影响中等卫生学校实验质量的因素分析及对策

中等专业卫校是以培养实用型初级医药卫生技术人员为目的,其课程设置以理论和实验并重,才能保证学生的专业水平。学校扩招后如何提高实验质量,重视并加强学生的实验操作技能,更好满足社会需求,已成为中等卫校的首要任务。本对影响中等卫校实验质量的因素进行了分析并提出相应的对策。     

苦荞类黄酮3’-羟化酶基因的克隆及其冷胁迫下的组织表达

目的 克隆苦荞Fagopyrum tataricum类黄酮3’-羟化酶（flavonoid 3’-hydroxylase,F3’H）基因全长cDNA序列,对该基因进行序列分析和原核表达,以及冷胁迫条件下该基因表达量和花青素定量测定。方法 采用同源克隆和RACE技术从苦荞花蕾中克隆苦荞F3’H（FtF3’H）;构建FtF3’H原核表达载体pET-30b （+）-FtF3’H,在大肠杆菌BL21（DE3）中进行诱导表达;采用半定量RT-PCR分析FtF3’H基因在冷胁迫下芽期苦荞不同组织的表达量,并采用分光光度计法测量花青素量。结果 苦荞FtF3’H基因含有一个1 470 bp的ORF,编码489个氨基酸,编码蛋白属于细胞色素P450家族;SDS-PAGE分析表明,目的蛋白相对分子质量54 000;芽期苦荞冷胁迫处理前后子叶和胚轴中FtF3’H表达量以及花青素量的变化分析表明,冷胁迫显著增强了FtF3’H的表达和花青素的积累（P<0.05）。结论 成功克隆FtF3’H基因,并实现了FtF3’H基因的异源表达;芽期苦荞在冷胁迫下,可能通过提高FtF3’H基因表达量进而促进花青素的合成,参与其抗逆生理过程。