微小RNA-185对前列腺癌细胞侵袭能力的影响及其机制

目的:观察前列腺癌(PC)细胞(DU145)中miR-185对活化素受体样激酶4(ALK4)基因的调控作用,及其对前列腺癌细胞侵袭能力的影响。方法:收集河北省中医院泌尿外科2019年1月至2020年6月20例前列腺癌及其癌旁组织标本。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法检测前列腺癌组织中miR-185及ALK4基因的...     

益肾通络方抑制EGFR及下游信号途径对膜性肾病大鼠肾脏保护作用的研究

目的探究益肾通络方对膜性肾病大鼠肾组织表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)及足细胞和肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法 SD大鼠尾ⅳ阳离子牛血清白蛋白(cationic bovine serum albumin,C-BSA)建立膜性肾病大鼠模型,给予益肾通络方和盐酸贝那普利进行干预,检测各组大鼠24 h尿蛋白(urinetotal protein,UTP)、血清中白蛋白(albumin,ALB)和总胆固醇(total cholesterol,TC)水平;观察各组大鼠肾组织病理变化;采用TUNEL法检测各组大鼠肾组织足细胞和肾小管上皮细胞凋亡情况;采用免疫组化法检测各组大鼠肾组织磷酸化EGFR (p-EGFR)和剪切型半胱氨酸蛋白酶-3 (cleaved Caspase-3)的表达情况;采用Western blotting法检测各组大鼠肾组织p-EGFR、Ras相关的C3 肉毒素底物 1 (Ras-related C3 botulinum toxin substrate l,Racl)、c-jun、c-fos、FasL 和 cleaved Caspase-3 蛋白表达情况。结果与对照组比较,模型组大鼠24 h UTP以及血清中TC水平明显升高(P0.01),ALB水平显著降低(P0.01);肾小球基底膜、足细胞结构发生改变;肾组织足细胞和肾小管上皮细胞凋亡明显增多(P0.01);肾组织p-EGFR、Racl、c-jun、c-fos、FasL和cleaved Caspase-3蛋白表达水平显著升高(P0.01)。与模型组比较,益肾通络方中、高剂量组大鼠24 h UTP以及血清中TC水平明显降低(P0.01),ALB水平明显升高(P0.01);肾组织病理损伤得到改善;肾组织足细胞和肾小管上皮细胞凋亡明显减少(P0.05、0.01),肾组织p-EGFR、Racl、c-jun、c-fos、FasL和cleaved Caspase-3蛋白表达水平明显降低(P0.05、0.01)。结论益肾通络方可以减轻膜性肾病大鼠肾脏病理损伤,抑制肾组织足细胞和肾小管上皮细胞凋亡,其机制可能与抑制EGFR及下游Racl/c-jun、c-fos/FasL信号途径有关。     

益肾通络方下调ADAM17介导的EGFR表达干预膜性肾病肾小管上皮细胞凋亡研究

目的 探讨解整合素金属蛋白酶17（a disintegrin and metalloproteinase 17,ADAM17）介导的表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）激活与膜性肾病（membranous nephropathy,MN）肾小管上皮细胞凋亡的关系及益肾通络方的干预作用。方法 尾iv阳离子牛血清白蛋白（cationic bovine serum albumin,C-BSA）构建MN大鼠模型,给予益肾通络方干预4周。实验结束后观察大鼠肾脏病理变化和肾小管上皮细胞凋亡情况;采用Western blotting和qRT-PCR法检测肾组织ADAM17、肝素结合性表皮生长因子（heparin-binding epidermal growth factor,HB-EGF）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）以及磷酸化表皮生长因子受体（phosphorylated epidermal growth factor receptor,p-EGFR）蛋白及mRNA表达情况。结果 与对照组比较,模型组大鼠肾脏病理改变严重,肾小管上皮细胞凋亡增多（P<0.01）,肾组织ADAM17、p-EGFR、HB-EGF、TNF-α蛋白及mRNA表达显著升高（P<0.01）。与模型组相比,益肾通络方组大鼠肾脏病理有所改善,肾小管细胞凋亡减少（P<0.01）,肾组织ADAM17、EGFR、HB-EGF、TNF-α蛋白及mRNA表达显著降低（P<0.01）。结论 MN大鼠肾组织ADAM17表达增多,释放活化HB-EGFR、TNF-α增多,进而激活相应受体EGFR,EGFR活化进一步诱导肾小管上皮细胞凋亡及肾脏纤维化。益肾通络方可以通过降低MN大鼠肾组织剪切酶ADAM17表达,减少HB-EGFR、TNF-α的脱落活化,从而减少EGFR激活,以达到减少肾小管上皮细胞凋亡、延缓肾脏纤维化的作用。     

青蒿素及其衍生物在肾病领域中作用机制的研究进展

青蒿治疗疟疾已有1600多年的历史,青蒿素是从黄花蒿Artemisia annua茎叶中提取的含过氧基团的倍半萜内酯,已成为一个全新的天然抗疟药。青蒿素及其衍生物(双氢青蒿素、青蒿琥酯、蒿甲醚)因其确切的抗疟效果走向世界,随之越来越多的潜在药理活性被发掘,如抗菌、杀虫、抗炎、抗癌、免疫调节等活性。近年来随着对青蒿素及其衍生物的研究和探索,发现其能通过调节多种信号通路、抗氧化应激以及调节激素受体和CD4~+T细胞亚群分化等途径治疗狼疮性肾炎、免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA)肾病、糖尿病肾病、膜性肾病、肾纤维化及急性肾损伤,使其成为慢性肾脏病领域极具开发潜力的药物。     

微小RNA-384通过调节己糖激酶2抑制人肝癌细胞的增殖

目的探讨在人肝癌细胞中微小RNA(microRNA,miR)-384对己糖激酶2(HK2)的调节机制。方法应用荧光定量聚合酶链反应(PCR)的方法检测43例肝癌组织及癌旁组织中miR-384和HK2基因的表达水平,分为肝癌组织组及癌旁组织组;利用双荧光素酶报告基因实验验证miR-384与HK23’端非编码区(3’UTR)的具体结合位点,分为miR-384模拟物(mimics)组,空白对照(NC)组和HK2短发夹核糖核酸(shRNA)组;利用细胞计数试剂盒(CCK-8)实验观察miR-384和HK2对肝癌细胞HepG2(购自中国科学院上海细胞库)增殖能力的影响;采用挽救实验进一步验证HK2基因是否可以逆转miR-384对HepG2细胞增殖的调控作用。两样本均数间比较采用t检验。结果肝癌组miR-384表达水平低于癌旁组织组(0.42±0.07比1.11±0.06,t=18.210,P<0.01),差异有统计学意义,肝癌组HK2含量高于癌旁组织组(2.02±0.15比1.51±0.13,t=13.320,P<0.01),差异有统计学意义;miR-384 mimics与HK23’UTR-wt共转染组荧光素酶活性低于对照组(0.34±0.03比0.21±0.01,t=12.140,P<0.05),差异有统计学意义。而miR-384 mimics与HK2-3’UTR-mut共转染组荧光素酶活与对照组比较,差异无统计学意义(0.22±0.03比0.21±0.01,t=1.140,P>0.05)。转染miR-384 mimics组HK2的mRNA表达水平低于对照组(1.62±0.17比2.11±0.12,t=6.304,P<0.01),差异有统计学意义。CCK-8实验分析结果显示,miR-384 mimics组HepG2细胞的增殖能力低于对照组(0.82±0.07比1.31±0.11,t=2.941,P<0.01),差异有统计学意义。同样,HK2 shRNA组HepG2细胞的增殖能力也低于对照组(0.85±0.07比1.32±0.11,t=2.424,P<0.01),差异有统计学意义。miR-384 mimics和HK2过表达质粒共转染组HepG2细胞的增殖能力与NC组比较,差异无统计学意义(1.32±0.02比1.32±0.14,t=1.040,P>0.05)。结论miR-384可通过靶向调控HK2的表达,抑制HepG2细胞的增殖能力。     

双氢青蒿素对非细菌性慢性前列腺炎模型大鼠前列腺组织凋亡、自噬及纤维化的影响北大核心CSCD

目的:探究双氢青蒿素(DHA)对非细菌性慢性前列腺炎(CNP)模型大鼠炎症和纤维化的治疗作用及对CNP大鼠前列腺组织细胞凋亡和自噬的影响。方法:6周龄健康雄性SPF级SD大鼠分为5组:空白组、模型组、40 mg/kg DHA组、20 mg/kg DHA组和前列康(QLK)组,每组6只,除空白组外,其余组大鼠均通过手术结扎建立CNP模型。两个DHA组每天灌胃40、20 mg/kg DHA,QLK组每天灌胃0.5 g/kg前列康片,连续治疗1个月。ELISA检测前列腺组织特异性抗原(PSA)含量,显微镜观察白细胞数,RT-qPCR检测IFN-γ、IL-4和COX2 mRNA表达,IHC检测TGF-β1、CTGF表达,Masson染色检测纤维化程度,TUNEL染色检测前列腺细胞凋亡,Western blot检测Cleaved-caspase-3、Cleaved-caspase-9、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达。结果:40、20 mg/kg DHA和QLK均能显著降低CNP大鼠前列腺组织PSA水平和白细胞数,改善前列腺组织纤维化,并减少前列腺细胞凋亡。40 mg/kg DHA和QLK显著减少CNP大鼠前列腺组织IFN-γ和COX2 mRNA表达,增加IL-4 mRNA表达,但20 mg/kg DHA对CNP大鼠前列腺IFN-γ、COX2和IL-4 mRNA表达无显著影响。20、40 mg/kg DHA均能显著下调Cleaved-caspase-3、Cleaved-caspase-9、Beclin-1和LC3Ⅱ/Ⅰ表达。结论:DHA对CNP具有显著抗炎和抗纤维化活性,能抑制CNP大鼠前列腺组织细胞凋亡和自噬,减轻炎症反应。     

补中益气汤联合中药外敷治疗小儿遗尿症50例

目的观察内服补中益气汤联合中药外敷神阙穴治疗小儿遗尿症的临床疗效。方法选择小儿遗尿症患儿100例,随机分成两组,各50例。治疗组采用补中益气汤联合中药外敷神阙穴治疗,对照组单纯采用补中益气汤治疗,观察并比较两组患儿的临床疗效及症状积分情况。结果治疗组总有效率及症状积分改善情况均明显优于对照组(P<0.05)。结论内服补中益气汤联合中药外敷神阙穴治疗小儿遗尿症,可显著改善患儿临床症状,疗效较好,值得临床推广。     

益心舒胶囊治疗心脏神经官能症临床观察

目的对益心舒胶囊治疗心脏神经官能症临床的疗效进行观察。方法将我院2012年4月至2013年1月间收治的心脏神经官能症患者156例分为观察组78例以及对照组78例。对照组采用谷维素片进行治疗,观察组采用益心舒胶囊治疗进行治疗,对比两组患者的治疗疗效。结果对照组的总有效率为51．29％,观察组的总有效率为92．31％,观察组的总有效率较对照组更优,另外观察组的副反应发生症状情况较对照组更优,两组比较差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论益心舒胶囊治疗心脏神经官能症具有很好的效果,值得临床推广。     

中药干预细胞焦亡防治骨关节相关疾病机制研究进展

骨关节炎（OA）、类风湿关节炎（RA）、痛风性关节炎（GA）、椎间盘退变（IVDD）作为临床上最为常见的几种骨关节相关疾病，均可累及相关关节，导致关节疼痛、肿胀、功能障碍等症状，不同的是OA主要是由于关节磨损和年龄相关的退化导致的，表现为关节疼痛、僵硬和运动受限，RA是一种自身免疫性疾病，表现为关节疼痛、肿胀、晨僵和全身症状，GA是尿酸代谢异常引起的关节炎，表现为急性关节炎，而IVDD是椎间盘结构退行性变引起的。研究表明，上述骨关节疾病发生发展机制极其复杂，细胞焦亡通过参与骨关节炎症反应、软骨代谢失衡、细胞外基质降解、骨关节病理损伤与上述骨关节相关疾病密切相关，抑制骨关节相关细胞细胞焦亡将有效防治骨关节相关疾病。同时众多研究证实，中医药防治骨关节相关疾病疗效突出、优势明显，中医药能够通过抑制细胞焦亡，达到减轻骨关节炎症反应、改善骨关节疾病病理损伤、缓解骨关节疼痛的治疗作用。因此，该文以期通过阐述细胞焦亡与骨关节相关疾病发生发展的关系，并总结中药单体、中药提取物及中药复方干预细胞焦亡治疗骨关节相关疾病的最新研究报道，为骨关节疾病发病机制及药物治疗的深入研究提供新思路，为临床上运用中医药防治骨关节疾病提供依据。     

良性前列腺增生并发前列腺炎患者前列腺液白细胞介素水平与前列腺特异性抗原的相关性研究

目的研究良性前列腺增生(BPH)并发前列腺炎患者的前列腺液白细胞介素水平和前列腺特异性抗原(PSA)的相关性。方法回顾本院2014年7月到2018年1月本院收治的115例良性前列腺增生患者的临床资料,分析其并发前列腺炎的情况、前列腺液白细胞介素水平、总PSA(TPSA)和游离PSA(FPSA)及FPSA/TPSA。结果115例BPH患者中有76例并发前列腺炎,其中I级炎症37例、II级炎症25例、III级炎症13例。III级炎症组的炎症范围、炎症程度均显著高于I级、II级炎症组,差异均有统计学意义(P<0.05)。III级炎症组的IL-2、IL-6、IL-8、IL-10均显著高于I级炎症组、II级炎症组,差异均有统计学意义(P<0.01)。III级炎症组的TPSA、FPSA显著高于I级炎症组、II级炎症组,差异均有统计学意义(P<0.01);三组的FPSA/TPSA比较,差异无统计学意义(P>0.05)。经Pearson直线相关法分析,BPH并发前列腺炎患者的前列腺液IL-2与PSA、FPSA均无显著相关性(P>0.05);前列腺液IL-6、IL-8、IL-10与TPSA、FPSA均呈显著正相关(P<0.05)。结论BPH并发前列腺炎是患者PSA升高的危险因素,且患者前列腺液的IL-6、IL-8、IL-10水平与PSA存在良好的相关性,临床可据此进行BPH并发前列腺炎的诊断和治疗,以提高临床疗效。