脂质过氧化对人血管内皮细胞NO合成的影响及维生素E的作用

一、材料与方法1.细胞培养 :人脐静脉内皮细胞 (ＨＵＶＥＣ)培养采用本实验室改进的Ｊａｆｆｅ培养法。经免疫荧光检测第Ⅷ因子相关抗原阳性 ,鉴定为血管内皮细胞。2 .实验分组 :分 8组 ,第 1组为正常对照组 ;第 2组为氢过氧化枯烯 0 0 1ｍｍｏｌ/Ｌ ;第 3组为氢过氧化枯烯 0 0 5ｍｍｏｌ/Ｌ ;第 4组为氢过氧化枯烯 0 10ｍｍｏｌ/Ｌ ;第 5组为氢过氧化枯烯 0 5 0ｍｍｏｌ/Ｌ ;第 6组为氢过氧化枯烯 1 0 0ｍｍｏｌ/Ｌ ;第 7组为氢过氧化枯烯 0 5 0ｍｍｏｌ/Ｌ +维生素Ｅ(ＶｉｔＥ) 5 0ｍｇ/Ｌ ;第 8组为氢过氧化枯烯 1 0 0ｍｍｏｌ/Ｌ +…     

脂质过氧化对人内皮细胞的损伤及抗氧化剂的保护作用

以氢过氧化估烯作为培养人内皮细胞脂质过氧化反应的引发剂，以亚硒酸钠、维生素E、超氧化物歧化酶作为抗氧剂，应用光镜、脂质过氧化物测定及放射免疫分析等方法观察了抗氧剂对脂质过氧化损伤的内皮细胞形态结构和功能的保护作用。结果表明：氢过氧化枯烯激发和促进了内皮细胞的脂质过氧化反应；而硒、维生素E、超氧化物歧化酶使细胞脂质过氧化物含量减少，由过氧化作用造成的细胞收缩、生物膜系统的损伤程度减轻，对细胞前列腺素（PGI2）合成的抑制作用减弱。提示：上述抗氧剂可能通过对内皮细胞的保护作用，阻止动脉粥样硬化病变的形成和发展。     

不同富集培养方法对噬菌体PEf771的滴度影响

目的 对比3种不同富集培养方法对噬菌体PEf771的滴度影响,探讨有效提高噬菌体PEf771滴度的方法。方法 通过噬菌体PEf771/粪肠球菌E. faecalis YN771比例法、挖斑法和丝裂霉素C诱导法在E.faecalis YN771不同生长时期加入PEf771原液进行富集,来获得较高的PEf771的滴度。结果 PEf771/E.faecalis YN771=1∶3和挖斑法得出的PEf771的滴度较高,将这2种方法扩大培养后无明显差异（P> 0.05）,且在24 h滴度达108 pfu/mL。丝裂霉素C诱导法未能明显提高PEf771的滴度。通过在E. faecalis YN771生长早期（OD600=0.3）和对数期（OD600=1）加入PEf771进行富集培养,前者培养6 h滴度高达1010 pfu/ml,24 h滴度仍保持1010 pfu/ml,达到了理想滴度。结论 在E. faecalis YN771培养早期（OD600=0.3）加入PEf771以噬菌体/菌=1∶3的方法或挖斑法富集培养可有效提高PEf771的滴度,为研究E.faecalis YN771的噬菌体PE...     

丙丁酚的药理作用及临床应用研究新进展

丙丁酚具有调血脂、抗氧化、抗炎、改善内皮细胞功能、抑制血管内膜增生等作用,在防治心血管疾病和糖尿病等方面有广阔的应用前景。笔者对其药理研究及临床应用进行综述。     

三阴性乳腺癌中PD-1、PD-L1的表达与肿瘤浸润性淋巴细胞及临床病理指标的相关性

目的:分析三阴性乳腺癌样本中PD-1、PD-L1的表达水平及其与肿瘤浸润性淋巴细胞及临床病理指标的相关性,探讨其临床意义。方法:免疫组织化学法检测132例乳腺浸润性导管癌患者样本中PD-1、PD-L1、CD4及CD8的表达情况;苏木精-伊红染色后计数癌间质中肿瘤浸润性淋巴细胞个数;回顾性分析病理报告中各项临床病理指标并随访患者预后。分析PD-1、PD-L1在三阴组和非三阴组中表达的差异,以及其与各指标之间的相关性。结果:相较于非三阴组,三阴性乳腺癌中PD-1（P=0.034）及PD-L1（P=0.037）高表达;三阴性乳腺癌中PD-1的表达与肿瘤浸润性淋巴细胞个数（P=0.015）、CD4表达（P=0.001）、ki-67指数（P=0.012）、淋巴结转移（P=0.027）、脉管癌栓（P=0.009）呈正相关,与月经初潮时间（P=0.031）呈负相关;PD-L1的表达与肿瘤浸润性淋巴细胞个数（P=0.022）、CD4表达（P=0.004）、 CD8表达（P=0.037）、ki-67指数（P=0.013）、体质量指数（P=0.004）、乳腺手术史或外伤史（P=0.029）呈正相关。结论:PD-1及PD-L1在三阴性乳腺癌中的表达水平显著高于非三阴组,其表达与肿瘤浸润性淋巴细胞的数目及分型相关,并与多种临床病理指标具有明确的相关性,提示PD-1、PD-L1及肿瘤浸润性淋巴细胞可以作为三阴性乳腺癌的诊断及预后评估的重要指标。     

姜黄素对肺癌细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用

目的研究姜黄素对人肺腺癌细胞A2的生长抑制及诱导凋亡作用,探讨其分子机制。方法通过溴化二甲噻唑二苯四氮唑(MTT)比色法检测姜黄素对肺癌A2细胞体外增殖的影响;通过Annexin V-PI染色法的流式细胞术和琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡变化;Western blot法检测凋亡相关蛋白的变化。结果姜黄素能明显抑制肺癌A2细胞的体外生长,且呈时间与剂量依赖性,将量效关系进行直线回归,得到体外增殖的半数抑制浓度(IC50)为40μmol/l。流式细胞分析仪结果显示随姜黄素作用时间的延长肺癌A2细胞凋亡率由1.64%增至21.05%;琼脂糖凝胶电泳检测姜黄素作用48h后DNA降解成规则的大片段出现凋亡特有的"梯状"条带即典型的DNA ladder。Western blot结果显示随姜黄素作用时间的延长Survivin蛋白表达水平明显下降,具有统计学意义(P<0.01)。结论姜黄素能抑制肺癌细胞的生长并诱导其凋亡,此作用是通过下调Survivin蛋白表达实现的,这可能是姜黄素诱导凋亡的又一机制。     

ICU院内假丝酵母菌血症的临床特点及预后的多因素分析

目的 探讨ICU院内假丝酵母菌血症的临床特点及影响预后的因素.方法 收集2001-2008年医院ICU院内获得性假丝酵母菌血症107例进行回顾性分析,根据预后分为死亡组和生存组,运用多因素logistic回归分析来研究假丝酵母菌血症临床和主要生化指标与预后的关系.结果 107例患者血培养共分离出110株假丝酵母菌属,非白色假丝酵母菌比例高达70.91%,氟康唑对非白色假丝酵母菌敏感率低,死亡率43.52%;多因素logistic回归分析显示,出现感染性休克,合并细菌血症,升高的血清肌酐及SOFA评分＞10分,MODS评分＞9分是死亡的独立危险因素.结论 ICU院内获得性假丝酵母菌血症致病菌株以非白色假丝酵母菌为主,对氟康唑的耐药性增加,死亡率高,加强对上述危险因素的监测及真菌药敏监测,及时、合理使用抗真菌药物治疗可以改善假丝酵母菌血症的预后.     

Western blot法检测CIN宫颈液基细胞残液中HPV16、18E6感染的临床意义

目的：探讨免疫印记法（Western blot）检测子宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasis，CIN）宫颈液基细胞残液中人乳头状瘤病毒（human papillomaviruses，HPV）16、18E6感染的临床意义。方法：采用Westem blot法检测经病理证实的86例CLN和14例慢性宫颈炎的宫颈液基细胞残液中HPV16、18E6的感染状况。结果：宫颈液基细胞残液中HPV16、18E6感染的阳性率分别为CINⅠ组33．3％（8／24）；CINⅡ组46．7％（14／30）；CINⅢ组59．3％（19／32）。慢性宫颈炎（对照组）阳性率7．1％（1／14）。CINⅠ组与对照组比较差异无显著性（P＞0．05），CINⅡ组和CINⅢ组与对照组比较均有统计学差异（P＜0．05）。结论：Westem blot法检测CIN患者宫颈液基细胞残液中HPV16、18E6感染可以补充细胞学检查结果，对预防宫颈癌发生及降低其死亡率有重要意义。     

昆明地区不同人群对HIV/AIDS患者的态度及行为调查

艾滋病(AIDS)由于传播快，流行广，病死率高，现已成为全球性的公共卫生问题。对昆明地区不同人群对艾滋病病毒(HIV)／AIDS患者的态度及行为进行了调查，现报告如下。