三元复合因子Net对c-fos基因转录的调节作用

Net是三元复合因子家族中的一员,是一种重要的转录调节因子,尤其对原癌基因c-fos的转录具有重要的调节作用,而c-fos基因与细胞的增殖、分化以及某些肿瘤的发生密切相关。c-fos启动子是Net的调节靶点,Net在c-fos启动子的血清反应元件上与血清反应因子结成三元复合体,从而实现其调节功能;且随着细胞内生物环境不同,其表现的调节功能亦不同。     

人类真核延伸因子1A2对胰腺癌细胞侵袭、转移能力的影响

目的 探讨外源性人类真核延伸因子(EEF)1A2基因导入人胰腺癌SW1990细胞株后.细胞侵袭转移能力的改变.方法 应用腺病毒载体将EEF1A2基因导入人胰腺癌SW1990细胞中,采用划痕实验、Transwell小室、细胞粘附实验检测转染前后细胞运动、侵袭、转移及粘附能力的改变.结果 Ad5/F35-EEF1A2转染后继续培养48 h的SW1990细胞,可见预期大小的特异性条带.实验组24 h后细胞迁移率为(74.43±2.12)%,与阴性对照组和空白对照组比较差异有统计学意义[(44.08±5.92)%和(48.09±3.54)%,P＜0.05].实验组48 h后穿膜细胞数为(65.42±8.24)个,与阴性对照组和空白对照组相比差异有统计学意义[(20.10±5.82)个和(23.25±5.23)个,P＜0.05].实验组48 h后穿膜细胞数为(61.30±5.68)个,与阴性对照组和空白对照组相比差异有统计学意义[(32.04±3.60)个和(32.33±2.51)个,P＜0.05],且对Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅳ型胶原、纤维结合蛋白、粘蛋白的粘附力增强(P＜0.05).结论 腺病毒介导的EEF1A2高表达能明显增强胰腺癌SW1990细胞的运动、侵袭、转移及粘附能力.提示EEF1A2可能通过改变胰腺癌细胞的生物学特性影响胰腺癌的发生发展.     

利用科学发现解决临床问题——胆汁相关性疾病的思考

Paumgartner教授一文非常值得我们青年肝脏病医生一读。他将自己从医50年迂回于科学发现与临床实践之间的体会作了生动而精辟的阐述。青年医生和学者从中可学到,要成为一名有作为的医者,切忌浮躁,要脚踏实地深入研究,一定能跨越科学发现与临床实践两者间的鸿沟。     

三元复合因子Net嵌合型重组腺病毒载体的构建及鉴定

目的:克隆人三元复合因子Net全长基因,构建其重组腺病毒载体。方法 :抽提正常人胰腺组织中总RNA,经RT-PCR扩增出全长Net基因,利用同源重组的方法将腺病毒骨架质粒pBHG35和穿梭质粒pDC316-Net共转染293细胞,获得腺病毒重组质粒Ad5/F35-Net,在293细胞中包装和扩增后,获得高滴度的腺病毒重组质粒Ad5/F35-Net。采用PCR和蛋白印迹法检测Net基因的表达。结果 :用RT-PCR方法 ,从人胰腺癌组织中扩增出1224 bp的cDNA片段,经测序证实为人Net基因。最终构建及包装出高滴度的重组腺病毒载体Ad5/F35-Net。结论:成功克隆了人Net全长基因,并构建其重组腺病毒表达载体,为进一步研究人Net基因在相关肿瘤疾病中的生物学作用奠定了基础。     

退黄汤对实验性胆汁瘀积大鼠肝组织病理变化的影响

目的观察退黄汤对实验性胆汁瘀积大鼠肝组织病理变化的影响。方法选择SD大鼠48只，随机分为正常对照组、模型组、退黄汤低剂量、等剂量及高剂量实验组和门冬氨酸钾镁口服液阳性对照组，各实验组和阳性对照组连续灌胃给药7d后，ANTI诱发胆汁瘀积模型，48h后取各组大鼠肝脏右叶，经10％福尔马林固定、切片、HE染色，光镜下观察，并对肝组织病变程度作半定量分析；同时分别取正常组、模型组、低剂量组及等剂量组少量肝组织，戊二醛固定、切片，电镜下观察。结果与模型组比较，各实验组及口服液组病变程度均极显著好转（P〈0．01）；与低剂量组比较，等剂量及高剂量组病变程度明显减轻（P〈0．05）；等剂量组及高剂量组与门冬口服液组比较均无显著性差异（P〉0．05）。结论退黄汤能显著改善实验性胆汁瘀积大鼠肝组织病理变化，效果与门冬口服液相当。     

三元复合因子Net对人胰腺癌细胞株BxPC3增殖的影响

目的 研究三元复合因子Net转染人胰腺癌细胞株BxPC后的表达状态及对原癌基因C-fos表达的影响.方法 采用脂质体2000将重组人pEGFP-Net质粒和空质粒pEGFP转染人胰腺癌BxPC3细胞株,建立稳定高表达Net的细胞系.应用MTr、流式细胞仪等方法检测胰腺癌细胞的增殖,应用实时定量PCR和Western blotting检测Net及c-fos mRNA和蛋白的表达.结果 BxPC3细胞低表达Net,转染pEGFP-Net后稳定高表达Net,并抑制c-fos的表达.转染pEGFP-Net的细胞生长缓慢,转染后第3、5、7天的抑制率分别为38.8%、55.3%、56.9%,显著高于空质粒转染组的5.1%、12.4%、8.6%(P<0.05);G_0/G_1期细胞占(61.8 ±5.7)%,显著高于空质粒转染组的(45.1 ±3.4)%.结论 三元复合因子Net能抑制人胰腺癌BxPC3细胞的增殖,其机制可能与抑制c-los表达有关.     

中药治疗母儿血型不合引起反复自然流产32例

目的 :观察清热类中药 ,配伍利湿类中药组方 ,对母儿血型不合引起的反复自然流产患者的作用及对血清抗体、外周血 T淋巴细胞亚群 ( Ts、Th、Th/Ts)的影响。方法 :32例母儿血型不合引起的反复自然流产患者作为治疗组 ;2 0例正常孕妇作为对照组。在妊娠 40 - 60 d时测定血清抗体效价及外周血 T淋巴细胞亚群。治疗组 31例患者服用益黄汤 (生地、白芍、黄芩、丹参、益母草等 )前后 ,观察治疗前后保胎的效果、血清抗体及 T淋巴细胞亚群的变化。结果 :治疗组保胎成功率为 96.8% ;抗体效价下降明显 ;外周血 Th下降 ,Ts明显上升 ,Th/Ts基本正常。提示 :益黄汤治疗母儿血型不合引起的反复自然流产疗效显著 ,可降低血清抗体效价 ,使 Th活性下降 ,Ts活性明显上升 ,Th/Ts比值正常。提示益黄汤是通过调节机体的免疫功能与状态 ,而达到保胎的成功     

三元复合因子Net对c-fos基因转录的调节作用

Net是三元复合因子家族中的一员,是一种重要的转录调节因子,尤其对原癌基因c-fos的转录具有重要的调节作用,而c-fos基因与细胞的增殖、分化以及某些肿瘤的发生密切相关.c-fos启动子是Net的调节靶点,Net在c-fos启动子的血清反应元件上与血清反应因子结成三元复合体,从而实现其调节功能;且随着细胞内生物环境不同,其表现的调节功能亦不同.     

降低白炭黑厂包装作业点粉尘浓度的综合控制措施

我市某公司于1998年投资7 000万元新建一白炭黑厂,2000年3月投产.白炭黑粒径1 μm左右,产品中SiO2含量≥96%、水含量≤1%. 在对初步设计进行职业安全卫生审查时,我们认为该厂主要职业危害是包装点的粉尘,其SiO2含量高、粒径小、相对比重较轻,极易弥漫,故危害性很大.对于该包装点粉尘污染的控制,我们提出了两条意见:(1)采用高质量的包装机;(2)在包装点设通风除尘设施;(3)单独设包装间.     

土贝母皂甙对大鼠前列腺增生模型影响的实验研究

目的　探讨中药土贝母对前列腺增生 (BPH)的影响及作用机制。方法　将 4 0只SD大鼠去势 7天后皮下注射丙酸睾酮 5mg/kg,同时土贝母大、小剂量组分别腹腔注射土贝母注射液 4mg/kg、2mg/kg ,前列通瘀胶囊组给前列通瘀胶囊溶液 10 0mg/kg。于给药 30天后处死 ,观察前列腺重量和组织细胞结构改变 ,并通过免疫组化法检测PCNA和bFGF表达的变化。结果　 3个治疗组大鼠前列腺重量、PCNA指数及bFGF表达水平均明显低于模型组 ,其中尤以土贝母大剂量组最为明显 (P <0 .0 1)。土贝母大剂量组与前列通瘀胶囊组比较差异亦有显著性 ,而土贝母小剂量组与前列通瘀胶囊组比较差异无显著意义。结论　土贝母能明显抑制模型大鼠的BPH ,其机制可能是通过抑制前列腺细胞的增殖及减少前列腺组织中bFGF的表达而实现的。