基于网络药理学研究一贯煎治疗肝纤维化的有效成分及作用机制

背景 中药复方具有多成分综合调节的特点,在肝纤维化防治中显示出独特的优势.一贯煎始载于魏之琇所著《续名医类案》,是滋阴疏肝的著名方剂,能够改善肝纤维化症状,研究其抗肝纤维化机制有助于药物开发和推广.目的 通过网络药理学探究一贯煎治疗肝纤维化的机制并实验验证.方法 利用文献和TCMSP数据库收集一贯煎成分及靶点,GeneCard、OMIM数据库收集肝纤维化疾病靶点.通过STRING数据库构建一贯煎-肝纤维化蛋白互作网络(protein-protein interaction, PPI)子网络,应用重启随机游走算法获得关键基因,通过DAVID数据库进行基因本体(gene ontology, GO)富集分析及京都基因和基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析.动物实验验证,18只SD大鼠随机分为正常组、模型组、一贯煎组.模型组、一贯煎组大鼠采用腹腔注射50%四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)橄榄油溶液造模6周,正常组注射等量橄榄油.造模结束后一贯煎组每天灌胃一贯煎溶液(6.67 g/kg)共...     

一贯煎联合骨髓间充质干细胞调控RhoA/ROCK1通路抑制大鼠肝纤维化的实验研究

目的：探究一贯煎联合骨髓间充质干细胞在治疗肝纤维化过程中对RhoA/ROCK1通路的作用。方法：将72只SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、秋水仙碱组、一贯煎高剂量组、一贯煎中剂量组、一贯煎低剂量组、干细胞组、一贯煎+干细胞组;四氯化碳腹腔注射6周制备肝纤维化动物模型,干预4周后取材。记录大鼠阴虚表征情况;检测血清谷丙转氨酶（GPT）、谷草转氨酶（GOT）含量;HE、Masson染色观察病理改变;实时PCR、蛋白质印迹法检测肝组织中RhoA、Rho相关激酶1（ROCK1）、α-SMA和COL-1 mRNA及蛋白表达;IHC检测α-SMA、COL-1阳性面积。结果：与正常对照组比较,模型对照组大鼠具有明显阴虚表征,肝脏出现明显炎症浸润和纤维增生,肝组织RhoA、ROCK1、α-SMA、胶原蛋白-1(COL-1)mRNA与蛋白表达显著升高（P<0.05）,α-SMA、COL-1阳性面积显著增加（P<0.05）;与模型对照组比较,一贯煎高剂量组、一贯煎中剂量组、一贯煎低剂量组、骨髓干细胞、一贯煎+干细胞组大鼠的阴虚表征、肝脏炎症和纤维化程度减轻,RhoA、ROCK1、α-SMA和COL-1 mRNA与蛋白表达显著降低（P<0.05）,α-SMA、COL-1阳性面积显著减少（P<0.05）,其中一贯煎+干细胞组较一贯煎中剂量组、干细胞组效果更优（P<0.05）。结论：一贯煎与骨髓干细胞可通过调控RhoA/ROCK1通路抑制肝星状细胞活化从而发挥抗纤维化的作用,二者协同作用效果优于各自单独作用效果。