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目的 寻找一种方便快捷的鲜广地龙蛋白纯化方法,并探究其是否具有抗肺纤维化作用。方法 采用冷冻干燥法对鲜广地龙进行粗提取,再用分子排阻色谱分离纯化得到纯化蛋白(P2),并质谱分析P2蛋白组成。细胞实验分组:C57BL/6小鼠24只,随机分3组(8只/组)。对照组、模型组(5 ng/mL TGF-β1处理)、SB431542组(2 μmol/L)和鲜广地龙纯化蛋白P2组(13.125 μg/mL)。动物实验分组:对照组(不处理)、模型组(博来霉素处理)、博来霉素+鲜广地龙纯化蛋白P2(5 mg/mL)。造模后给药21 d,在第22天进行取材。采用CCK8-法检测P2对MRC-5细胞的细胞毒性和肌成纤维细胞异常增殖的抑制;流式细胞术检验其对肌成纤维细胞的凋亡;HE 和 Massson 染色观察其对肺组织的病理学变化;RT-PCR、Western blot 检测其对α-SMA、Vimentin、E-cadherin和Collagen I的调节;机制方面通过检验P2对Smad2/3及P-Smad2/3的调节作用,进而证明其可通过TGF-β/Smad通路起到抗肺纤维化作用。结果 通过分子排阻色谱法可方便、稳定得到鲜广地龙纯化蛋白P2。体外实验显示P2具有抑制肌成纤维细胞的作用(P<0.01),降低纤维化模型中α-SMA、Vimentin和Collagen I的表达(P<0.001或P<0.01),升高E-cadherin的表达(P<0.01),可抑制Smad2/3和P-Smad2/3的表达(P<0.001或P<0.01)。体内实验显示,P2可降低HE染色中炎症细胞的数量以及Masson染色中蓝色的胶原纤维区域。结论 运用分子排阻色谱可较为理想的获得鲜广地龙纯化蛋白P2,且其可通过调节TGF-β/Smad通路抑制肺纤维化进程。  相似文献   
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细胞释放到胞外空间的核苷酸称为胞外核苷酸,其浓度受多种水解酶调节,不同浓度的胞外核苷酸作用不同.胞外核苷酸及其衍生核苷与不同的嘌呤受体结合,激活复杂的信号传导网络,参与调控多种生理和病理过程,特别是胞外三磷酸腺苷(ATP)是免疫应答的关键介质,作为重要动态信号参与调控过程.本文综述了胞外核苷酸对巨噬细胞、树突状细胞(D...  相似文献   
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淡豆豉由豆豉演变而来,是我国发酵中药和药食同源中药的代表,具有养生保健的优势,被广泛应用于医药及食品领域。随着现代生物医药领域的发展及肠道相关研究的不断深入,肠道菌群与慢病的相关性被逐渐探明,淡豆豉因具有优质益生元的健康属性而备受关注,同时也为豆豉等大豆发酵食品带来了良好的发展契机。综述了淡豆豉的研究概况,并梳理了以淡豆豉药理药效和传统发酵工艺思路为参考的新型食用豆豉研究进展,以期为开发出兼具安全与美味的新型食用豆豉等大众接受度高的大豆健康产品及相关应用研究提供参考。  相似文献   
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