hTEFT重组绿色荧光表达载体的构建与表达

目的构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)片段的真核表达质粒。方法用RT-PCR方法从肝癌组织中提取总RNA扩增出hTERT基因片段,将其连接pGEM-TEasy质粒上,将重组质粒pGEM-T-hTERT和pEGFP-C3真核绿色荧光蛋白表达载体同时用HindⅢ和BamHⅠ双酶切后进行连接,再将重组的pEGFP-C3-hTERT基因片段转染NIH3T3细胞,经G418筛选获得稳定转染的细胞系,荧光倒置显微镜观察并检测转染细胞的hTERTmRNA表达水平。结果DNA序列分析证实了重组载体pGEM-T-hTERT和pEGFP-C3-hTERT内插入片段的碱基组成与公开发表的hTERT序列一致。转染pEGFP-C3-hTERT的NIH3T3细胞可见绿色荧光,并检出高水平表达的hTERT。结论成功构建高效表达hTERT的真核表达载体,为以hTERT为靶点的肿瘤治疗打下实验基础。     

写作体会（一）

经检索,在早期的文献中并没有“模拟教学”这一概念,但这并不妨碍人们自觉或不自觉在实践中运用这一教学思想。我从小的愿望是长大后成     

输卵管插管治疗患者270例健康教育体会

目的探讨输卵管插管治疗受术患者的健康教育方式，以便更好地使患者接受治疗并予以配合，减少不良反应的发生，减轻受术者的痛苦。方法制定专项健康教育计划，对270例输卵管插管治疗的患者入院后、治疗前、治疗中、治疗后适时适地分阶段进行针对性健康教育，评估效果。结果本组270例，均较顺利地完成治疗。结论输卵管插管是产科一种重要的治疗方法，治疗中有一定的不适，因此对患者进行健康教育，建立一种指导、合作或共同参与的新型护患关系，使患者接受护士传递的信息并予以配合，可使患者身心处于最佳的诊疗状态。     

基于问题的学习在预防血标本溶血中的实践与效果

目的分析问题式学习预防血标本溶血的效果。方法采用问题式学习模式,对22名护士进行避免血标本溶血相关措施的培训,比较培训前后血标本溶血的发生情况。结果培训后血标本溶血的发生率为4．36％,低于培训前（8．63％,P〈0．01）。结论问题式学习是一种有效降低血标本溶血的培训方法。     

隐性脊柱裂流行病学及诊疗研究进展

隐性脊柱裂(spina bifida occulta,SBO)是指有一个或数个椎骨的椎板闭合不全,脊柱背侧皮肤完整,椎管内的脊髓及神经组织不会直接突出于皮肤表面的脊柱裂.SBO可发生于脊柱任何部位,但常发生于腰骶部,可伴有脊髓神经发育畸形,产生神经系统、泌尿系统、消化系统以及运动系统等一系列临床症状和体征.SBO若伴有脊髓神经损伤会影响脊髓的正常解剖,使其受到异常牵拉,局部缺血、缺氧,可造成神经功能障碍而产生一系列临床症状,称脊髓栓系综合征(tethered spinal cord syndrome,TCS).国内外目前对SBO特别是合并TCS时的诊治存在一定争议,故本文就SBO的病因、发病率、及诊断治疗研究进展进行综述.     

子宫输卵管造影致肺栓塞40例临床分析

4860例子宫输卵管造影中发现碘油肺栓塞40例(0.82%),其中原发不孕17例,继发不孕23例.各种原因引起的输卵管炎症导致输卵管梗阻、畸形,幼稚子宫及宫腔占位致宫腔变小,致使造影时宫腔压力过高是引起肺栓塞的主要原因.其次造影时间选择过早也可发生肺栓塞.因此必须正确选择造影时间,在透视下严格操作,尽早发现各种逆流,以便减少严重后果的发生.     

两种帕罗西汀片剂生物等效性试验中不良事件的比较

目的:比较仿制药与原研药帕罗西汀片剂40mg在生物等效性试验中不良事件的发生情况。方法:通过对仿制药与原研药帕罗西汀片剂40mg在空腹和高脂饮食状态下生物等效性试验的观察,收集并对比分析两种片剂在试验中引发的不良事件。结果:在空腹组发现不良事件21例,其中服用仿制药帕罗西汀片的13例,原研药帕罗西汀片8例。在高脂饮食组发现不良事件15例,其中服用仿制药帕罗西汀片的8例,原研药帕罗西汀片7例。对比两种药物的不良事件发生率,差异无统计学意义(P>0.05)。以上不良事件均为可预期、轻中度、一过性、可耐受,未见有其他临床意义的症状、体征。结论:仿制药帕罗西汀片剂40mg安全性较高,但药物本身不良反应较多,服药后应关注其不良反应。     

超选择子宫动脉栓塞治疗晚期剖宫产术后出血的护理

目的探讨超选择子宫动脉栓塞治疗晚期剖宫产术后出血的护理措施。方法工作开展前培训护士,术前做好宣教工作,重视心理护理,讲解介入手术优点、原理、过程、效果和手术风险,完善术前常规准备;重视术后观察及护理,密切观察生命体征,观察腹股沟穿刺点,护理穿刺侧肢体,观察疼痛、不规则阴道出血及恶心、呕吐等常见的胃肠道反应,做好尿管的护理。结果采用超选择性子宫动脉栓塞术治疗11例晚期剖宫产术后出血患者,取得较好疗效,全部康复出院。结论对全体工作人员培训相关知识,做好围手术期护理,保证护理措施得当,有利于新技术的开展,减少并发症促进患者康复。     

hTERT原核重组质粒的表达

目的本课题拟观察原核重组质粒pGEX4T1hTERT在BL21细菌中的表达,为进一步探讨以hTERT为靶点的肿瘤基因免疫治疗提供实验依据。方法IPTG诱导带有pGEX4T1hTERT质粒的BL21细菌融合蛋白的表达,取不同时间的培养物进行SDSPAGE分析,并进行薄层凝胶光密度扫描测定目的蛋白表达量,同时对表达产物进行Westernblot检测。结果对SDSPAGE结果分析发现,含pGEX4T1hTERT质粒的BL21细菌能够表达出63kD的融合蛋白。薄层凝胶光密度扫描测定其表达水平最高为28.4%,以IPTG诱导4h表达量最高。Westernblot检测表明该融合蛋白可被hTERT多抗识别。结论诱导pGEX4T1hTERT重组质粒,获得分子量为63kD的GSThTERT融合蛋白。用抗hTERT目的基因片段表达的相应抗原蛋白。     

TTV病毒ORF1抗原的基因克隆及原核表达

目的 扩增和克隆TTV-ORF1 DNA,构建原核表达载体并在大肠杆菌表达.方法 从TTV病毒感染者外周血中提取DNA,用PCR从中扩增出TTV-ORF1 DNA,插入载体pGEM-T Easy中;测序正确后,克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中,构建重组表达载体pGEX-4T-1-ORF1,转化大肠杆菌BL21株进行表达.结果 成功获得TTV-ORF1编码基因并构建原核表达载体,测序结果与GenBank收录序列相一致.诱导表达得到51kD的TTV-ORF1融合蛋白,占细菌总蛋白量的27.2%.Western blot证实为目的蛋白.结论 成功获得TTV-ORF1 DNA,构建得原核表达载体并获得高效表达.为TTV的ELISA检测和疫苗提供抗原.