKT/GSK3α/βapp/Aβ表达的影响

目的:探讨清心开窍方对APP/PS1双转基因小鼠海马AKT(protein kinase B,PKB,Akt)GSK3α(Glycogen synthase kinase 3α)、βAPP(β-amyloid precursor protein,βAPP)、Aβ(β-amyloid,Aβ)表达的影响。方法:选取60只APP/PS1双转基因小鼠,按随机数字表法随机分为模型组、多奈哌齐组(1.67 mg/kg)、清心开窍方高剂量组(19 mg·kg~(-1)·d~(-1)),清心开窍方中剂量组(9.5 mg·kg~(-1)·d~(-1)),清心开窍方低剂量组(4.75 mg·kg~(-1)·d~(-1)),另选取同背景同性别C57BL/6J小鼠为对照组,对照组、模型组给予等量生理盐水灌胃,各组每天干预1次,连续灌胃12周。RT-PCR检测AKT、GSK3α、βAPP、AβmRNA的表达,Western Blot法检测AKT、GSK3α、βAPP、Aβ蛋白表达量,硫磺素T染色法测定小鼠大脑皮层及海马区老年斑的数量。结果:实时荧光定量PCR和Western Blot结果显示,模型组中GSK3α、βAPP、AβmRNA的表达最高,与对照组及其他各组相比有统计学意义(P0.05或P0.01),且其表达量随清心开窍方剂量的增加而减少;模型组中AKT的表达量最低,与对照组及其他各组相比有统计学意义(P0.05或P0.01),且其表达量随清心开窍方剂量的增加而增加。硫磺素T染色结果显示,模型组中老年斑数量最多,与对照组及其他各组相比有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论:清心开窍方能够促进APP/PS1双转基因小鼠脑内AKT的表达,并减少GSK3α、βAPP和Aβ的表达,减少APP/PS1双转基因小鼠脑内皮质及海马区的老年斑数量。     

清心开窍方对Aβ_(25-35)诱导原代海马神经元损伤IGF-1R、IRS-1及Aβ mRNA表达的影响

目的:研究清心开窍方对Aβ_(25-35)诱导原代海马神经元细胞损伤胰岛素样生长因子1受体(insulinlike growth factor 1 receptor,IGF-1R)、胰岛素受体底物蛋白1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)及β-淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)基因表达的影响,探讨清心开窍方对神经元细胞的保护作用及其机制。方法:制备SD乳鼠原代海马神经元细胞,分为6组:正常对照组、模型组、尼莫地平组(1×107mol·L~(-1))、清心开窍方低、中、高剂量组(6.25、12.5、25 mg/m L)。支持培养至第7天,各治疗组分别给予相应药物预处理24 h后,模型组及各治疗组加入老化处理的Aβ_(25-35)(终浓度为10μmol·L~(-1))共同作用24 h,建立AD细胞模型。正常对照组给予相等体积的培养液继续孵育24 h。采用CCK-8法检测各组的细胞活力,RT-PCR法检测各组IGF-1R、IRS-1和AβmRNA的表达水平。结果:模型组与正常对照组比较细胞活性明显降低(P0.01),而清心开窍方能有效改善细胞活性;RT-PCR法结果显示模型组IGF-1R mRNA明显降低(P0.01),IRS-1和AβmRNA表达均明显增加(P0.01),而不同浓度的清心开窍方处理后均能提高IGF-1R mRNA的表达(P0.01或P0.05),减少IRS-1和AβmRNA表达(P0.01或P0.05)。结论:清心开窍方能减轻β-淀粉样蛋白对神经元细胞的毒性作用,提高细胞存活率,保护海马神经元细胞。     

单克隆抗体免疫亲和层析一步法纯化癌胚抗原

本文用特异性抗癌胚抗原的单克隆抗体,经与CNBr—Sepha?ose4B偶联,以100mmol/L二乙胺pH11.5洗脱亲和层析柱,一步法从NP—40可溶性的大肠腺癌组织提取物中纯化癌胚抗原。以SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western-Blotting鉴定了抗原纯度及活性。以微量固相免疫放射试验检测了抗原活性。     

基于数据挖掘探讨吕文亮教授治疗慢性胃炎的用药规律

目的 运用数据挖掘技术探讨吕文亮教授治疗慢性胃炎的用药规律。方法 采集吕文亮教授门诊医案作为数据来源,运用古今医案云平台V2.2.3系统集成的数据挖掘模块对医案处方进行频次、属性分析,聚类分析,关联分析及复杂网络分析。结果 纳入病案201则,处方201首,得出高频证型脾胃湿热证、脾胃不和证、脾胃气虚证等,高频药物蒲公英、麸炒白术、法半夏、瓦楞子、茯苓等,药性以温、平、寒为主,药味以辛、甘、苦为主,归经以脾胃、肝肺为主,关联分析出13组高度关联的中药药对,聚类分析出4大类组方,复杂网络分析得出核心药物组合。结论 吕文亮教授擅从湿热角度论治慢性胃炎,创新湿热伏邪、湿热致瘀等理论,基于温病方证体系总结出连朴饮方证、柴胡温胆汤方证、三仁汤方证等,同时在治疗上注重三焦同调,分消湿热、调畅气机以及截断扭转。