补阳还五汤通过小窝蛋白1调控Shh信号通路促进脑缺血后星形胶质细胞转分化

目的 基于小窝蛋白1(caveolin-1,Cav1)/音猬因子(sonic hedgehog,Shh)信号通路探讨补阳还五汤对脑缺血后星形胶质细胞转分化的作用机制。方法 雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组及补阳还五汤低、中、高剂量(9.25、18.50、39.00 g/kg)组和丁苯酞(54 mg/kg)组,除假手术组外,其余各组采用大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)法复制脑缺血模型,给予药物干预21 d后,采用神经行为学评分、苏木素-伊红染色及免疫组化评估补阳还五汤疗效。随后将雄性野生(WT)小鼠及Cav1^-/-(KO)小鼠分别随机分为假手术组、模型组和补阳还五汤(18.5 g/kg)组,造模前7 d予以脑内注射GFAP-EGFP腺相关病毒,采用MCAO法制备脑缺血模型,给予药物干预21 d。采用免疫荧光检测缺血侧皮质区星形胶质细胞转分化情况,Western blotting法检测缺血侧皮质区Shh、平滑同源物(smootened,Smo)及神经胶质瘤关联癌基因同源物1(glioma ass...     

补阳还五汤通过cAMP/PKA/PPARγ 通路调控脂质代谢抗大鼠脑缺血再灌注损伤的作用

目的 探究补阳还五汤通过cAMP/PKA/PPARγ 通路调控脂质代谢抗大鼠脑缺血再灌注损伤的作用机理。 方法 将60 只大鼠随机分为假手术组、模型组、丁苯酞组及补阳还五汤低、中、高剂量组。采用短暂性大脑 中动脉栓塞法制备脑缺血再灌注模型,补阳还五汤低、中、高剂量组予不同剂量补阳还五汤灌胃（6.413、 12.825、25.65 g·kg-1）,丁苯酞（NBP）组予丁苯酞灌胃（54 mg·kg-1）,假手术组和模型组予等体积蒸馏水灌胃, 连续14 d。对大鼠进行神经行为学评分,HE 染色观察大脑病理变化,试剂盒检测缺血侧磷酸胆碱（PC）、磷脂 酰乙醇胺（PE）、甘油二酯（DAG）、游离脂肪酸（FFA）含量,RT-qPCR 和Western Blot 法检测环磷酸腺苷 （cAMP）、蛋白激酶A（PKA）、过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARγ）中mRNA 及蛋白表达。结果 与假手术 组比较,模型组神经功能缺损评分明显升高（P＜0.01）;缺血侧皮质出现病理形态损伤;PC、PE 含量降低, DAG、FFA 含量升高（P＜0.01）;cAMP 的mRNA 升高（P＜0.05）。与模型组比较,补阳还五汤低剂量组神经功 能缺损评分降低（P＜0.05）,补阳还五汤中、高剂量组和丁苯酞组神经功能缺损评分明显降低（P＜0.01）;各给 药组细胞排列相对规整,细胞间隙减小,正常细胞增多;补阳还五汤中、高剂量组和丁苯酞组PC、PE 明显升 高,DAG、FFA 明显降低（P＜0.01）;补阳还五汤低剂量组PC 升高,FFA、DAG 明显降低（P＜0.05,P＜ 0.01）;补阳还五汤低剂量组 PPARγ 的mRNA 表达升高（P＜0.05）,补阳还五汤中、高剂量组和丁苯酞组 cAMP、PKA、PPARγ 的mRNA 及蛋白表达升高（P＜0.05,P＜0.01）。结论 补阳还五汤对脑缺血再灌注损伤 大鼠具有神经保护作用,其机制可能与调控cAMP/PKA/PPARγ 信号通路关键因子的表达,调节脂质代谢有关。