肝龙胶囊联合复方甘草酸苷体外抗肝纤维化的作用

目的:通过检测肝龙胶囊联合复方甘草酸苷用药后人肝星状细胞系(LX-2)中I型胶原(Col-I),III型前胶原(PCIII),IV型胶原(IV-C),层粘蛋白(LN),透明质酸(HA),转化生长因子-β1(TGF-β1)的含量及Col-I,基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)mRNA的表达变化,探讨肝龙胶囊联合复方甘草酸苷对LX-2细胞的抗肝纤维化作用。方法:体外培养LX-2细胞,将对数期细胞分为复方甘草酸苷用药组(3.125,1.562,0.781 g·L~(-1)),空白组,肝龙胶囊(0.938,0.469,0.235 g·L~(-1))联合复方甘草酸苷(3.125,1.562,0.781 g·L~(-1))交叉用药组,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测肝纤维化四项指标PCIII,IVC,LN,HA和Col-I,TGF-β1的含量;逆转录PCR(RT-PCR)检测Col-I和TIMP-1 mRNA的表达水平。结果:与复方甘草酸苷用药组比较,联合用药组在24,48 h时均可使HA,Col-I的含量降低(P0.05),在72 h可使LN,HA,Col-I,PCIII,TGF-β1的含量降低(P0.05);与空白组比较,联合用药组可使TGF-β1含量明显降低(P0.05,P0.01);与复方甘草酸苷用药组比较,联合用药组明显降低TIMP-1 mRNA的表达量(P0.05),且呈现时间依赖性;与空白组比较,联合用药组对Col-I mRNA在24 h呈现抑制作用(P0.05),在72 h时却使其表达量增加。结论:肝龙胶囊联合复方甘草酸苷用药组可使LX-2细胞LN,HA,Col-I,TGF-β1的含量降低,抑制Col-I和TIMP-1 mRNA的表达,效果优于复方甘草酸苷用药组。肝龙胶囊增强了复方甘草酸苷的体外抗肝纤维化作用。     

灯盏花素对肝癌细胞 HepG2 和结肠癌细胞 Caco2 的体外抗肿瘤活性筛选

观察灯盏花素对人肝癌细胞（HepG2）和人结肠癌细胞（Caco2）的体外增殖抑制影响。方法以不同浓度的灯盏花素分别处理 HepG2 和 Caco2 细胞 24、48和 72 h 后采用 MTT 法检测灯盏花素对 2 种细胞活力的影响,以半数抑制浓度（IC50）及治疗指数（TI）作为评价其抗肿瘤活性及安全性指标。结果 灯盏花素对 HepG2 表现高浓度抑制作用,浓度为 20 000μmol/L 时,对 HepG2 细胞 24、48和 72 h 的抑制率分别为37%、63%和 69%;对 Caco2 细胞呈浓度依赖性,浓度为 5 000μmol/L时,对 Caco2 细胞 24、48和 72 h 的抑制率分别为72%、95%和 92%。灯盏花素对 HepG2 24h的 IC50 值为 24320.5μmol/L;48h的 IC50 值为 30 667.7μmol/L;72 h 的 IC50 值为 15 586.1μmol/L。对 Caco2 细胞 24 h 的 IC50 值为 11 417.0μmol/L;48 h 的 IC50 值为832.2μmol/L;72 h 的 IC50 值为 1 369.2μmol/L。结论 灯盏花素对 HepG2 和 Caco2 细胞均有不同程度的抑制作用,对 Caco2 的抑制效果更明显。     

灯盏花素对张氏肝细胞中CYP3A4和CYP2C19的影响和机制

目的：观察灯盏花素对人张氏肝细胞中孕烷X受体（PXR）及细胞色素P450 3A4（CYP3A4）和细胞色素P450 2C19（CYP2C19） mRNA和蛋白表达的影响,初步探讨灯盏花素对CYP3A4和CYP2C19的影响及其作用机制。方法： MTT法检测不同浓度的灯盏花素对张氏肝细胞活力的影响;采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测不同浓度灯盏花素对张氏肝细胞中PXR、CYP3A4及CYP2C19 mRNA的表达;采用Western-blot检测不同浓度的灯盏花素对CYP3A4和CYP2C19蛋白的表达影响。结果： MTT结果表明不同浓度的灯盏花素处理张氏肝细胞24 h、48 h后的IC₅₀分别为9 768.8、1 372.8 μmol·L^-1,IC₁₀分别为2 689.2、154.4 μmol·L^-1;RT-qPCR结果表明灯盏花素对CYP3A4和PXR mRNA的影响呈抑制作用,对CYP2C19 mRNA的影响呈不同程度的促进作用;Western-blot结果表明灯盏花素对CYP3A4蛋白的影响呈抑制作用,对CYP2C19蛋白的影响呈促进作用。结论：灯盏花素对CYP3A4的抑制作用可能通过抑制PXR途径;对CYP2C19的促进作用可能不经PXR通路。     

常见中药组分对孕烷X受体介导的CYP3A4转录调节机制的研究进展

目的:近年来中药在临床上的应用日益广泛,但其成分复杂,易导致药物相互作用和不良反应的发生。细胞色素P-450单氧酶3A4(CYP3A4)是细胞色素P450(CYP450)家族成员中一种重要的同工酶,负责体内外很多化合物的氧化代谢,孕烷X受体(PXR)作为CYP3A4的关键转录调节因子,可以调节CYP3A4的活性和表达,CYP3A4的改变被认为是药物发生相互作用和毒性反应的关键,本文将阐述常见中药组分通过PXR介导CYP3A4转录调节的分子机制。     

云南野生抚育粗茎秦艽药材的品质评价

目的: 研究野生抚育粗茎秦艽药材的有效成分和化学指纹图谱,以期评价其质量,为粗茎秦艽药材的GAP种植提供科学依据。 方法: 采用Zorbax SB C₁₈(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,流动相甲醇-水,梯度洗脱,流速1 mL·min^-1,检测波长238 nm,柱温为25 ℃。利用国家药典委员会出版的《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2004 A版软件,对15批3年生野生抚育粗茎秦艽药材进行指纹图谱分析。 结果: 15批粗茎秦艽药材环烯醚萜苷类有效成分及浸出物含量符合2010年版《中华人民共和国药典》要求,各样地药材化学指纹色谱相似度>0.981,质量均一性好。 结论: 方法具有良好的精密度、重复性、稳定性,可用于粗茎秦艽药材的质量综合评价。野生抚育模式药材可作为粗茎秦艽主要种植发展模式,对云南建设"云药之乡"和发展道地药材具有重要的现实意义。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆中非索非那定的浓度及其应用

目的：建立超高效液相色谱-串联质谱法（UHPLC-MS/MS）测定人血浆中非索非那定的浓度,并用于灯盏花素对人P-糖蛋白体内活性影响的研究。方法：200 μL血浆经500 μL乙腈沉淀蛋白后,采用Waters ACQUITY UPLC^® BEH C₁₈柱（50 mm×2.1 mm,1.7 μm）为色谱柱,以乙腈（A）-0.1%甲酸水（B）为流动相梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^-1;质谱采用电喷雾正离子模式离子化（ESI⁺）和多反应监测模式（MRM）扫描,非索非那定和苯海拉明（内标）的定量离子对分别为m/z 502.2→466.5和m/z 256.1→167.1。结果：非索非那定和苯海拉明的保留时间分别为2.19 min和1.89 min。人血浆中非索非那定的提取回收率、方法过程效率和基质效应均值分别为84.3%~89.6%、86.3%~90.8%和101.2%~104.2%;线性范围为1.00~1 000 ng·mL^-1（r=0.999 5）;日内、日间精密度RSD ≤ 10.9%,准确度RE%为-7.6%~5.0%;稳定性RSD和RE均在±15%内。18名志愿者给予灯盏花素或安慰剂后,非索非那定的达峰浓度C_max为（699±321）vs（710±331）ng·mL^-1、0到24 h的血浆浓度-时间曲线下面积AUC_0-24为（2 687.3±1 188.8）vs（3 015.0±1 550.2）ng·h·mL^-1、表观口服清除率CL/F为（51.3±23.8）vs（49.6±26.3）L·h^-1。结论：建立的基于UHPLC-MS/MS测定人血浆中P-糖蛋白底物非索非那定浓度的分析方法灵敏、简单,并成功应用于灯盏花素对人P-糖蛋白体内活性影响的研究。